1、基础课时案41植物组织培养1(2014山东聊城一中调研，22)在植物组织培养过程中，激素的添加已成为一种常规的实验手段，在植物组织培养过程中已研究过的植物激素有：生长素、细胞分裂素、赤霉素等。下表为某同学研究激素的使用顺序对实验结果的影响，请回答相关问题：使用顺序实验结果先使用NAA，后使用KT有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用KT，后使用NAAA同时使用B(1)植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、_和_的关键性激素。该实验中属于细胞分裂素类的是_。(2)请将表格中空白处A和B补充完整，A为_，B为_。若NAA和KT的用量比值适中时，促进_的形成。(3)用于离体培养的植物器官或组织称为
2、_。若该实验材料为菊花，则应对其进行_(消毒/灭菌)。(4)接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养环境应注意调节合适的_和_。接种过程要注意在_旁进行。解析(1)生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，NAA属于生长素类，KT属于细胞分裂素类。(2)先使用NAA，后使用KT，有利于细胞分裂，但细胞不分化；先使用KT，后使用NAA，细胞既分裂又分化；NAA和KT同时使用，分化频率提高；NAA和KT的用量比值适中时，有利于愈伤组织的形成。(3)用于离体培养的植物器官或组织称为外植体，组织培养过程中应对外植体消毒。(4)接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应注意调节温
3、度和光照时间，接种过程要注意在酒精灯火焰旁进行，以免杂菌污染。答案(1)脱分化再分化KT(2)细胞既分裂又分化分化频率提高愈伤组织(3)外植体消毒(4)温度光照时间酒精灯火焰2(2014湖北武汉高三调研)下面是关于月季花药培养的相关问题，请回答下面的问题。(1)通过花药培养产生花粉植株一般有两种途径：一种是花粉通过_发育成植株；另一种是花粉在诱导培养基上先形成_，再将其诱导分化成植株。两条途径主要取决于培养基中_。(2)通常选择_的花蕾作为实验材料，对花药取样后用_对其染色，镜检发现大多数的花粉含有两个核，该时期花药_(适宜、不适宜)进行接种。(3)在花药培养过程中发现：接种花药的培养基中，花
4、药边缘出现杂菌，其余部分正常，未接种的培养基正常。出现该现象的原因最可能是_。(4)花药培养在育种上有特殊意义。采用花药培养的方法，可使花药粒发育成_倍体植株，在经过人工诱导_，使其能够正常生殖。该育种技术的最大优点是_。解析(1)花药离体培养可以有两条产生植株的途径，除了花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株的途径外，还可以通过胚状体进一步分化产生植株。两种发育途径主要取决于激素的种类及浓度比。(2)通常选择完全未开放的花蕾作为实验材料，可以用醋酸洋红或龙胆紫溶液对花药进行染色，如果镜检发现大多数的花粉含有两个核，则该时期花药不适宜进行接种。(3)如果在接种花药的培养基中发现
5、花药边缘出现杂菌，其余部分正常，未接种的培养基正常，出现该现象可能由于花蕾消毒不彻底。(4)采用花药培养的方法获得的植株是单倍体植株，再经过人工诱导染色体加倍，使其能够正常生殖。单倍体育种最大优点是缩短了育种周期。答案(1)胚状体阶段愈伤组织激素的种类及其浓度配比(2)完全未开放醋酸洋红不适宜(3)花蕾消毒不彻底(4)单染色体加倍缩短了育种周期3矮牵牛是观赏花卉，生产上常用组织培养繁殖，下表是在不同条件下矮牵牛不同部位组织培养的结果。请结合实验结果和有关知识回答下列问题。外植体浓度/(mgL1)一周后1月后40 d后6BANAA丛芽不定根叶20.2愈伤组织大量无大量无根试管苗0.50.2愈伤组
6、织少量少量少量试管苗00.2愈伤组织无大量大量不定根00愈伤组织无无死亡茎尖20.2愈伤组织大量无大量无根试管苗茎段20.2外植体膨大愈伤组织大量丛芽(1)培养基接种前需要对外植体进行_处理，培养基进行_处理，以防止污染。(2)从表中结果可知，选择_作外植体，6BA浓度为_，NAA浓度为_时可以获得大量的无根试管苗。(3)培养基中，6BA属于_类生长调节剂，NAA属于_类生长调节剂。无根试管苗在移栽前需要诱导生根，诱导生根的培养基中一般不加入_(填“6BA”或“NAA”)，并且需要降低培养基中_浓度，以便提高试管苗的自养能力。解析为了防止在培养过程中杂菌的污染，需对外植体进行消毒处理，对培养基
7、进行灭菌处理。由表中信息知，选择叶或茎尖作外植体，6BA浓度为2 mgL1，NAA浓度为0.2 mgL1时，可以获得大量无根试管苗。结合植物组织培养技术可知，6BA属于细胞分裂素类生长调节剂，NAA属于生长素类生长调节剂。诱导生根的培养基中一般不加入6BA，为提高试管苗的自养能力，需降低蔗糖浓度，降低试管苗对蔗糖的依赖性。答案(1)消毒灭菌(2)叶或茎尖2 mgL102 mgL1(3)细胞分裂素生长素6BA蔗糖4(2014湖南长沙二模，39)下图表示菊花的嫩枝和月季的花药离体培养过程，请据图回答下面的问题。(1)对菊花来说，要选取_的嫩枝来进行组织培养。对月季来说，适宜花粉培养的时期是_期。为
8、确定花粉是否处于该时期，最常用的方法是_。(2)在培养花粉的培养基中要加入一定的植物激素，常用的植物激素有_。(3)某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。为了避免其他微生物对培养造成的影响，所以在进行接种时应注意_。接种室要消毒只要戴口罩，操作时便可说话外植体可预先用体积分数为70%的酒精浸泡，取出用无菌水冲洗后，再用0.1%的氯化汞溶液消毒，并用无菌水冲洗干净接种操作要在酒精灯火焰旁进行接种完毕应立即盖好瓶盖A BC D(4)月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植株产生的途径
9、来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过_阶段发育而来，这两种发育途径的差别主要取决于_。(5)不同植物对各种条件的要求往往不同，进行菊花组织培养一般将温度控制在_，并且对光照的控制为_。解析(1)植物组织培养法获取菊花植株时选用的材料一般是生长旺盛的嫩枝。月季的花药培养中选择单核期的花药离体培养，成功率最高，确定花粉发育期最常用的方法是醋酸洋红法。(2)在培养花粉的培养基中要加入细胞分裂素和生长素。(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某几种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，可知道其中含有能够分解尿素的细菌。(4)月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植株产生的途径来说，花粉植株的产生一般有两种途径：一是花粉通过胚状体阶段发育为植株；另一种是花粉在诱导培养基上，先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。这两种发育途径的差别主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。答案(1)生长旺盛单核醋酸洋红法(2)细胞分裂素和生长素(3)酚红C(4)胚状体培养基中激素的种类及其浓度配比(5)1822每天12 h光照
