1、 2012 年高考生物试题（2012 江苏）9通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是 A对供体和受体母牛都要进行相同激素处理 B受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行 C对冲卵获得的原肠胚检查合格后方可移植 D胚胎分割移植实现同狼多胎的成功率较低（2012 江苏）22下列事实能体现细胞全能性的是 A棉花根尖细胞经诱导形成幼苗 B单细胞的 DNA 在体外大量扩增 C动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体 D小鼠体细胞经诱导培育成小鼠【答案】AD【解析】B 单细胞 DNA 体外扩增是 DNA 的扩增，不能说明细胞具有全能性，动物杂交瘤细胞不能产生生物个体，所以，也不能说明细胞具有全性
2、。（2012 江苏）13下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是 A种植转基因作物应与传统农业种植区隔离 B转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中 C种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性 D转基因植物的目的基因可能转入根际微生物（2012 浙江）6天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因 B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因 B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是 A提取矮牵牛蓝色花的 mRNA，经逆转录获得互补的 DNA，再扩增基因 B B利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因 B C利用 DNA 聚合酶将基因
3、 B 与质粒连接后导入玫瑰细胞 D将基因 B 直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞（2012 上海卷）13以绵羊红细胞刺激小鼠脾脏 B 淋巴细胞，再将后者与小鼠骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞克隆群，由此筛选出的单克隆杂交瘤细胞所产生的抗体 A能识别绵羊整个红细胞 B只识别绵羊红细胞表面的特定分子 C能识别绵羊所有体细胞 D只识别绵羊所有体细胞表面的特定分子（2012 广东）2、培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是 A.组织培养 B.细胞杂交 C.显微注射 D.核移植（2012 浙江）2下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的叙述，正确的是 A绝大多数精卵细胞的识别具有物种特异性 B卵裂球细胞的体积随
4、分裂次数增加而不断增大 C囊胚的滋养层细胞具有发育全能性 D原肠胚发育分化形成内外两个胚层（2012 天津）1.下列关于细胞的叙述，错误的是 A.自体干细胞移植通常不会引起免疫排斥反应 B.胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化 C.组织的细胞更新包括细胞凋亡和干细胞增殖分化等过程 D.造血干细胞具有分化出多种血细胞的能力，可用于治疗白血病（2012 福建）32.生物一现代生物科技专题必答题(10 分)肺细胞中的 let7 基因表达减弱，癌基因 RAS 表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将 let-7 基因导人肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程
5、如图 1。请回答：(1)进行过程时，需用 酶切开载体以插入 let-7 基因。载体应有 RNA 聚合酶识别和结合的部位，以驱动 let-7 基因转录，该部位称为 。(2)进行过程 e 委时，需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。(3)研究发现，如 let-7 基因能影响癌基因 RAS 的表达，其影响机理如图 2。据图分析，可从细胞中提取 进行分子杂交，以直接检测 let-7 基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 (RASmRNARAS 蛋白质)含最减少引起的。（2012 海南卷）31.【生物选修 3：现代生物科技专题】（15 分）。已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害
6、而减产，乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。回答下列问题：（1）为了获得丙中蛋白质的基因，在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出丙中蛋白质的 序列，据此可利用 方法合成目的基因。获得丙中蛋白质的基因还可用 、方法。（2）在利用上述丙中蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需使用 酶和 。（3）将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养，筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织，由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗 的危害。（4）若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，则该植株的
7、种子 （填“含有”或“不含”）丙种蛋白质基因。（2012 安徽卷）31（24 分）甲型血友病是由 X 染色体上的隐性基因导致的遗传病（H 对 h为显性）。图 1 中两个家系都有血友病发病史。2和3婚后生下一个性染色体组成是 XXY的非血友病儿子（2），家系中的其他成员性染色体组成均正常。（1）根据图 1，（填“能”或“不能”）确定2两条 X 染色体的来源；4与正常女子结婚，推断其女儿患血友病的概率是。（2）两个家系的甲型血友病均由凝血因子（简称 F8，即抗血友病球蛋白）基因碱基对缺失所致。为探明2的病因，对家系的第、代成员 F8 基因的特异片段进行了 PCR 扩增，其产物电泳结果如图 2 所示
8、，结合图 1，推断3的基因型是。请用图解和必要的文字说明2非血友病 XXY 的形成原因。（3）现3再次怀孕，产前诊断显示胎儿（3）细胞的染色体为 46，XY；F8 基因的 PCR 检测结果如图 2 所示。由此建议3。（4）补给 F8 可治疗甲型血友病。采用凝胶色谱法从血液中分离纯化 F8 时，在凝胶装填色谱柱后，需要用缓冲液处理较长时间，其目的是；若 F8 比某些杂蛋白先收集到，说明 F8 的相对分子质量较这些杂蛋白。（5）利用转基因猪乳腺生物反应器可生产 F8。要使乳腺细胞合成 F8，构成表达载体时，必须将 F8 基因 cDNA 与猪乳腺蛋白基因的等调控组件重组在一起。F8基因 cDNA 可
9、通过克隆筛选获得，该 cDNA 比染色体上的 F8 基因短，原因是该 cDNA 没有。（6）为获得更多的转基因母猪，可以采用体细胞克隆技术，将纯合转基因母猪的体细胞核注入，构建重组胚胎进行繁殖。（2012 全国新课程）40（15 分）根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（）限制性内切酶切割分子后产生的片段，其末端类型有 和 。（）质粒运载体用 EcoR切割后产生的片段如下：为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的 DNA 除可用 EcoR切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是 。（）按其来源不同，基因工程中所使用的 DNA 连接酶有两类，即 DNA 连接酶和 DNA 连接
10、酶。（）反转录作用的模板是 ，产物是 。若要在体外获得大量反转录产物，常采用 技术。（）基因工程中除质粒外，和 也可作为运载体。（）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是 。（2012 天津）8.（20 分）黄曲霉毒素 B1（AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能表达 AFB1 解毒酶将该酶添加在饲料中可以降解 AFB1，清除其毒性。(1)AFB1 属于 类致癌因子。(2)AFB1 能结合在 DNA 的 G 上使该位点受损伤变为 G ，在 DNA 复制中，G 会与 A配对。现有受损伤部位的
11、序列为，经两次复制后，该序列突变为 。(3）下图为采用基因工程技术生产 AFB1 解毒酶的流程图 据图回答问题：在甲、乙条件下培养含 AFB1 解毒酶基因的菌株经测定甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶：乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶过程 l 应选择 菌液的细胞提取总 RNA，理由是 过程中，根据图示，可以看出与引物结合的模版是 检测酵母菌工程菌是否合成了 AFB1 解毒酶，应采用 方法。(4）选取不含 AFB1 的饲料和某种实验动物为材料，探究该 AFB1 解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果间下表：据表回答问题：本实验的两个自变量，分别为 。本实验中反映 AFB1 解毒酶的解毒效果的对
12、照组是 。经测定，某污染饲料中 AFB1 含量为 100g/kg，则每千克饲料应添加 克 AFB1 解毒酶解毒效果最好同时节的了成本。（5）采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高每的活性出发，设计语气的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的 。（2012 浙江）31（12 分）请根据以下提供的实验材料，完善生物制剂 W 对动物不同细胞的分裂具有促进作用的实验思路，并预测实验结果。实验材料：培养液、正常体细胞、癌细胞、W、胰蛋白酶。（要求与说明：答题时不考虑加入 W 后的体积变化等误差。提供的细胞均具有分裂能力，只进行原代培养且培养条件适宜）（1）实验思路：取培养瓶若干个，分组
13、如下：。每组设置若干个重复样品。各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，各取其中的几个样品，加入，摇匀，在显微镜下用血细胞计数板分别计数并记录细胞数。重复若干次。（2）预测实验结果（用坐标系和细胞数变化曲线示意图表示）：（2012 全国新课程）39（15 分）为了探究 6-BA 和 IAA 对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在培养基中加入 6-BA 和 IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率（m），以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n），结果如下表。回答下列问题：（）按照植
14、物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为 和 两类。上述培养基中，6-BA 属于 类生长调节剂。（）在该实验中，自变量是 ，因变量是 ，自变量的取值范围是 。（）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是 号培养基。（）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入 （填“6-BA”或“IAA”）。（2012 山东）34（8 分）【生物生物技术实践】辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。（1）图中和分别表示辣椒组织培养中细胞的_和_过程。（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是_。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值_（填“高”或“低”）时，有利于芽的分
15、化。对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是_。（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是_。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是_和纤维素酶。（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是_。（2012 山东）35（8 分）【生物现代生物科技专题】毛角蛋白型中间丝（KIF）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转 KIF基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。（1）过程中最常用的运载工具是_，所需要的酶是限制酶和_。（2）在过程中，用_处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于 5CO2的气体环境中，CO2的作用是_。（3）在过程中，用_处理以获取更多
16、的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行_处理。（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是_。在胚胎移植前，通过_技术可获得较多胚胎。【答案】（1）质粒 DNA 连接酶 （2）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）维持培养基（液）的 pH （3）促性腺激素（或促滤泡素，孕马血清）去核 （4）早期胚胎培养 胚胎分割【解析】详解见答案。（2012 上海卷）(六)回答下列有关遗传信息传递和表达的问题。(10 分)55如图 18 所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶 E 和 F 从基因组 DNA 上切下目的基因，并将之取代质粒 pZHZ1(3.7kb，1kb=1000 对碱基)上相应的 E
17、F 区域(0.2kb)，那么所形成的重组质粒 pZHZ2_。A既能被 E 也能被 F 切开 B能被 E 但不能被 F 切开 C既不能被 E 也不能被 F 切开 D能被 F 但不能被 E 切开 56已知在质粒 pZHZl 中，限制酶 G 切割位点距限制酶 E 切割位点 08kb，限制酶 H 切割位点距限制酶 F 切割位点 O5kb。若分别用限制酶 G 和 H 酶切两份重组质粒 pZHZ2 样 品，据表 4 所列酶切结果判断目的基因的大小为 kb；并将目的基因内部的限制酶 G 和 H切割位点标注在图 19 中。57若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则需将重组质粒 pZHZ2 导入至山羊
18、的_细胞中。若 pZHZ2 进入细胞后插入在一条染色体 DNA 上，那么获得转基因纯合子山羊的方式是_。58上述目的基因模板链中的。TGA 序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的 tRNA 上相应的碱基序列是_。一般而言，一个核糖体可同时容纳_分子的 tRNA。59下列四幅图中能正确反映目的基因转录产物内部结构的是_。TSS：转录起始位点，TTS：转录终止位点，STC：起始密码子，SPC：终止密码子 2011 年高考生物试题 1.（2011 广东卷）华南虎是国家一级保护动物，可采用试管动物技术进行人工繁殖，该技术包括的环节有:转基因 核移植 体外受精 体细胞克隆 胚胎移植 A.B.C.D.答
19、案 D:解析：本题考查胚胎工程的应用，属于对识记、理解层次的考查。试管动物技术是指把经过体外受精获得的早期胚胎移植到假孕动物子宫发育而产生的动物。2.（2011 浙江卷）将 ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒 pET28b 导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是 A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重细胞质粒 B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个 ada D.每个插入的 ada 至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 3、（2011 江苏卷）关于现代生物技术应用的叙述，错误的是 A蛋白质工程可以合成自然界不存在的蛋白质 B体细胞杂交技术
20、可用于克隆动物和制备单克隆抗体 C植物组织培养技术可以用于植物茎尖脱毒 D动物细胞培养技术可用于转基因动物的培养 答案：B 解析：克隆动物应用的是细胞核移植技术，所以 B 选项叙述错误。4、（2011 江苏卷）下列关于胚胎工程的叙述，错误的是 A体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应溶液中受精 B受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植 C早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需要加入血清 D试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术 答案：B 解析：受精卵发育到囊胚阶段就可以进行胚胎移植，所以 B 选项的叙述是错误的。5.（2011 天津卷）下列叙述正确的是 A胚胎发育过程中
21、不存在细胞衰老或凋亡现象 B用小鼠不同器官和组织构建的 cDNA 文库相同 C垂体功能受损的幼犬会出现抗寒能力减弱等现象 D刺激支配肌肉的神经，引起该肌肉收缩的过程属于反射 6.（2011 浙江卷）培育“试管山羊”的基本过程如下图所示。若要培育成功，下列叙述正确的是 A 甲过程中可通过给母山羊注射有关激素使用其超数排卵 B 乙过程的目的之，是促进卵母细胞和精子的成熟 C 丙过程与乙过程中应采用相同成分的培养液 D 丁过程中早期胚胎须移植到与供体性状相同的代孕母羊子宫内 7.（2011 安徽卷）.（9 分）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用
22、于制药。(1)进行转基因操作前，需用_酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自 cDNA 文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_和_之间。(3)采用 PCR 技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改 PCR 反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含 Mg2+）、水，4 种脱氧核糖苷酸、模板 DNA、_和_。(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时，的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。8、（2011 江苏卷）请回答基因工程方面的问题：（1）利用 PCR 技术扩增目的基因
23、，其原理 与细胞同 DNA 复制类似（如下图所示）。图中引物为单链 DNA 片段，它是子链合成延伸的基础。从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物 A 的 DNA 片段所占的比例为 。在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA 片段。（2）设计引物是 PCR 技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。第 1 组：；第二组 。（3）PCR 反应体系中含有热稳定 DNA 聚合酶，下面的表达式不能正确反映 DNA 聚合酶的功能，这是因为 。（4）用限制酶 EcoR、Mbo 单 独或立命切割同一种质料，得到的 DNAT 片段长度如下图
24、（1kb即 1000 个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质料上 EcoR、Mbo 的切割位点。答案：（1）15/16 三（2）引物和引物局部发生碱基互补配对而失效 引物自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效 9.T-DNA 可随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA 上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为 T1代）。(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除 ，因为后者产生的 会抑制侧芽的生长。(2)为筛选出已转化的个体，需将 T1
25、代播种在含 的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为 T2代）。(3)为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将 T2代播种在含 的培养基上，获得所需个体。(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与 植株进行杂交，再自交 代后统计性状分离比。(5)若上述 T-DNA 的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性 。(6)根据 TDNA 的已知序列，利用 PCR 技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取一植株的 DNA，用限制酶处理后，再用 将获得的 DNA 片段连接成环（如右图），以此为模板，从图中
26、A、B、C、D 四种单链 DNA 片段中选取 作为引物进行扩增，得到的片段将用于获取该基因的全序列信息。10（2011 福建卷）一对表现型正常的夫妇，生了一个镰刀型细胞贫血症（常染色体隐性遗传病）患儿。在他们欲生育第二胎时，发现妻子的双侧输卵管完全堵塞，不能完成体内受精。医生为该夫妇实施了体外受精和产前基因诊断，过程如右图。请回答：（1）过程是指在体外进行的 处理，从而使精子与卵子结合形成受精卵；过程称为 。（2）在对胎儿进行镰刀形细胞贫血症的产前基因诊断时，要先从羊水中的胎儿细胞提取物质 进行 PCR 扩增。然后用 Mst 对扩增产物进行切割，产生多个片段的酶切产物。据此判断，Mst 是一种
27、 酶。（3）不同长度的酶切产物在电泳时移动的速率不同，形成不同的电泳条带。该家庭成员的镰刀型细胞贫血症基因分析的电泳带谱如，据此判断胎儿为 （正常/患者/携带者）。11.（2011 山东卷）人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可从已处死的雌鼠_中获取。（2）图中的高血压相关基因作为_，质粒作为_,二者需用_切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有_有关。（3）子代大鼠如果_和_，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型
28、。（4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是_、早期胚胎培养和胚胎移植。12.（2011 四川卷）北极比目鱼中有抗冻基因,其编码的抗冻蛋白具有 11 个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是 A 过程获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序 B 多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白 C 过程构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选 D 应用 DNA 探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达 答案：B 解析：过程 1 获得的
29、目的基因已不含非编码区和内含子，因此不能用于比目鱼基因组测序，因此 A 错。导入农杆菌是为了扩增和更易导入蕃茄细胞，C 错。DNA 探针技术不能检测基因是否完全表达，D 错。13.（2011 广东卷）登革热病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖，蚊子在叮咬人时将病毒传染给人，可引起病人发热、出血甚至休克。科学家用以下方法控制病毒的传播。（1）将 S 基因转入蚊子体内，使蚊子的唾液腺细胞大量表达 S 蛋白，该蛋白可以抑制登革热病毒的复制。为了获得转基因蚊子，需要将携带 S 基因的载体导入蚊子的 细胞。如果转基因成功，在转基因蚊子体内可检测出 、和 。（2）科学家获得一种显性突变蚊子（AABB）
30、。A、B 基因位于非同源染色体上，只有 A 或 B 基因的胚胎致死。若纯合的雄蚊（AABB）与野生型雌蚊（aabb）交配，F1 群体中 A 基因频率是 ，F2 群体中 A 基因频率是 。（3）将 S 基因分别插入到 A、B 基因的紧邻位置（如图 11），将该纯合的转基因雄蚊释放到野生群体中，群体中蚊子体内病毒的平均数目会逐代 ，原因是 。14.（2011 重庆卷）拟南芥是遗传学研究的模式植物，某突变体可用于验证相关的基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色（TT），某突变体的种皮为黄色（tt）,下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因(Tn)功能的流程示意图。（1）与拟南芥 t 基因的 mRNA
31、相比，若油菜 Tn基因的 mRNA 中 UGA 变为，其末端序列成为“”，则 Tn比多编码 个氨基酸（起始密码子位置相同，、为终止密码子）。（）图中应为 。若不能在含抗生素的培养基上生长，则原因是 .若的种皮颜色为 ，则说明油菜nT 基因与拟南芥 T 基因的功能相同。（3）假设该油菜nT 基因连接到拟南芥染色体并替换其中一个 t 基因，则中进行减数分裂的细胞在联会时的基因为 ；同时，的叶片卷曲（叶片正常对叶片卷曲为显性，且与种皮性状独立遗传），用它与种皮深褐色、叶片正常的双杂合体拟南芥杂交，其后代中所占比列最小的个体表现为 ；取的茎尖培养成 16 颗植珠，其性状通常 （填 不变或改变）。（4）
32、所得的转基因拟南芥与野生型拟南芥 （填是或者不是）同一个物种。由上可知所得转基因拟南芥 Tnt 和野生型拟南芥 TT 两个品种相当于发生基因突变，没有隔离，能杂交产生可育后代，因此是同一个种。15.（2011 天津卷）絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀，起到净化污水的作用。为进一步提高对石油污水的净化效果，将絮凝性细菌和石油降解菌融合，构建目的菌株。其流程图如下。据图回答：（1）溶菌酶的作用是_。（2）PEG 的作用是_。（3）经处理后，在再生培养基上，未融合的 A、B 难以生长。图中 AB 融合菌能生长和繁殖的原因是_。（4）目的菌株的
33、筛选：筛选既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有_的培养基上生长的 AB 融合菌，选择效果最好的最为目的菌株。（5）为探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果，将目的菌株进行发酵培养，定时取发酵液，加入石油污水中：同时设置_为对照组。经搅拌、静置各 3 分钟后，分别测定上层水样的石油浓度 COD 值（COD 值越高表示有机物污染程度越高）,计算石油去除率和 COD 去除率，结果如下图。（6）目的菌的种群增长曲线是_型。在 4044 小时，发酵液对石油污水的净化效果最好，其原因是_。16（2011 新课标全国卷）现有一生活污水净化处理系统，处理流程为“厌氧沉淀池 曝光池 兼氧池 植物池”，其中
34、植物池中生活着水生植物、昆虫、鱼类、蛙类等生物。污水经净化处理后，可用于浇灌绿地。回答问题：（1）经厌氧沉淀池。曝气池和兼氧池后得到初步净化。在这个过程中，微生物通过 呼吸将有机物分解。（2）植物池中，水生生物、昆虫、鱼类、蛙类和底泥中的微生物共同组成了 （生态系统、菌落、种群）。在植物池的食物网中，植物位于第 营养级。植物池中所有蛙类获得的能量最终来源于 所固定的 能。（3）生态工程所遵循的基本原理有整体性、协调与平衡、和 等原理。一般来说，生态工程的主要任务是对 进行修复，对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力。2010 年高考生物试题 基因工程、生物技术的安全和伦
35、理问题（2010 浙江卷）2.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（A）A.用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸 B.用 DNA 连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C.将重组 DNA 分子导入原生质体 D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 解析：本题考查基因工程的有关知识，基因工程的一般过程：用限制性核酸内切酶切割含目的基因的 DNA 分子（除草剂基因）和运载体（质粒），用 DNA 连接酶连接切割好的目的基因和运载体重组 DNA 分子导入受体细胞，因为是植物可以说是原生质体用相应的试剂和病原体帅选转基因细胞用植物组织培养技术抗除草剂的转基因烟草（表达）。
36、所以答案 A。（2010 福建卷）32生物现代生物科技专题(10分)红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然 EP0 来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO）期间要生产流程如右图（1）图中所指的是 技术。（2）图中所指的物质是 ，所指的物质是 。（3）培养重组 CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。（4）检测 rhEPO 外活性需用抗 rhEPO 单克隆抗体。分泌单克隆抗体的 细胞，可由 rhEPO 免疫过的小鼠 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤
37、细胞融合而成 答案：（1）PCR （2）mRNA rhEPO （3）培养液 （4）杂交瘤 解析：本题主要以人红细胞生成素生产为材料来考查基因工程和细胞工程中动物细胞培养技术、制备单克隆抗体技术。获取目的基因的方法有四种（从基因文库中获取、用 PCR 扩增技术、用反转录法、用化学合成法）由图以核 DNA 为模板获得目的基因的方法可知为 PCR 技术。进行反转录的模板是 mRNA。由题意可知重组 CHO细胞适用于生产重组人红细胞生成素(rhEPO），所以重组 CHO 细胞能过表达出重组人红细胞生成素(rhEPO）或者红细胞生成素。培养动物细胞是用液体培养基即培养液，细胞从培养液中吸收营养，并同时向
38、培养液中排放代谢废物，当代谢废物积累时会危害细胞，因此要不断更新培养液。制备单克隆抗体是让淋巴 B 细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，然后由杂交瘤细胞来分泌抗体。（2010 广东卷）22.新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。下列技术（或仪器）与应用匹配正确的是 A.PCR 技术扩增蛋白质 B.杂交瘤技术制备单克隆抗体 C.光学显微镜观察叶绿体的基粒 D.花粉离体培养培育单倍体植物【解析】本题主要考查学生的理解能力。PCR 技术只能用来扩增核酸，不能用来扩增蛋白质；利用光学显微镜无法观察到叶绿体。【答案】BD（2010 天津卷）7.（26 分）.（14 分）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物
39、反应器的技术路线。图中 tetR 表示四环素抗性基因，ampR 表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI 直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 （填字母代号）。A.启动子 B.tetR C.复制原点 D.ampR（3）过程可采用的操作方法是 （填字母代号）。A.农杆菌转化 B.大肠杆菌转化 C.显微注射 D.细胞融合（4）过程可采用的生物技术是 。（5）对早期胚胎进行切割，经过程
40、可获得多个新个体。这利用了细胞的 性。（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用 （填字母代号）技术。A.核酸分子杂交 B.基因序列分析 C.抗原抗体杂交 D.PCR（2010 江苏卷）18下列关于转基因植物的叙述。正确的是 A转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传人环境中 B转抗虫基因的植物不会导致昆虫群体抗性基因撷宰增加 C动物的生长激素基因转人植物后不能表达 D如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题（2010 江苏卷）27（8 分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈 l、圈 2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：（1）一个图 1 所示的质粒分子经
41、 Sma 切割前后，分别含有 个游离的磷酸基团。（2）若对图中质粒进行改造，插入的 Sma酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。（3）用图中的质粒和外源 DNA 构建重组质粒，不能使用 Srna 切割，原因是 。（4）与只使用 EcoR I 相比较，使用 BamH 和 Hind 两种限制酶同时处理质粒、外源DNA 的优点在于可以防止 。（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。（7）为了从 cDNA 文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初
42、步检测。【解析】本题考查基因工程的限制性内切酶的作用特点（1）质粒切割前是双链环状 DNA 分子，所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键，故不含游离的磷酸基团。从图 1 可以看出，质粒上只含有一个 Sma的切点，因此被改酶切割后，质粒变为线性双链 DNA 分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团。（2）由题目可知，Sma识别的 DNA 序列只有 G 和 C，而 G 和 C 之间可以形成三个氢键，A 和 T 之间可以形成二个氢键，所以 Sma酶切位点越多，热稳定性就越高（3）质粒抗生素抗性基因为标记基因，由图 2 可知，标记基因和外源 DNA 目的基因中均含有 Sma酶切
43、位点，都可以被 Sma破坏，故不能使用该酶剪切含有目的基因的 DNA（4）只使用 EcoR I，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用连接酶连接时，会产生 质粒和目的基因自身连接物，而利用 BamH 和 Hind 剪切时，质粒和目的基因两端的粘性末端不同，用 DNA 连接酶连接时，不会产生自身连接产物。（2010 海南卷）26（18 分）选修模块 3：现代生物科技专题 请回答胚胎工程和基因工程方面的问题：（1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、以及在母体中发育和产出等过程。（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其
44、。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和。（3）通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞，常使用的激素是。（4）利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤是、基因表达载体的构建、和。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是（显微注射法、农杆菌转化法），为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是（受精卵、乳腺细胞）。（2010 浙
45、江卷）4.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是(D)A.培养保留接触抵制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 B.克隆培养法培养过程上多数细胞的基因型会发生改变 C.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的 D.恶性细胞系的细胞可进行付代培养（2010 浙江卷）30苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白能使螟虫死亡。研究人员将表达这种毒蛋白的抗螟虫基因转入非糯性抗稻瘟病水稻的核基因组中，培育出一批转基因抗螟水稻。请回答：（1）染色体主要由组成，若要确定抗螟基因是否已整合到水稻的某一染色体上，方法之一是测定该染色体的。（2）选用上述抗螟非糯性水稻与不抗螟糯性水稻杂交得到 F1，从 F1 中选取一株进行自交得到 F2
46、，F2 的结果如下表：表现型 抗螟非糯性 抗螟糯性 不抗螟非糯性 不抗螟糯性 个体数 142 48 50 16 分析表中数据可知，控制这两对性状的基因位于染色体上，所选 F1 植株的表现型为。亲本中抗螟非糯性水稻可能的基因型最多有种。（3）现欲试种这种抗螟水稻，需检验其是否为纯合子，请用遗传图解表示检验过程（显、隐性基因分别用 B、b 表示），并作简要说明。（4）上表中的抗螟水稻均能抗稻瘟病（抗稻瘟病为显性性状），请简要分析可能的原因。（2010 福建卷）32生物现代生物科技专题(10 分)红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然 EP0 来源
47、极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO）期间要生产流程如右图（1）图中所指的是 技术。（2）图中所指的物质是 ，所指的物质是 。（3）培养重组 CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。（4）检测 rhEPO 外活性需用抗 rhEPO 单克隆抗体。分泌单克隆抗体的 细胞，可由 rhEPO 免疫过的小鼠B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成 答案：（1）PCR （2）mRNA rhEPO （3）培养液 （4）杂交瘤 解析：本题主要以人红细胞生成素生产为材料来考查基因工程和细胞工程中动物细胞培养技术、
48、制备单克隆抗体技术。获取目的基因的方法有四种（从基因文库中获取、用 PCR 扩增技术、用反转录法、用化学合成法）由图以核 DNA 为模板获得目的基因的方法可知为 PCR 技术。进行反转录的模板是 mRNA。由题意可知重组 CHO细胞适用于生产重组人红细胞生成素(rhEPO），所以重组 CHO 细胞能过表达出重组人红细胞生成素(rhEPO）或者红细胞生成素。培养动物细胞是用液体培养基即培养液，细胞从培养液中吸收营养，并同时向培养液中排放代谢废物，当代谢废物积累时会危害细胞，因此要不断更新培养液。制备单克隆抗体是让淋巴 B 细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，然后由杂交瘤细胞来分泌抗体。胚胎工程（2
49、010 山东高考理综）35.【生物-现代生物科技专题】胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。（1）从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是_；从良种公牛采集的精子需_后才能进行受精作用。（2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的 O2 以维持细胞呼吸外，还需要提供_气体以维持_。（3）图中过程 A 称为_，它在胚胎工程中的意义在于_。（4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是_；获得转基因母牛后，如果_即说明目的基因已经表达。【答案】（1）使卵母细胞成熟
50、（或：使卵母细胞获得受精能力）；获能（2）CO2；培养液（基）的 pH（3）胚胎移植 提高优良母畜的繁殖率。（4）显微注射法 牛奶中含有人类白细胞介素（或：牛乳腺细胞已合成人类白细胞介素）【命题立意】本题综合考查胚胎工程、基因工程等方面知识。（2010 江苏卷）16下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质奶羊的叙述错误的是 A对受体母羊与供体母羊进行同期发情处理 B人工授精后的一定时间内，收集供体原肠胚用于胚胎分割 C利用胚胎分剖技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎 D一次给受体母羊檀人多个胚胎可增加双胞胎和多胞胎的比例【答案】B【解析】本题考查了胚胎工程及考生理解问题的能力。进行胚胎分割要用囊胚或桑
51、椹胚期的胚胎，B 项错误。（2010 江苏卷）17老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的 一淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降某些基因的突变会导致 一淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是 A胚胎移植技术 B胚胎干细胞技术 C单克隆抗体技术 D基因治疗技术【答案】A【解析】本题考查了现代生物技术的应用。采用胚胎干细胞技术可以产生新的神经元细胞，单克隆抗体技术定向改善免疫能力，基因治疗技术可以从基因水平对老年痴呆进行治疗，而胚胎移植技术则不能治疗老年痴呆，正确选项为 A w.w.w.k.s.5.u.c.o.m 2009 年高考生物试题 基因工程、生物技
52、术的安全和伦理问题（2009 安徽卷）42008 年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白“的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是 A追踪目的基因在细胞内的复制过程 B追踪目的基因插入到染色体上的位置 C追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布 D追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构 （2009 浙江卷）3下列关于基因工程的叙述，错误的是 A目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶是两类常用的工具酶 C人胰岛素原基
53、因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D载体上的抗性基因有利于筛选含重组 DNA 的细胞和促进目的基因的表达（2009 广东理基）45钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方面的杰出成就而获 2008 年诺贝尔奖。在某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。由此可知 A该生物的基因型是杂合的 B该生物与水母有很近的亲缘关系 C绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达 D改变绿色荧光蛋白基因的 1 个核苷酸对，就不能检测到绿色荧光【答案】C【解析】某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光，说明绿色荧光蛋白
54、基因在该生物体内得到了表达。（2009 重庆卷）2.下表有关基因表达的选项中，不可能的是 基因 表达的细胞 表达产物 A 细菌抗虫蛋白基因 抗虫棉叶肉细胞 细菌抗虫蛋白 B 人酪氨酸酶基因 正常人皮肤细胞 人酪氨酸酶 C 动物胰岛素基因 大肠杆菌工程菌细胞动物胰岛素 D 兔血红蛋白基因 兔成熟红细胞 兔血红蛋白【答案】D【解析】抗虫棉叶肉细胞中存在细菌抗虫蛋白基因，细菌抗虫蛋白基因能够表达产生细菌抗虫蛋白；正常人皮肤细胞中含有人酪氨酸酶基因，人酪氨酸酶基因能够表达产生人酪氨酸酶；大肠杆菌工程菌细胞存在动物胰岛素基因，动物胰岛素基因能够表达产生动物胰岛素；兔成熟红细胞中无细胞核，所以无兔血红蛋白
55、基因不能表达产生兔血红蛋白。此题为容易题，识记理解类。（2009 天津卷）8（30 分）水稻种子中 70的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子，同时，排出的大量磷进入水体易引起水华。（1）磷元素除了形成植酸外，还可以出现在下列_分子或结构中（多选）。A.核糖 B.ATP C.核糖体 D.核膜（2）种植芦苇能有效抑制水华的发生，表明芦苇与引起水华的藻类关系是_。（3）植酸酶可降解植酸，在谷物类饲料中添加植酸酶可提高饲料的_ 利用率。（4）酵母菌中植酸的活性较高。下图是从不同类型酵母菌的发酵液中提取植酸酶的工艺流程。据图回答：植酸酶_（/）属于分泌
56、蛋白。若植酸酶和的肽链组成不同，其差异体现在_。提纯的植酸酶需做活性条件测定。右图为测定结果。图中的自变量可为_(答一种)；因变量可以通过测定_来表示。（5）为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。据图回答：图中基因组文库_（小于/等于/大于）cDNA 文库。B 过程需要的酶是_；A、C 过程中_（可以/不可以）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。目的基因和除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中_。和_为模板直接进行 PCR 扩增，该过程中所用酶的显著特点是_。（6）已获得的转植酸酶基因水稻品系植酸含量低，但易感病，下
57、图为选育低植酸抗病水稻品种的过程。图中两对相对性形状分别由两对基因控制，并独立遗传。采用上图育种过程，需从_代开始筛选，经筛选淘汰后，在选留的植株中低植酸抗病纯合体所占的比例是_。选留植株多代自交，经筛选可获得低植酸抗病性状稳定的品性。【解析】本题考查物质的元素组成、生物的种间关系、蛋白质、酶、基因工程、遗传定律的相关知识，涉及的知识点较多，综合性很强。（1）只有核糖中不含磷元素，ATP（磷酸基团）、核糖体（含 RNA）、核膜（含磷脂）中均含有磷元素。（2）芦苇能抑制水华的发生，表明芦苇与水华的藻类关系是竞争。（3）植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子，而植酸酶
58、可降解植酸，因此在谷物类饲料中添加植酸酶可提高饲料的 （2009 福建卷）32.（10 分）转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有 Pst、Sma、EcoR、Apa等四种限制酶切割位点。请回答：（1）构建含抗病基因的表达载体 A 时，应选用限制酶 ，对 进行切割。（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体 A 中含有 ，作为标记基因。（3）香蕉组织细胞具有 ，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 。（2009 重庆卷）31.（16 分）小鼠基因敲除技
59、术获得 2007 年诺贝尔奖，该技术采用基因工程、细胞工程、杂交等手段使小鼠体内的某一基因失去功能，以研究基因在生物个体发育和病理过程中的作用。例如现有基因型为 BB 的小鼠，要敲除基因 B，可先用体外合成的突变基因 b 取代正常基因 B，使 BB 细胞改变为 Bb 细胞，最终培育成为基因敲除小鼠。（1）基因敲除过程中外源基因是否导入受体细胞，可利用重组质粒上的 检测。如果被敲除的是小鼠抑癌基因，则可能导致细胞内的 被激活，使小鼠细胞发生癌变。（2）通过基因敲除，得到一只 AABb 小鼠。假设棕毛基因 A、白毛基因 a、褐齿基因 B 和黄齿基因 b 均位于常染色体上，现要得到白毛黄齿新类型小鼠
60、，用来与 AABb 小鼠杂交的纯合亲本的基因型是 ，杂交子代的基因型是 。让 F1代中双杂合基因型的雌雄小鼠相互交配，子代中带有 b 基因个体的概率是 。不带 B 基因个体的概率是 。（3）在上述 F1代中只考虑齿色这对性状，假设这对性状的遗传属 X 染色体伴性遗传，则表现黄齿个体的性别是 ，这一代中具有这种性别的个体基因是 。（2009 江苏卷）34（7 分）苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt 毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（ramp 为抗氨苄青霉素基因），据图回答下列问题。（1）将图中的 DNA 用 Hind、BamH完全酶切后，反应管中有 种 DNA 片段。（
61、2）图中表示 Hind与 BamH酶切、DNA 连接酶连接的过程，此过程可获得 种重组质粒；如果换用 Bst l 与 BamH酶切，目的基因与质粒连接后可获得 种重组质粒。（3）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的 。（4）图中的 Ti 质粒调控合成的 vir 蛋白，可以协助带有目的基因的 TDNA 导人植物细胞，并防止植物细胞中 对 TDNA 的降解。（5）已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞 。（6）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的 基
62、因频率的增长速率。【解析】本题考查基因工程的相关知识。（1）由于上述两种酶形成的末端不一样，所以被两种不同的限制酶切割之后所形成的片段有 AA、AB、BA、BB 四种切法形成的四种片段。（A 表示 Hind，B 表示 BamH）（2）同时被两种限制酶切割有两种不同的目的基因，即 AB 和 BA，所以重组质粒有两种。Bst l 与 BamH酶切割的末端一样，所以同时用这两种限制酶切割只能形成一种目的基因，所以只能形成一种重组质粒。（3）质粒要进行复制才能更多的表达出产物，所以重组之后要能复制。（4）酶具有专一性，对 TDNA 的降解酶为 DNA 水解酶。（5）生物的细胞表面的受体具有特异性，人类
63、肠上皮细胞没有昆虫肠上皮细胞表面的特异受体。所以该毒素蛋白对人类的风险相对较小（6）自然选择是普遍存在的，纯种种植自然选择会使害虫抗性基因频率快速增长。所以混合种植降低害虫的抗性基因频率的增长速率。（2009 上海卷）37.（9 分）人体细胞内含有抑制癌症发生的 P53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。（1）目的基因的获取方法通常包括_和_。（2）上图表示从正常人和患者体内获取的 P53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改编的碱基对，这种变异被称为_。（3）已知限制酶 E 识别序列为 CCGG,若用限制酶 E 分别完全切割正常人和患者的
64、P53基因部分区域（见上图），那么正常人的会被切成_个片段，而患者的则被切割成长度为_对碱基和_对碱基的两种片段。（4）如果某人的 P53基因部分区域经限制酶 E 完全切割后，共出现 170、220、290 和 460 碱基对的四种片段，那么该人的基因型是_（以 P+表示正常基因，Pn表示异常基因）。【解析】本题主要考查基因工程相关知识。（1）目的基因的获取方法有直接分离和化学方法人工合成两种；（2）仔细对比正常人与患者的基因序列可知是 CG 碱基对变为了 TA 碱基对，这种变化属于基因突变；（3）正常人 P53基因终于两个限制酶 E 的识别序列，完全切割后可产生三个片段，患者 P53基因中有
65、一个限制酶 E 的识别序列发生突变，且突变点位于识别位点内，这样患者就只有一个限制酶 E 的识别序列，切割后产生两个片段，分别为 290+170=460 对碱基，220 对碱基；（4）正常人经限制酶 E 完全切割后产生三个片段，290 对碱基、170 对碱基和 220 对碱基，患者产生两个片段 460 对碱基和 220 对碱基，则该人的基因型应为 P+P-。细胞工程（2009 全国卷）4下列关于植物体细胞杂交或植物细胞质遗传的叙述，错误的是 A利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远缘杂种 B不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程 C两个不同品种的紫茉莉杂交，正交、反交所
66、得 F1的表现型一致 D两个不同品种的紫茉莉杂交，F1的遗传物质来自母本的多于来自父本的（2009 浙江卷）1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A都需用2CO 培养箱 B都须用液体培养基 C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性 提取 病毒 RNA DNA A 基因A 基因 表达载体受体 细胞 A 蛋白小鼠皮下小鼠骨髓瘤细胞 效应 B 淋巴细胞 X 抗 A 蛋白的单克隆抗体（2009 山东卷）35.（8 分）（生物一现代生物科技专题）人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为 RNA 病毒，该病毒表面的 A 蛋白为主要抗原，且疾苗
67、生产和抗体制备的流程之一如下图：请回答：（1）过程代表的是 。（2）过程构建 A 基因表过载体时，必须使用 和 两种工具酶。（3）过程采用的实验技术是 ，获得的 X 是 。（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行 比较；或用图中的 进行特异性结合检测。（2009 四川卷）30.（22 分）回答下列、两个小题。.将小鼠胚胎干细胞定向诱导分化成一种特定的细胞（命名为 M 细胞），再将 M 细胞移植到糖尿病模型小鼠（胰岛细胞被特定药物破坏的小鼠）体内，然后小鼠的血糖浓度，结果如图所示（虚线表示正常
68、小鼠的血糖浓度值）。请回答相关问题：（1）实验用的胚胎干细胞取自小鼠的早期囊胚，取出胚胎后一般用 酶将其分散成单个细胞。（2）根据实验结果可以判定 M 细胞已具有 细胞的功能。说明判定的理由 。（3）用胰岛素基因片段做探针，对小鼠胚胎干细胞和 M 细胞进行检测。请在下表的空格中填上检测结果（用“+”表示能检测到，用“-”表示不能检测到）。用探针检测细胞的 DNA 用探针检测细胞的 RNA 胚胎干细胞 M 细胞 胚胎干细胞 M 细胞 上述实验结果表明，胚胎干细胞通过 定向分化为 M 细胞。（4）若将 M 细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中，重组细胞能否分化为其他类型细胞？，请说明理由 。1糖尿病的
69、机制 由于胰岛 B 细胞受损导致无法合成胰岛素来降血糖，血糖浓度过高随尿排出，导致糖尿病的产生。本题中通过曲线反应了未移植 M 细胞和移植 M 细胞下血糖浓度的变化，可见移植 M细胞血糖浓度降低，显然 M 细胞发挥了胰岛 B 细胞的功能 2细胞的全能性和基因表达的相关知识 第（4）小问中考查了动物细胞核具有全能性的原因，即细胞核含有该物种所特有的全套遗传物质；第（3）问中通过表格的形式要求学生补充实验的结果，首先学生要明确这里的 M细胞是通过小鼠的胚胎干细胞经过细胞增殖、分化而产生的，由于是通过有丝分裂增殖，所以 M 细胞和胚胎干细胞的 DNA 是一样的，然而细胞分化的实质为基因的选择性表达，
70、追究到原因就是相同的 DNA 转录形成了不同的 RNA，进一步合成了不同的蛋白质，所以 M 细胞和胚胎干细胞中的 RNA 是不一样的，从而在进行 DNA 探针杂交试验时出现了如表格中显示的杂交结果。（2009 江苏卷）32（8 分）动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。（1）肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞 。（2）气室中充入 5C02：气体的主要作用是 。（3）培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的 ，以保证抗生素对肝脏无害。（4）有机物 X 有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装
71、置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物 X 是否具有解毒作用。材料用具：肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素（刺激淋巴细胞分裂）；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液（使染色体着色），有机物 X 溶液等。实验过程：在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取 4 等份，备用。利用甲、乙、丙、丁 4 组上图所示装置，按下表步骤操作（“”表示已完成的步骤）。甲 乙 丙 丁 步骤一：加人肝脏培养液 步骤二：加入有机物X溶液 步骤三：放置肝脏小块 上表中还需进行的操作是 。培养一段时间后，取 4 组装置中的等量培养液，分别添加到 4 份备用的淋巴细胞培养液中继续培
72、养。一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察 ，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明 。【答案】（1）吸收氧气和营养物质、排出代谢废物（2）维持培养液适宜的 pH （3）种类和剂量（4）向乙（或丁）组装置中放置肝脏小块 染色体形态和数量 肝脏小块对有机物 X 具有解毒作用【解析】本题考查动物细胞培养的相关知识。（1）把肝脏切成小薄片，有利于肝脏细胞的呼 胚胎工程（2009 江苏卷）8下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是 A卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 B胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割 C胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋
73、白质合成旺盛等特点 D胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中分离获取 （2009 广东卷）第 38 题（生物技术实践）和 39 题（现代生物科技专题）是选做题，考生只需作答其中一题。请根据下述材料，回答第 38 题或 39 题。材料：饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中，猪、禽等动物由于缺乏有关酶，无法有效利用植酸，造成磷源浪费，而且植酸随粪便排除后易造成环境有机磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成为目前重要的饲料添加剂之一。39.（10 分）现代生物科技专题（1）饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的
74、 ，然后改变植酸酶的 ，从而得到新的植酸酶。（2）培育转植酸梅基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是 。请简述获得转基因植株的完整过程。（3）为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过 转入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期可通过 方法，从而一次得到多个转基因猪个体。（4）若这些转基因因动、植物进入生态环境中，对生态环境有何影响？【答案】（1）空间结构 氨基酸序列（2）农杆菌介导的转化法 外源植酸酶基因农杆菌大豆细胞大豆植株再生鉴定（3）显微注射法 胚胎分割移植（4）减少环境中磷的污染，但该基因可能扩散到环境中。【解析】本题考
75、查了基因工程，蛋白质工程，胚胎工程，生态工程的基本技术，并且深入考察基础知识，对蛋白质改造时，首先要知道蛋白质的结构，有氨基酸序列构成的一级结构和折叠组装成的空间结构。转基因技术有四个基本步骤，经常采用农杆菌介导法，因为农杆菌容易侵染植物细胞，重组质粒被导入受体细胞时，经常用到显微注射法，而胚胎分割移植能快速繁育优良种畜，基因工程能够使个体表现出人们所需要的性状，减少环境中磷的污染，但可能会随个体的杂交。扩散到环境中去，造成基因污染。（2009 辽宁、宁夏卷）41【生物选修 3 现代生物科技专题】（15 分）右图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分 化的示意图。请回答：（1）胚胎干细胞是从动物胚胎发育
76、至 _期的内细胞团或胎儿的_中分离得到 的一类细胞。（2）图中分化程度最低的干细胞是_。在体外培养条件下，培养液中加入_因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。（3)在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因_的结果。（4）某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的，骨髓的治疗的实质是将上图的_细胞移植到患者体内。（5）若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的_，其原因是_。（6）若某药物可抑制肝肿瘤细胞 NDA 的复制，使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的_期。（7）在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段
77、，用_细胞与骨髓细胞融合，经多交筛选最终得到能分泌_的杂交瘤细胞。【解析】（1）胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，囊胚阶段细胞开始分化分为内细胞团和滋养层细胞。（2）图中分化程度最低的干细胞是胚胎干细胞，全能性最高，在体外培养条件下，该种干细胞可诱导分化形成不同类型的组织细胞，培养液中加入分化诱导因子。（3)细胞分化是细胞中基因选择性表达的结果。（4)骨髓是人体的造血组织，存在造血功能干细胞，骨髓的治疗的实质是将上图的造血干细胞移植到患者体内。（5）克隆某种哺乳动物需要供体提供细胞核，而成熟的红细胞没有细胞核，所以不能作为供体。（6）细胞周期包括分裂间期和分裂期，分裂间期完
78、成 DNA 分子的复制和有关蛋白质的合成。（7）单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用 B 淋巴细胞与骨髓细胞融合，交筛选最终得到能分泌一种特异性抗体的杂交瘤细胞。（2009 海南卷）26.（18 分）（选修模块 3：现代生物科技专题）请回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题：（1）精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体，顶体内含有的 能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带。（2）某动物排卵时，减数第一次分裂尚未完成，此时卵子处于 卵母细胞阶段，当该细胞发育至减数第二次分裂 期时，才具备受精能力。若在卵黄膜和透明带之间看到两个极体，则表明 过程已完成。（3）动物的早期胚胎移植到同种且 与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。为了获得更多的早期胚胎，常用 激素对供体进行处理，其目的是获得更多的 ，经人工受精后可得到早期胚胎。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜 。（4）若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到桑葚期或囊胚期阶段的早期胚胎进行 处理，再植入到受体内。若要对早期胚胎进行长期保存，应将其置于 条件下。
