1、【选修1第一轮复习导学案】专题2 微生物的培养与应用课题2 微生物的筛选和计数【考点1】、筛选菌种（菌株）研究思路1、 自然筛选 原理：筛选目的菌种时，要根据它对 的要求，到相应环境中去寻找。2、实验室筛选原理：人为提供有利于目的菌种 的条件（包括营养、温度、PH等），同时 其他微生物。思考：我家菜园中有如下菌种：硝化细菌、酵母菌、分解纤维素细菌等微生物。 培养基中加入 可以筛选（分离）出酵母菌。 培养基中加入 可以筛选（分离）出硝化细菌。培养基中加入 可以筛选（分离）出分解纤维素细菌。注意：以上培养基的其他营养成分完整。3、培养基（1） 、功能（作用）： 培养基；、 定义：将允许特定种类的微
2、生物生长，同时 其他微生物生长的培养基。、如何证明选择培养基具有选择作用？实验思路（方案）：将相同品种和数量的菌种接种到普通培养基和选择培养基上，然后都放到37的恒温箱中培养1-2天后，观察两组培养基上菌落数量；若普通培养基上菌落数量 选择培养基上菌落数量，则说明选择培养基具有选择作用。若普通培养基上菌落数量 选择培养基上菌落数量，则说明选择培养基不具有选择作用。（2） 、物理： 培养基；【考点2】、土壤中分解尿素的细菌的分离1、 分离的原理（1）、土壤中存在分解尿素的细菌，它们能合成 ，在把尿素分解成无机物的过程 中起到 作用。反应式： （2）、选择培养基：满足水、无机盐、碳源、但只能以 为
3、唯一氮源。2、 实验流程（1） 、土壤取样 在富含 的土壤表层取样。（2） 、接种 方法：稀释涂布平板法（3） 、培养 细菌一般在 的温度下培养1-2天。（4） 、鉴定 细菌合成的脲酶将尿素分解为 ，它会使培养基的碱性增强，因此，在培养基中加入 指示剂，则会在分解尿素菌落周围出现 色的圆圈。【考点2】、细菌的计数（1）、间接计数稀释涂布平板法、原理： 1个菌落1个活菌、操作方法：稀释菌液-涂布平板统计菌落数、统计原则：选 30300 个菌落的平板统计；每个稀释度取3个平板取其平均值计算公式：每克样品中的菌株数=（C/V)* M C:某一稀释度下平板上生长的平均菌落数； V:所用稀释液的体积；
4、M:稀释倍数滤膜计数法：（以大肠杆菌为例）、方法：将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。、结果：在该培养基上计数出现黑色菌落的数目即计算出大肠杆菌的数量（2）、显微镜直接计数原理:利用血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量优点：能准确统计微生物的实际数目。 缺点：不能区分死菌和活菌、不适于对运动细菌的计数、需要相对高的细菌浓度、个体小的细菌不容易在显微镜下观察计数【考点3】、土壤中分解纤维素微生物的分离1、 分离原理土壤中某些微生物分解纤维素，这是因为它们能产生纤维素酶，它是一种复合酶，它至少含有三种组分，即 。反应式：纤维素（ ）纤维二糖（ ）葡萄糖2、 鉴
5、定原理 与纤维素形成红色复合物，当分解纤维素微生物把纤维素分解，则培养基上会出现以纤维素分解菌为中心的 。3、 分离过程 【高考题模拟】 专题二 微生物的培养与应用课题2 微生物的筛选和计数1、要将能分解纤维素的细菌从土壤中分离出来，应将它们接种在()A加入指示剂的鉴别培养基上 B含有蛋白胨的固体培养基上C只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上 D含四大营养要素的培养基上2、用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( )A未接种的选择培养基 B未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C接种菌种的牛肉膏蛋白胨培养基 D接种菌种的选择培养基3、某同学对101、102、103倍稀释液计数的平均菌落数分
6、别是2760、295和16，则菌落总数为(所用稀释液体积为0.1 mL)()A2.76104个/mL B2.95105个/mL C4.6104个/mL D3.775104个/mL4、纤维素酶的测定方法一般是()A对纤维素进行定量测定 B对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖量进行测定C对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定 D对纤维素分解菌进行定量测定5、下列关于纤维素酶的叙述，错误的是()A纤维素可被纤维素酶水解成葡萄糖，为微生物提供营养物质B纤维素酶是一种复合酶，至少包括C1、Cx和葡萄糖苷酶三种C纤维素酶和纤维素基本单位相同D分解纤维素的细菌、真菌、放线菌，都是通过产生纤维素酶
7、来分解纤维素的6、利用农作物秸秆为原料可生产乙醇，生产过程中可采用微生物将秸秆水解或用酶水解，其主要技术流程如下图所示，下列相关说法错误的是()秸秆秸秆碎屑反应罐水解压滤出渣酒精发酵真空分馏A可用刚果红染色法筛选过程所需的纤维素分解菌 B过程加入的纤维素酶是葡萄糖苷酶C酒精发酵接种的酵母菌需在无氧条件下发酵 D酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌7、某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。(1)、采样与培养：将采集的土样混匀后称取1 g，置于经过高压蒸汽灭菌法灭菌处理的_(填“固体”或“液体”)培养基中，28 振荡培养。(2)、接种与选择：为避免培
8、养液中菌体浓度过高，需将培养液进行_处理。之后，将菌液涂布接种于以_为唯一碳源的固体培养基上，30 条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈_状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计_作为空白对照。(3)、筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是_，则说明此种菌能够_。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用_法接种于新的培养基平板上，可对菌株进行进一步的纯化。8、尿素是一种重要的农业氮肥，不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的微生物将尿素分解后才能被植物吸收利用。因此，对土壤中分解尿素的微生物进行分离和鉴定具有重要意义。回答下列问题：(1)、对
9、土壤中分解尿素的微生物的分离过程如下：第一步：土壤取样。取土样用的工具和盛土样的信封等在使用前都需要_(填“消毒”或“灭菌”)。第二步：样品稀释。通常分离不同种类的微生物要采用不同的稀释度，原因是_。第三步：微生物的培养与观察。将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，并在适宜的条件下培养。分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖，而_则不能生长繁殖。(2)、若对土壤悬液进行梯度稀释时，未经振荡而直接取上层悬液进行梯度稀释，用稀释倍数为104的样液涂布到平板上进行培养和计数，统计出的菌落数往往比正确操作统计出的菌落数_。(3)、若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定，需在如表所示培养基配方中添加的物质是_、_。若分离得到的是尿素分解菌，则培养基中pH升高使酚红指示剂变为红色，pH升高的原因是_。成分KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O酚红指示剂尿素蒸馏水培养基(含量)1.4 g2.1 g0.2 g0.01 g1.0 g1 000 mL
