1、离心技术在试题中的应用差速离心：利用不同的离心速度所产生的不同离心力，将各种亚细胞组分和各种颗粒分开。超速离心机的离心速度为每分钟60000转或更多，主要用于分离制备线粒体、溶酶体和病毒等以及具有生物活性的核酸、酶等生物大分子。在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为：细胞核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高尔基体、最后为核蛋白体。差速离心只用于分离大小悬殊的细胞，更多用于分离细胞器。教材中关于细胞器的研究就是借助这种方法实现的。密度梯度离心法：这种方法使用一种密度能形成梯度（在离心管中，其密度从上到下连续增高）又不会使所分离的生物活性物质凝聚或失活的溶剂系统，离心后各物质颗粒能按其各自的比
2、重平衡在相应的溶剂密度中形成区带。常用的密度梯度溶剂是蔗糖或氯化铯溶液。用蔗糖时，先将蔗糖溶液制成密度梯度溶液，再在其顶端加样品。离心后，如欲收集所分离的组分，可在离心管的下端刺一小洞，然后分部收集。如用氯化铯这种密度大又扩散迅速的溶剂系统时，可将样品均匀地混合于溶剂中。离心达到平衡后，氯化铯溶液形成密度梯度，样品中各组分也在相应密度处形成区带。如DNA复制的半保留性研究，目的基因分离等。【例1】阅读下文，并回答以下各问题：把菠菜叶放进适当的溶液中，进行研磨。将研磨液用纱布过滤后，除去未磨碎的组织，得到一种绿色的液体。把其倒入离心管中，进行适当强度的离心分离，得到沉淀（沉淀A）。将此沉淀用电子
3、显微镜进行观察时，可发现细胞壁的碎片和（甲）膜上具有许多小孔的球状结构。将其上清液的绿色部分进行较强力的离心分离时，绿色部分几乎全部沉淀（沉淀B）。用电子显微镜观察此沉淀，发现有许多（乙）直径为几微米的细胞器。又把几乎透明的上清液，用更强的离心力进行分离时，可得沉淀（沉淀C）。用电子显微镜观察此沉淀，则发现（丙）许多直径约0.5um的球状或短棒状，内外包着两层膜且向内折叠的细胞器。如继续进行强力离心时，可使上部的澄清部分中的小微粒都沉淀，此沉淀（沉淀D）其中含有许多（丁）直径约0.02um的致密小颗粒和（戊）由该颗粒所附着的膜构成的细胞器。（1）：上述文章中划线处（甲）（戊）所示的细胞结构名称
4、分别是 A 细胞核叶绿体线粒体内质网核糖体B 线粒体叶绿体细胞核内质网核糖体C 细胞核叶绿体线粒体核糖体内质网D 线粒体叶绿体细胞核核糖体内质网（2）：下文是对上述沉淀AD所含有关细胞器的叙述。请从中找出正确答案填入各自的括号内。沉淀A（ ），沉淀B（ ），沉淀（ ），沉淀D（ ）。 与CO2的产生和ATP的生成有关 具有全透的性质，对植物细胞的形态具有维持作用 是蛋白质合成的主要场所 含有大量的DNA 含有与糖酵解有关的酶 与氧的产生和ATP的生成有关 含有与三羧酸循环和电子传递系统有关的酶 含有CO2合成葡萄糖或淀粉有关的酶 是合成某些专供输送到细胞外的蛋白质的细胞器【解析：本题根据不同细
5、胞结构的形态进行鉴别并考查其功能。（甲）膜上具有许多小孔的球状结构，说明甲是细胞核。乙是叶绿体。（丙）许多直径约0.5um的球状或短棒状，内外包着两层膜且向内折叠的细胞器，知丙是线粒体。由许多（丁）直径约0.02um的致密小颗粒和（戊）由该颗粒所附着的膜构成的细胞器，可知丁和戊分别为核糖体和内质网。接下来分析细胞器来源于那个沉淀物中，就可以明白相应沉淀物的作用。如沉淀C中含有线粒体，所以关于沉淀C中所含细胞结构的叙述：与糖酵解有关的酶和含有与三羧酸循环和电子传递系统有关的酶是正确的；沉淀D中含有核糖体和内质网，所以关于沉淀D中所含细胞结构的叙述：是蛋白质合成的主要场所和是合成某些专供输送到细胞
6、外的蛋白质的细胞器是正确的。【答案】：（1）C （2）A B C D 【例2】含有32P或31P的磷酸，两者化学性质几乎相同，都可能参与DNA分子的组成，但32P比31P质量大。现在将某哺乳动物的细胞放在含有31P磷酸的培养基中，连续培养数代后得到G0代细胞。然后将G0代细胞移至含有32P磷酸的培养基中培养，经过第一、二次细胞分裂后，分别得到G1、G2代细胞。再从G0、G1、G2代细胞中提取DNA，经密度梯度离心后得到结果如下图。由于DNA分子质量不同，因此在离心管内的分布不同。若、分别表示轻、中、重3种DNA分子的位置。请回答：（1）G0、G1、G23代DNA离心后的试管分别是图中 G0_、
7、G1_、G2_。（2）G2代在、3条带中DNA数的比例为_。（3）图中、两条带中DNA分子所含的同位素磷分别是：条带_、条带_。（4）上述实验结果证明DNA分子的复制是_。DNA的自我复制使生物的_保持相对稳定。【解析】本题涉及考查DNA“半保留复制”、细菌培养和离心等知识。同时也涉及到了同位素方面的知识。32P是31P的同位素，分子量要比31P大，所以32P-DNA分子在质量上比31PDNA分子要重。而一条链为32P和另一条链为31P的DNA分子在质量上介于两者之间。如果把这3种DNA的氯化铯溶液置于离心管中进行高速离心，能把这3种DNA分子彼比分开。32P-DNA分子最重，在试管的最下部；
8、31P-DNA分子最轻，在试管的最上部；一条链含31P，另一条链含32P的DNA分子质量居中，位于试管的中间，GO代细胞是在31P的培养基中培养了若干代后得到的细胞，其中的DNA分子上均有31P，经密度梯度离心后应在试管的最上部。GO代细胞在含32P的培养基上培养一代，得到的G1细胞，由于复制是半保留复制，其中的DNA分子中一条链上含31P，另一条链上含有32P，这样的DNA分子经密度梯度离心后，应在试管的中部。GO代的一个细胞培养到第二代，应有4个细胞，其中2个细胞的DNA分子中一条含有31P，另一条链含有31P，另2个细胞的DNA分子中均为32P。所以提取G2代的细胞的DNA分子，经密度梯度离心后，其中的DNA分子有一半在试管的中部，另一半在试管的下部。答案：（1）A B D （2）0:1:1 （3）31P 31P和32P（4）半保留复制 遗传特性w.w.w.k.&s.5*u.c.#om高.考.资.源.网高考资源网w.w.w.k.s.5.u.c.o.m
