1、一、选择题(每小题4分，共20分)1下列有关PCR技术的叙述正确的是(B)A作为模板的DNA序列不能在每一次扩增中重复使用B作为引物的脱氧核苷酸序列不能在每次扩增中重复使用C反应需要的DNA聚合酶不能在每次扩增中重复使用D反应需要的DNA连接酶不能在每次扩增中重复使用解析：PCR中模板DNA序列可反复在每一次循环中用作模板；反应过程中需要的DNA聚合酶可重复使用；反应不需要DNA连接酶；而每一次循环用到的引物都会一直成为产物DNA中的一部分序列，在下一个反应循环中作为模板DNA，所以不可重复作为引物。2在判断抗虫基因是否成功转入棉花基因组的方法中，不属于分子检测的是(A)A通过观察害虫吃棉叶是
2、否死亡B检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带C检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带D检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带解析：通过观察害虫吃棉叶是否死亡属于个体水平的检测，检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带属于分子水平检测。3科学家通过基因工程的方法，能使大肠杆菌产生人的胰岛素。以下叙述错误的是(D)A可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒B导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达CDNA连接酶和限制性内切酶都是构建重组质粒必需的工具酶D目的基因的检测与表达过程中没有发生碱基互补配对解析：导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
3、，如，该人胰岛素基因是从基因组文库中获得的，则会由于含有内含子，而无法在大肠杆菌中正常转录，进而不能成功表达。目的基因的检测与表达过程中有碱基互补配对的现象，如利用DNA分子杂交技术检测目的基因是否成功导入时，目的基因和分子探针间杂交的原理就是碱基互补配对原则。4下列关于基因工程的叙述，错误的是(D)A目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达解析：人胰岛素原基因中有内含子存在，因此在大肠杆菌中表达后无生物活性。载体上的抗性基因
4、有利于筛选含重组DNA的细胞，但由于它和目的基因是相互独立的，并不能促进目的基因的表达。5基因工程技术也称为DNA重组技术，其实施必须具备的四个必要条件是(C)A目的基因限制酶载体受体细胞B重组DNARNA聚合酶限制酶连接酶C工具酶目的基因载体受体细胞D模板DNAmRNA质粒受体细胞解析：基因工程是把供体生物的基因(目的基因)导入受体(细胞)，并使其成功表达，以使受体获得新的遗传特性的过程。因此该过程需要有目的的基因、受体细胞及其工具(工具酶和载体)。二、非选择题(共30分)6(14分)1970年，特明和巴尔的摩证实了RNA病毒能依赖RNA合成DNA的过程，并发现了催化此过程的酶。下面为形成c
5、DNA的过程和PCR扩增过程示意图。请根据图解回答下列问题。(1)催化过程的酶是反转录酶(或逆转录酶)；核酸酶H的作用是分解RNA。(2)过程也称为DNA的变性，此过程在温度高达9095 时才能完成，说明DNA分子具有稳定性。(3)由图中信息分析可知，催化过程的酶都是DNA聚合酶，两者在作用特性上的区别是催化过程的酶耐高温。(4)如果RNA单链中有碱基100个，其中A占25%，U占15%，则通过该过程合成的一个双链DNA片段中有胞嘧啶60个。解析：根据图示可以看出，该过程是RNA在逆转录酶的催化作用下形成cDNA(负链DNA) ，构成RNADNA中间体。中间体中的RNA再经过RNA酶H水解，而
6、以剩下的负链DNA复制成双链DNA的过程。过程是由RNA合成DNA的过程，需要逆转录酶进行催化。过程是以单链DNA复制获得双链DNA的过程需要DNA聚合酶催化。属于双链DNA复制的过程，需要DNA聚合酶催化。过程在7075 环境下进行，所需要的酶应该能够耐高温。7(16分)肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。图1请回答：(1)进行过程时，需用限制性核酸内切(或限制)酶切开载体以插入let7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let7基
7、因转录，该部位称为启动子。(2)研究发现，let7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取RNA进行分子杂交，以直接检测let7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中RAS蛋白(RAS mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。图2解析：(1)基因工程中目的基因和载体需要同一种限制性核酸内切酶切割产生相同的黏性末端，使目的基因与载体结合，载体中与RNA聚合酶识别和结合的部位是启动子。 (2)检测目的基因是否转录需提取受体细胞中的RNA进行分子杂交；由图2可知let7基因转录加工生成miRNA抑制RAS mRNA翻译，则不能产生RAS蛋白，因此RAS蛋白含量减少，则肺癌细胞的增殖就受到抑制。
