1、1. 【题文】在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出()A乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌B固氮细菌、大肠杆菌、放线菌C固氮细菌、霉菌、放线菌D固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌【解析】在缺乏氮源的培养基上可以分离出固氮细菌；在培养基中加入青霉素可以分离出霉菌；在培养基中加入10%酚可以分离出放线菌。【答案】C2【题文】无菌技术常围绕着如何避免杂菌的污染展开，下列常见的无菌技术中，属于灭菌处理的是()A操作者的双手用酒精擦拭B实验室用紫外线照射C对接种环进行灼烧
2、处理D水源用氯气处理【解析】灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。【答案】C3【题文】下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是()A微生物培养前，需对培养基进行消毒B测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源【解析】微生物培养前，需对培养基进行灭菌处理，要将所有的微生物杀死。【答案】A4. 【题文】下列关于大肠杆菌的培养的叙述不正确的是()A在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件B在微生
3、物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行消毒C若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的稀释度合适D使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃【解析】培养过程中，除营养条件要满足需要外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件是否适宜；灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，所以，应对培养基和培养皿进行灭菌而不是消毒；使用稀释涂布平板法时要保证样品稀释比例合适，这样才会有更科学的数据；有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，所以使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后
4、才能丢弃，以防止培养物的扩散。【答案】B5. 【题文】下列有关培养基和菌种鉴定的叙述正确的是()A微生物培养所用的都是液体培养基B利用半固体培养基上的菌落特征来判断和鉴别细菌的类型C利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌D在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌【解析】微生物培养还会用到固体培养基和半固体培养基；利用固体培养基上的菌落特征来判断和鉴别细菌类型；在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。【答案】C6. 【题文】平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是()A都要将菌液进行一系列的梯度稀释B平板划线法是将不同稀释度的菌液通
5、过接种环在固体培养基表面连续划线的操作C稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养D都会在培养基表面形成单个的菌落【解析】平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法需要将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。【答案】D7. 【题文】在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用以尿素为唯一氮源的培养基，乙组实验的培养基中的氮源除尿素外还含有硝酸盐，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养观察，则乙组实验属于()A空白对照 B标准对照C相互对照 D条件对照【解析】乙组和甲组实验的培养条件不同，形成了条件对照。【答案】
6、D8【题文】苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，为土壤样品。下列相关叙述错误的是()A图中培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B如果要测定中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C若图中为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一碳源D使用平板划线法可以在上获得单菌落【解析】若为对照实验，则中培养基应含除苯酚外的其他碳源，中以苯酚作为唯一碳源。【答案】C9. 【题文】欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是()A将土壤用无菌水进
7、行一系列的梯度稀释B同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照D用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出能分解尿素的细菌【解析】为了获得单个菌落，应将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确；为了使结果更加准确，同一稀释度下至少要涂布3个平板进行重复实验，B正确；加入刚果红的培养基用来筛选纤维素分解菌，D错误。【答案】D10. 【题文】 (多选)下列有关微生物培养的说法正确的是()A乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是不相同的B培养基的pH因微生物的种类不同而不同C培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的增殖越有利D培养基中加入适量的杀菌剂有利于抑制杂菌的生长【解
8、析】乳酸菌的碳源是有机物，比如葡萄糖、乳糖等，硝化细菌是化能自养生物，能利用CO2和H2O合成有机物；各种微生物生长所要求的最适pH不同，如培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性，培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性；营养液浓度过高，会使微生物处于较高的渗透压环境中，导致微生物会因失水过多而死亡；杀菌剂是用于防治由各种病原微生物引起的植物病害的一类农药，一般指杀真菌剂，如果培养的是真菌，杀菌剂会将所需真菌杀灭，如果培养的目的菌为细菌，可在培养基中加入几种合适的抗生素，用以抑制杂菌生长，使所需的微生物正常生长。【答案】AB11. 【题文】请回答下列与微生物培养有关的问题。(1)在大肠杆菌培养过程
9、中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、_和_等条件。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行_；操作者的双手需要进行清洗和_；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线既能使蛋白质变性，又能_。(3)若用稀释涂布平板法对大肠杆菌活菌进行计数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保持待测样品稀释的_。(4)通常对获得的纯菌种可以依据菌落的_等菌落特征进行初步的鉴定(或分类)。(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢弃，
10、以防培养物扩散。【答案】(1)酸碱度渗透压(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3)比例合适(4)形状、大小、颜色(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(6)灭菌12. 【题文】某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题：(1)牛肉膏蛋白胨固体培养基配方如下：牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂蒸馏水5.0 g10.0 g5.0 g20.0 g定容至1 000 mL其中提供氮源的是_；提供碳源的主要物质是_。(2)微生物在生长过程中对
11、各种成分所需量不同，配制培养基时各成分要有合适的_。在烧杯中加入琼脂后要不停地_，防止_。(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌，压力100 kPa，温度_，时间_。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应_。(4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意，先向锅内倒入_。把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。(5)从一支试管向另一支试管接种时注意，接种环要在酒精灯_(填“内”或“外”)焰灭菌，并且待接种环_后蘸取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近，将接种的试管在适温下培养，长成菌落后放入_冰箱
12、中保藏。 【解析】 (1)凡能提供所需氮元素的物质均为氮源，牛肉膏、蛋白胨均含氮元素。(2)在配制培养基时营养要协调，按所培养微生物对各种成分的需求确定；在加入琼脂后，要不断搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。(3)玻璃器皿的灭菌应用高压蒸汽灭菌锅，在压力为100 kPa、温度为121条件下，灭菌1530 min。(5)酒精灯外焰温度高，灭菌效果好。灼烧后待冷却再蘸取菌种，否则会烫死菌种，造成实验失败。【答案】(1)牛肉膏、蛋白胨牛肉膏(2)比例用玻棒搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂(3)高压蒸汽灭菌锅1211530 min废弃(4)适量水(5)外冷却413【题文】下列是有关微生物的培养与应用的问题，请
13、分析回答。(1)如图是利用_法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步_分散到培养基的表面。图中右侧手拿的器具称为_。(2)分析下面培养基的配方：NaNO3，KH2PO4，NaH2PO4，MgSO47H2O，KCl，H2O。若用于培养纤维素分解菌，应加入_物质，为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入_染料。(3)获得的菌种如果需要长期保存，可以采用_的方法。【答案】(1)平板划线稀释接种环(2)纤维素粉刚果红(3)甘油管藏14【题文】尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，某同学试图从土壤中筛选出能高效降解尿素的细菌(目的菌)，表中所示
14、是该同学配制的培养基成分：KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖10.0 g(NH4)2SO41.0 g琼脂15.0 g蒸馏水定容到1000 mL(1)该培养基中的主要营养物质包括_。从状态上看，该培养基属于_培养基。(2)在生物的培养中，一般要对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了_。(3)若培养从土壤中分离出来的目的菌，该培养基成分如何调整？_，依据是_。该目的菌同化作用类型是_。(4)该同学在纯化土壤中的目的菌时，最常用的接种方法是_。在纯化土壤中该目的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_。【答案】(1)氮源、碳源、无机盐和水固体(2)杀死培养基中的细菌芽孢(3)将(NH4)2SO4换成尿素要筛选出降解尿素的细菌，只能以尿素作为唯一的氮源异养型(4)稀释涂布平板法和平板划线法菌液浓度过高(或培养过程中被杂菌污染，或用接种针划下一区域前接种针没有灭菌导致菌液没有稀释开，言之有理即可)
