1、一、选择题(每小题4分，共28分)1欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是(B)A将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌C同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板D可将未接种的培养基在相同条件下培养作为空白对照解析：要从土壤中分离出能分解尿素的细菌，可先将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确；用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解纤维素的细菌，用加入酚红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌，B错误；同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，计数时取其平均值，C正确；可将未接种的培养基在相同条件下培养作为空白对照，D正确。2关于统
2、计微生物数目，说法错误的是(C)A因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离B测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围不同C只有得到了3个或3个以上菌落数目在30300的平板，才说明系列稀释操作成功D每次统计菌落数目，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果解析：土壤中各种微生物数量不同，细菌大约为70%90%，其次是放线菌，真菌最少，故不同类型微生物，要按不同稀释倍数进行，A正确；根据选项A可知，土壤中各类微生物的数量不同，因此测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，需要选用的稀释范围不同，B正确；在同一稀
3、释度下只要得到两个或两个以上的菌落数目在30300的平板，就说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，C错误；每次统计菌落数目，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果，D正确。3下列关于土壤取样的叙述，错误的是(C)A土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B先铲去表层土38 cm，再取样C取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D应在火焰旁称取土壤解析：土壤取样过程中，为防止杂菌污染，取样用的小铁铲和信封在使用前必须灭菌。4下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是(B)A3号试管的稀释倍数为103倍B4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为5号试管的10倍C
4、5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7109个D该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高解析：2号试管中样品液的稀释倍数为103倍，A错误；4号中稀释液进行平板培养，稀释倍数比5号的低10倍，如果稀释倍数适当，得到的菌落平均数可能是5号的10倍，B正确；5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168175167)3101051.7108(个)，C错误；稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，D错误。5可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是(A)A以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B以尿
5、素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂D以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析：鉴定分解尿素的细菌在培养基中加酚红指示剂是最好的办法。加入二苯胺试剂鉴定DNA，苏丹试剂鉴定脂肪，双缩脲试剂鉴定蛋白质。6三个培养皿中分别加入10 mL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36小时后，计算菌落数，结果如下表。下列选项不正确的是(C)培养皿培养基成分菌落数琼脂、葡萄糖35琼脂、葡萄糖、生长因子250琼脂、生长因子0A.该实验采用的是固体培养基B该实验采用稀释涂布平板法接种C和对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D和对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类
6、解析：与对照，缺少生长因子，菌落数少于，说明大肠杆菌需要生长因子。7下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，不正确的是(A)A用尿素为唯一氮源，加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂不变红B分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解产生氨和二氧化碳C统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在30300的平板进行计数D将实验组和对照组平板倒置，3037 恒温培养2448小时解析：用尿素为唯一氮源，加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红，A错误；分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解为氨和二氧化碳，B正确；统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在30300的平板进行计数，求其平均值，C正
7、确；将实验组和对照组平板倒置后，3037 恒温培养2448小时，D正确。二、非选择题(共22分)8(22分)下图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，回答有关问题：(1)图中选择培养基应以尿素为唯一氮源；鉴别培养基还需添加酚红作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，由于尿素被分解成的氨使培养基的碱性增强，pH升高，其菌落周围的指示剂将变成红色。(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是稀释涂布平板法，每克土壤样品中的细菌数量为1.75108个。(3)与血
8、细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较低，其原因是由于两个或多个细菌连接在一起时，往往统计的是一个菌落，故用此方法测得的细菌数偏低。解析：(1)脲酶能够催化尿素分解为氨，故图中选择培养基应以尿素为唯一氮源，鉴别培养基还需添加酚红作指示剂，由于尿素被脲酶分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，从而使酚红指示剂变红。(2)用于计数细菌菌落数的常用方法是稀释涂布平板法，统计的菌落数应介于30300之间，故选择细菌菌落数为156、178和191的平板计数。每克该土壤样品中的菌落数对应的应该是每毫升菌液中的细菌数目，所以每克该土壤样品中的菌落数为(156178191)30.11051.75108。(3)由于两个或多个细菌连接在一起时，往往统计的是一个菌落，所以用此计数方法测得的细菌数偏低。
