1、2012级生物二轮复习A线生专题15生物技术实践专题训练(A卷)（全卷满分：90分） 姓名 班级 得分 第I卷共7题，每题6分,共42分。每题给出的四个选项中，只有一个选项符合题目要求。1某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。下列叙述正确的是 ()。 A酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度较高 B先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵 C在缺氧、酸性的发酵液中，酵母菌仍然可以大量繁殖 D与人工接种的发酵相比，自然发酵获得的产品品质更好2. 下列所示四种菌落分布结果图中，均是是采用同一接种方法得到的是（ ） A. B. C. D.3欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，
2、下列实验操作中错误的是()。 A将土壤样液用无菌水进行一系列的梯度稀释 B同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板 C将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照 D用加入伊红指示剂的固体培养基可筛选出分解尿素的细菌4. 平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是（ ） A两种方法都要将菌液进行一系列的梯度稀释 B平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作 C稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养 D两种方法都可以在培养基表面形成单个菌落5.某同学用实验来探究pH值对酶活性的影响。他准备了5份含有等量果胶酶溶液的试管，用0.1
3、%的盐酸或氢氧化钠溶液调节至不同的pH值，每支试管加五块0.1cm3的正方体苹果块，试管均置于25室温条件下。下列的说法中，不合理的一项是（ ） A实验选取pH值梯度可以是5、6、7、8、9 B为使实验在更短的时间内完成，可以将温度由25提高到大约80 C生成果汁量与酶活性强弱的关系是酶活性越大，果胶分解越快，生成的果汁越多 D可根据果汁体积或果汁的澄清度来判断最适pH值6.MS培养基和培养微生物所配制的培养基的主要区别是() AMS培养基一般含植物激素，微生物培养基不含植物激素BMS培养基需要氨基酸，微生物培养基不含各种氨基酸CMS培养基含维生素，而微生物培养基不含维生素DMS培养基需要碳源
4、，微生物培养基不含碳源7.以下关于猪血红蛋白提纯的描述,错误的是( ) A. 洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂 B. 猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少 C. 血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离血红蛋白过程的监测 D.在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比相对分子质量较小的杂蛋白移动慢第II卷 非选择题（共48分） 8（11分）有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 图甲 图乙 (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、_四类，该实验所用的选择培养基只
5、能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_。 (2)与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和_，这些植物激素一般需要事先单独配制成_保存备用。 (3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是_。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_。 (4)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_，该实验设计是否合理？为什么？_。 9（8分）某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。 (1)采样与培养：将采集
6、的土样混匀后称取1 g，置于经过_法灭菌处理的_(填“固体”或“液体”)培养基中，28 振荡培养。 (2)接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行_处理之后，将菌液涂布接种于以_为唯一碳源的固体培养基上，30 条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈_状态放置。 (3)筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是_，则说明此种菌能够_。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用_法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。 10.（9分）果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要成分之一。果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁和胞间层。在果汁生产中应用果胶酶可以提高出
7、汁率和澄清度。请你帮助完成以下有关果胶酶和果汁生产的实验题。实验用具和材料：磨浆机、烧杯、试管、量筒、刀片、玻璃棒、漏斗、纱布等；苹果、质量分数为2的果胶酶溶液、蒸馏水等。【课题一】 验证果胶酶在果汁生产中的作用实验方法及步骤：将苹果洗净去皮，用磨浆机制成苹果泥，加入适量蒸馏水备用。取两个100 mL的洁净烧杯，编号l、2，按相应程序进行操作，请把表中未填写的内容填上。操作顺序项目烧杯12a在烧杯中加入苹果泥20 mL20 mLb 2 mLc注入蒸馏水2 mLd在恒温水浴中保温，并用玻璃棒不时搅拌10min10min取两个烧杯，同时进行过滤。一定时间后，观察（或比较） 和 ，并记录结果。最可能
8、得到的实验结果及结论： 。 【课题二】 探究果胶酶催化果胶水解的最适pH本课题实验步骤中，在进行果胶酶溶液和苹果泥的混合并调整pH时有下面两种操作：方法一：将试管中的果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥相混合，再把混合液的pH分别调至4、5、6、10。方法二：将试管中的果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥的pH分别调至4、5、6、10，再把pH相等的果胶酶溶液和苹果泥相混合。请问上述哪一种操作更科学? 。理由是 。如果用曲线图的方式记录实验结果，在现有的条件下，以横坐标表示pH，纵坐标表示 ，实验操作和记录是比较切实可行的。根据你对酶特性的了解，请在下图中选择一个最可能是实验结果的曲线图 。 11.（20分）下图
9、为胡萝卜素的提取装置示意图，回答有关问题：（1）提取胡萝卜素的实验流程是 萃取过滤浓缩。（2）胡萝卜素萃取的效率主要取决于 ，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度、时间等条件的影响。（3）一般来说，要想萃取效果好，需保证 。（4）萃取过程应该避免明火加热，采用 加热，其原因是 。（5）装置中是 。其作用是 。（6）本实验要对标准样品和提取样品进行点样，以便于进行 。点样后，应注意要 后，才能开始层析。（7）本实验将提取的胡萝卜素粗品通过 进行鉴定。鉴定时要对 样品和 样品进行点样。如果 说明提取胡萝卜素的实验成功。（8）提取的胡萝卜素样品为 色，如果萃取样品中出现了和标准样品
10、一样的层析带，说明 ，如果提取样品的层析带的颜色较浅，说明 ，如果萃取样品中除了有和标准样品一样的层析带外，还有其他的层析带，说明 。 2012级生物二轮复习A线生专题15生物技术实践专题训练(B卷) （全卷满分：90分） 姓名 班级 得分 第I卷共7题，每题6分,共42分。每题给出的四个选项中，只有一个选项符合题目要求。1.下列关于果酒和果醋制作的叙述,错误的是( ) A. 制作果酒时瓶口需要密闭,而制作果醋时中断通氧可能会引起醋酸菌死亡 B. 温度对酵母菌酒精发酵的影响很大,而对醋酸菌的发酵影响不大 C. 在变酸的果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖形成的 D. 制作果酒和果醋
11、时都可用70%的酒精对发酵瓶消毒并注意无菌操作2.下列关于微生物培养和利用的叙述错误的是( )A利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数B接种时连续划线的目的是为了在培养基上获得单个菌落C以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D用伊红-美蓝液体培养基可筛选出大肠杆菌金黄色菌落3. 苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，为土壤样品。下列相关叙述错误的是A图中培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B如果要测定中活
12、细菌数量，常采用稀释涂布平板法C若图中及其后做的对照实验，则应以苯酚作为唯一碳源D使用平板划线法接种可以在上获得单菌落4.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是()A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各三份，每份0.1 mL，分别涂布于各组平板上C将接种后的实验组和对照组平板倒置，在37 恒温培养2448 hD确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数5 下列关于果胶酶的叙述错误的是（ ）A果胶酶能分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，因此果胶酶可使果汁变得澄清B果胶酶的化学本质是蛋白质
13、或RNA，能将乳糖醛酸分解成半乳糖醛酸C果胶酶的活性常受温度、PH等因素的影响， 但酶的活性高低与反应物浓度无关D果胶酶是一类催化剂可改变反应速度，并受外界条件的影响6. 某优良性状的水稻可通过植物组织培养快速扩增，下列有关叙述错误的是（ ）A水稻组织的活细胞都可经诱导后再生出新植株 B将消毒的水稻组织块在固体培养基上培养时，可经过诱导获得相对无分化的细胞C在加入了适量的IAA的液体培养基中培养愈伤组织细胞可诱导芽的分化D可用加入病原体的毒蛋白的液体培养基培养分散的愈伤组织细胞来筛选抗该病的突变体水稻 7.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、电荷的性质和数量情况如右图
14、所示，下列有关蛋白质分离的叙述中，正确的是（ ）A将样品装入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋内，则分子丙也保留在袋内B若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子甲移动速度最快C若将样品以2000r/min的速度离心10min，分子戊存在于沉淀中，则分子甲也存在于沉淀中D若用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最远第II卷 非选择题（共48分）8（9分）苹果醋具有营养丰富，增加机体免疫力，护肤养肝等多种功效，以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图如下，请分析并回答：(1)过程甲中使用的微生物是_。将鲜苹果汁装入发酵瓶时，要留有大约_的空间
15、，经过1012天后，在酸性条件下用重铬酸钾检测样液，如果颜色变为_色，说明产生了酒精。(2)过程乙中使用的微生物是_，可以从食醋中分离纯化获得，步骤如下：第一步：配制_(填“固体”或“液体”)培养基。第二步：对培养基进行高压蒸汽灭菌。第三步：接种。微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。第四步：培养。温度控制在_范围内。第五步：挑选符合要求的_。(3)在_的条件下，如果缺少糖源，乙中的微生物将甲过程的产物变为_，再将其变为醋酸。9（13分）为了调查某河流的水质状况、，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在
16、配制培养基时需要在50左右倒平板 ，倒平板的目的是_。配制好培养基后，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_。接种前，先将一定量的待测水样进行 稀释，再将盛有_的容器中的涂布器取出，放在酒精灯火焰上引燃， 后待用。接种时，用该涂布器取适量不同稀释度的稀释液，分别接种于倒过平板的 培养基上，经培养后进行计数。接种时每一稀释度下至少接种3个平板，这遵循了_原则。若将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为_。 （2）另一小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操
17、作时，接种环通过_灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_。 （3）示意图A和B中，_表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。 AB（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中_的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高_的利用率。10（10分）铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一。应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎(简称PLBs，类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程如下：在固体培养基上，PLBs的重量、生
18、物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：(1)选用新生营养芽为外植体的原因是_，诱导外植体形成PLBs的过程称_。(2)与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在_，_， _。(3)脱落酸(ABA)能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案时探讨了以下问题：ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基_后按比例加入。实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品(PL
19、Bs)称重(g/瓶)后再测定生物碱含量。如初始(第0天)数据已知，实验过程中还需测定的样品数为_。依据所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品(重复样)的_时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间为适宜培养时间。11.（16分）凝胶色谱技术是一种快速而又简单的分离技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很好的分离效果,目前已经被广泛应用于多个领域。请回答:(1)a、b均为蛋白质分子,其中先从色谱柱中洗脱出来的是_,原因是_。 (2)通过凝胶色谱法可将从红细胞中分离出的血红蛋白样品进一步,在血红蛋白的提取和分离实验中有以下操作,请回答:实验时要对采集到的
20、血液中的红细胞进行洗涤,洗涤的目的是 。在（物质）的作用下,红细胞会破裂并释放出血红蛋白。将释放出的血红蛋白收集到透析袋中透析,这是样品的 ,透析的目的是 ，透析袋外的液体是 ，该液体还可用于凝胶色谱操作中的 。装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现气泡必须重装。这是因为 。实验最后经过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行 。根据SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理，SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定的是 的分子量，原因是 ；SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳还能使蛋白质分子的电泳迁移率完全取决于 ，原因是 ；2012级生物二轮复习A线生专题15生物技术实践专题训练（A卷）参考答案 1C，2D，3D，4D，
21、5B，6A，7D8. （11分，除标注外每空1分） (1)氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖 (2)细胞分裂素 母液 (3)接种环 接种环灼烧后未冷却 划线未从第一区域末端开始 (4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质（2分）不合理,缺少空白对照（2分）9.（8分每空1分）(1)高压蒸汽灭菌液体(2)系列梯度稀释淀粉倒置(3)出现透明圈分泌淀粉酶使淀粉发生水解 平板划线10.（9分，除标注外每空1分）课题一：注入果胶酶 相同时间内滤出的果汁体积 果汁的澄清度相同时间内1号烧杯滤出的果汁体积比2号滤出的体积多，澄清度高，说明果胶酶对果胶的分解具有催化作用（2分）课题二：方法二方法二
22、的操作能确保酶的反应环境从一开始便达到实验预设的pH果汁体积 甲11.（20分，除标注外每空1分）（1）粉碎 干燥 (2)萃取剂的性质、使用量（2分） (3)原料颗粒小,萃取温度高,时间长 （2分） （注解：需要提取的物质就能充分溶解，萃取效果就好） (4)水浴 有机溶剂都是易燃物,直接使用明火加热容易引起燃烧爆炸。 （5）冷凝管 防止加热时有机溶剂的挥发，利于回流（6）对比 干燥（7）纸层析标准提取 提取样品中出现了和标准样品一样的层析带 （8）橘黄色 有胡萝卜素 含有杂质 有其它色素 2012级生物二轮复习A线生专题15生物技术实践专题训练（B卷）参考答案 1B，2D，3C，4D，5B，6
23、C，7A8. （9分，每空1分）(1) 酵母菌 灰绿 (2) 醋酸菌固体3035菌落(3)氧气充足(有氧)乙醛9.（13分，每空1分）（1）防止培养基冷却过程中水珠中的微生物污染培养基 检测培养基平板灭菌是否合格 浓度梯度 70% 冷却 固体 平行重复 3.8107（2）灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 （3）B （4）溶解氧 营养物质10（10分，除标注外每空1分）(1)细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs 细胞的脱分化 (2)生长起始快 快速生长时间长 PLBs产量高(3)灭菌、冷却（2分） 75（2分） PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大11. （16分，除标注外每空1分）(1)a a相对分子质量大,在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快(2) 纯化 去除血浆蛋白 蒸馏水和甲苯（2分） 粗分离 去除相对分子质量较小的杂质 磷酸缓冲液 （血红蛋白的）洗脱 气泡会搅乱（洗脱液中蛋白质的）洗脱次序,降低分离效果 纯度鉴定 单条肽链 SDS使蛋白质发生完全变性，而解聚成单条肽链 分子的大小 SDS能与各种蛋白质形成各种复合物，而SDS 所带电荷量很大掩盖了蛋白质间的电荷差异
