1、专题五综合检测(时间：60分钟满分：100分)一、选择题(130每题1.5分，3133每题1分，共48分)1(2014南京)下列关于“DNA粗提取与鉴定实验的叙述，正确的是导学号 06350431()A洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B将DNA丝状物放入二苯胺试剂中变蓝C常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取D用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少答案C解析洗涤剂可瓦解植物细胞膜，利于释放DNA，但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度，A项错误；DNA与二苯胺试剂在沸水浴条件下变成蓝色，B项错误；用玻璃棒缓慢搅拌滤液可使DNA分子充分溶解，可提高DNA的获得量，D
2、项错误；菜花匀浆中含有多种酶，可影响到DNA的提取，C项正确。2(2014广州)以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是导学号 06350432()A洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂B猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少C血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测D在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢答案D解析考查实验技术和原理。凝胶色谱法分离的原理是大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布颗粒之间，所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外，还可以进入凝胶颗粒的微孔中，即进入凝胶相内，在向下移动的过
3、程中，从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒，如此不断地进入和扩散，小分子物质的下移速度落后于大分子物质，从而使样品中分子大的先流出色谱柱，中等分子的后流出，分子最小的最后流出，所以血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动得快。3(2014郑州)在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的试验中，相关的叙述正确的是导学号 06350433()A用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L，滤去析出物B调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C将丝状物溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同答案B解析本题考查DNA
4、的粗提取与鉴定实验。在实验中，先用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA，除去不溶的一些杂质；再将溶液稀释为0.14mol/L的NaCl溶液，此时DNA沉淀析出，而其它的杂质却溶解在0.14mol/L的NaCl溶液中，通过过滤，把比较纯净的DNA沉淀分离出来，再溶解，就得到了比较纯的DNA溶液，以用于后续实验，A项错误；加入二苯胺试剂后，需要将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，观察溶液中颜色变化，C项错误；菜花细胞有细胞壁，试验步骤不相同，D项错误。4选用红细胞作分离蛋白质的实验材料，有何好处导学号 06350434()A血红蛋白是有色蛋白B红细胞无细胞核C红细胞蛋白质含量高 D红细胞D
5、NA含量高答案A5许多生物大分子具有的可解离的基团，在下列哪种条件下，会带上正电或负电导学号 06350435()A一定温度 B一定pHC一定压强 D一定容器答案B6缓冲溶液的作用是导学号 06350436()A维持pH基本不变 B使pH升高C使pH降低 D改变溶液pH答案A7提取出的含杂质少的DNA应是导学号 06350437()A白色块状 B黄色丝状C黄色块状 D白色丝状答案D解析提取出的含杂质少的DNA应是白色丝状。8将搅拌好的混合液离心来分离血红蛋白溶液时，第2层是导学号 06350438()A甲苯 B血红蛋白水溶液C脂溶性物质的沉淀层 D其他杂质的沉淀答案C解析混合液的第2层为脂溶性
6、物质的沉淀层。9DNA变性后理化性质有下述变化，其中正确的是导学号 06350439()A对260nm紫外线吸收减少 B溶液黏度下降C磷酸二酯键断裂 D核苷酸断裂答案B解析DNA变性后在理化性质上应表现为溶液黏度下降。10凝胶色谱操作正确的是导学号 06350440()A将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴B将橡皮塞下部用刀切出凹穴C插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片答案A解析凝胶色谱操作过程中可用刀在橡皮塞的上部切出锅底的凹穴。11关于高中生物学实验的基本原理，叙述不正确的是导学号 06350441()A噬菌体须在活菌中增殖培养是因其缺乏独立的代谢系
7、统B提取组织DNA是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异C成熟植物细胞在高渗溶液中发生质壁分离是因为细胞壁具有选择透过性DPCR呈指数扩增DNA片段是因为上一轮反应的产物可作为下一轮反应模板答案C12对“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述，正确的是导学号 06350442()A利用DNA能溶于酒精溶液，而蛋白质不溶于酒精溶液，可将DNA与蛋白质分离B利用高温能使蛋白质变性，却对DNA没有影响的特性，可将DNA与蛋白质分离C在溶有DNA的2mol/L氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水，轻轻搅拌后过滤，取滤液进行以后的实验D在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可将DNA与蛋白质分离答案D解析利用D
8、NA不溶于酒精溶液，蛋白质溶于酒精溶液，可将DNA与蛋白质分离；利用高温能使蛋白质、DNA变性，蛋白质在6080可变性，而DNA在80以上也会变性，所以高温对DNA有影响；利用DNA在0.14mol/L NaCl溶液中溶解度最小的特点，可将DNA与杂质分离；在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶专一性作用，可将DNA与蛋白质分离。13在DNA的粗提取过程中，初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品分别是导学号 06350443()0.1g/mL的柠檬酸钠溶液 2.00mol/L的NaCl溶液0.14mol/L的NaCl溶液 体积分数为95%的冷酒精溶液A BC D答案D解析在物质的量浓度
9、为0.14mol/L的NaCl溶液中，DNA析出而蛋白质溶解；冷却的体积分数为95%的酒精溶液能使DNA析出。14在进行DNA的粗提取实验中，若选择的是植物细胞，在破碎细胞时，加入一定量的洗涤剂和食盐，则加入洗涤剂与食盐的目的分别是导学号 06350444()有利于DNA溶解 分离DNA和蛋白质溶解蛋白质 溶解细胞膜A BC D答案B解析洗涤剂是一种离子去垢剂，可以溶解细胞膜，有利于细胞内含物(DNA)的释放，食盐的主要成分是NaCl，可以加速核蛋白解聚，游离出DNA分子，并使DNA分子充分溶解于NaCl溶液中。15如图表示DNA变性和复性示意图，下列相关说法正确的是导学号 06350445(
10、)A向右的过程为加热(80100)变性的过程B向左的过程是DNA双链迅速致冷复性C变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同D图中DNA片段共有4个游离的磷酸基、4个3端答案A解析向左为缓慢冷却复性；变性是在90以上时，DNA双链解旋为单链，这一过程在生物体内需解旋酶；图中DNA片段有两个游离磷酸基，2个3端。16PCR一般要经过三十次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物延伸而成的DNA单链作模板时将导学号 06350446()A仍与引物结合进行DNA子链的延伸B与引物结合进行DNA子链的延伸C同时与引物和引物结合进行子链延伸D无需与引物结合，在酶的作用下从头合成
11、子链答案B解析此题考查学生对PCR反应中的变性、复性、延伸的实质能否真正理解。当由引物延伸而成的DNA单链作模板时，此单链引物端为5端，因此与它互补的子链应从另一端开始合成，即由引物结合延伸DNA的子链。17关于DNA片段PCR扩增实验的描述中不正确的是导学号 06350447()A加入的TaqDNA聚合酶耐高温B不同大小DNA在电场中迁移速率不同C此过程需要DNA连接酶D扩增区域由两种引物来决定答案C解析PCR扩增实验是在较高温度下进行的，故需要耐高温的Taq DNA聚合酶，但不需要DNA连接酶，A项正确，C项错误。因为不同大小的DNA带有不同数量的电荷，所以在电场中迁移速率不同，B项正确。
12、PCR扩增需要两种引物，分别与DNA的两条模板链互补，则D项正确。18下列叙述中错误的是导学号 06350448()A改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质D用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质答案A解析在不同浓度的氯化钠溶液中DNA的溶解度不同。在物质的量浓度为0.14mol/L的氯化钠溶液中DNA溶解度最小。19下列说法错误的是导学号 06350449()A在一定范围内，缓冲溶液能够抵抗外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变B缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水中配制而成C电
13、泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程D透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内答案D解析透析袋一般用硝酸纤维素制成，又称玻璃纸。透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内。20下列关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中，错误的有导学号 06350450()A提取动物细胞中的DNA和蛋白质可以采用蒸馏水胀破细胞的方法B采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白质等杂质C蛋白质纯化过程中采用透析法可去除溶液中的小分子杂质D血红蛋白只能采用凝胶色谱法纯化，DNA则可采用电泳、盐析等方法纯化答案D解析提取动物细胞中的DNA和蛋白质可以采用蒸馏水胀破细胞的方法，
14、因为蒸馏水相当于低渗溶液；高盐溶液溶解DNA，能除去在高盐溶液中不能溶解的杂质，用低盐溶液使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中不能溶解的杂质，因此采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白质等杂质；透析袋可允许小分子自由进出，而大分子则保留在袋内，因此通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质；血红蛋白能采用凝胶色谱法纯化，也可采用电泳法纯化。21下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验，叙述正确的是导学号 06350451()A前者选择鸡血细胞作材料较好；后者选择哺乳动物成熟的红细胞做实验材料较好B样品预处理时，前者静置1 d除去上清液即可；后者要加入清水反复低
15、速短时间离心洗涤，至上清液无黄色即可CDNA粗提取实验中，向质量浓度为2 mol/L氯化钠溶液中加入蒸馏水析出DNA时，应缓慢加入，直到出现黏稠物为止D血红蛋白的提取和分离实验的原理是在电场中带电颗粒迁移的速度不同答案A解析鸡血细胞有细胞核，哺乳动物成熟红细胞无细胞核和各种细胞器，故前者适于提取DNA，后者适于提取血红蛋白；提取血红蛋白的实验中，洗涤红细胞时，不能加清水，而应加入生理盐水，否则细胞提早破裂释放出血红蛋白与杂质混合，会加大提取难度；DNA初次析出时，加清水至黏稠物不再增加时为止；血红蛋白提取和分离的原理是透析和凝胶色谱柱中相对分子质量大小不同的蛋白质迁移速率不同而实现分离。22蛋
16、白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述不正确的是导学号 06350452()A根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离B根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质C根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质D根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质答案A解析蛋白质分子不能透过半透膜，而溶液中的小分子物质则可以透过半透膜，因此可以将蛋白质和溶液中的小分子物质分离。23细胞破碎后，各种蛋白质就会被释放出来，再根据蛋白质的不同特性进行提取。下列关于蛋白质提取的措施中，不正确的是导学号 06350453()
17、A酸性蛋白质可用稀碱性溶液提取B水溶性蛋白质可用透析液(中性缓冲液)提取C脂溶性蛋白质可用有机溶剂提取D碱性蛋白质可用强酸性溶液提取答案D解析提取蛋白质的基本原理是根据蛋白质的物理性质，加入不同的试剂，使蛋白质溶于试剂中而提取蛋白质。强酸、强碱都会使蛋白质变性而沉淀。24下列试剂可用于血红蛋白释放的是导学号 06350454()生理盐水 甲苯磷酸缓冲液 蒸馏水柠檬酸钠A BC D答案A解析在蒸馏水中红细胞吸水胀破，甲苯作为有机溶剂能够溶解细胞膜，加速细胞的破裂。25凝胶色谱分离法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是导学号 06350455()A改变蛋白质分子通过凝胶的路径B吸附一部
18、分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度C将酶或细胞固定在凝胶中D与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度答案A解析凝胶的种类很多，但每一种凝胶内部都有通道，相对分子质量小的蛋白质分子容易进入通道，移动距离变长，移动速度减慢，而相对分子质量大的分子不能进入通道，其移动距离短，移动速度快，因此可把相对分子质量不同的蛋白质分开。26下图是用除去DNA的滤液进行血红蛋白的提取和分离实验的装置，下列有关叙述不正确的是导学号 06350456()A首先用图甲装置对滤液进行处理，其目的是去除相对分子质量较小的杂质B图乙装置的试管中收集到的液体中最先出现的是相对分子质量较小的蛋白质C用图乙装置分离血红蛋白
19、时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每管收集5mL，连续收集D图丙装置中电泳法分离提纯血红蛋白的原理是血红蛋白带有一定量的电荷，在电场的作用下向一极移动答案B解析用图甲装置对滤液进行处理，其目的是去除相对分子质量较小的杂质。图乙装置表示通过凝胶色谱法分离蛋白质的过程。蛋白质的相对分子质量较大，被排阻在凝胶颗粒的外面，在颗粒之间迅速通过。27根据血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳图谱示意图分析，所带负电荷最多的球蛋白是导学号 06350457()A1球蛋白 B2球蛋白C球蛋白 D球蛋白答案A解析根据电泳的原理进行分析。带电粒子在电场中向与其电性相反的电极泳动的现象称为电泳，因此，移动越慢
20、的，所带负电荷就越少(点样是在负极)。28下列关于蛋白质提取和分离实验中样品处理步骤的描述，正确的是导学号 06350458()A红细胞的洗涤：加入蒸馏水，缓慢搅拌，低速短时间离心B血红蛋白的释放，加入生理盐水和甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌C分离血红蛋白：将搅拌好的混合液离心，过滤后，用分液漏斗分离D透析：将血红蛋白溶液装入透析袋，然后置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12 h答案C解析红细胞洗涤步骤中应加入生理盐水而不是蒸馏水，血红蛋白释放中加入蒸馏水，透析时缓冲液pH应为7.0而不是4.0。29在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是导学号 06350459()A防止血红
21、蛋白被氧化B血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和C磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D让血红蛋白处在稳定pH范围内，维持其结构和功能答案D解析利用磷酸缓冲液模拟细胞内的pH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于分离观察(红色)和研究(活性)。30凝胶柱制作的顺序一般是导学号 06350460()橡皮塞打孔 挖凹穴装玻璃管 盖尼龙网盖尼龙纱 将橡皮塞插入玻璃管接尼龙管、装螺旋夹 柱顶安装带玻璃管的橡皮塞ABCD答案B解析凝胶柱制作的一般流程是：选择玻璃管选择合适的橡皮塞打孔挖凹穴安装玻璃管盖尼龙网盖尼龙纱将像皮塞插入玻璃管接尼龙管装螺旋夹柱顶安装玻璃管的橡皮塞。31用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对
22、分子质量大的蛋白质导学号 06350461()A路程较长，移动速度较慢B路程较长，移动速度较快C路程较短，移动速度较慢D路程较短，移动速度较快答案D解析凝胶颗粒内部有许多贯穿的通道，当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。32多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环；95下使模板DNA变性、解链55下复性(引物与DNA模板链结合)72下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关
23、PCR过程的叙述中不正确的是导学号 06350462()A变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠碱基互补配对原则完成C延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸DPCR与细胞内DNA复制相比，所需要酶的最适温度较高答案D解析PCR技术实际上就是DNA的复制，因此用的原料是脱氧核苷酸。33对含血红蛋白的样品透析和洗脱均用到磷酸缓冲液。磷酸缓冲液的pH依次为导学号 06350463()A5.0、8.0 B8.0、5.0C7.0、8.0 D7.0、7.0答案D解析红细胞内的pH一般为7.0，为了不破坏所提取血红蛋白的分子结构
24、，对含血红蛋白的样品透析和洗脱用到的磷酸缓冲液pH均为7.0(中性)。二、非选择题(共52分)34(14分)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验：导学号 06350464(1)该实验依据的原理是()ADNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而不同B利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯净的DNACDNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂D在沸水中DNA遇二苯胺会出现蓝色反应(2)实验的正确操作步骤是()A制备鸡血细胞提取细胞核物质溶解核内的DNA析出并滤取DNA黏稠物DNA的再溶解提取较纯净的DNA鉴定DNAB制备鸡血细胞液提取细胞核物质溶解并析出D
25、NADNA的再溶解提取较纯净的DNA鉴定DNAC制备鸡血细胞液溶解DNA提取细胞核中DNADNA的再溶解提取较纯净的DNADNA的鉴定D制备鸡血细胞的细胞核物质提取液溶解并析出DNA提取较纯净的DNADNA的鉴定(3)实验过程中第一次所用NaCl溶液的浓度是_；第二次所用NaCl溶液的浓度是_。所用酒精最好是_，其体积分数为_。(4)鉴定DNA的方法是，向溶有DNA丝状物的试管中加入_mL的_试剂，混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，冷却后可观察到溶液呈_；也可取少许DNA丝状物置于载玻片上，滴一滴_溶液，片刻后用水冲洗，可见丝状物被染成_。答案(1)ABD(2)A(3)2mol/L2m
26、ol/L冷酒精95%(4)4二苯胺浅蓝色甲基绿蓝绿色35(12分)下列是有关血红蛋白的提取与分离的问题，请回答下列问题。导学号 06350465(1)人们用鸡的红细胞提取DNA，用人的红细胞提取血红蛋白，其原因是_。(2)凝胶色谱法是根据_分离蛋白质的有效方法。所用的凝胶实际上是一些_。(3)蛋白质的提取和分离实验中，首先要用_(填写溶液名称)洗涤红细胞，其目的是去除_。(4)在_和甲苯的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白。用_法可分离出血红蛋白。(5)取血红蛋白溶液装入透析袋，再将透析袋放入pH为7.0的_中，透析12h。答案(1)鸡红细胞具有细胞核，含有DNA，适合用于提取DNA；人红细胞
27、无细胞核，且血红蛋白含量丰富，适合用于提取血红蛋白(2)相对分子质量的大小微小的多孔球体(3)生理盐水杂蛋白(4)蒸馏水离心(5)(磷酸)缓冲液解析(1)鸡的红细胞有细胞核，含DNA丰富；人的红细胞无细胞核，含血红蛋白丰富。(2)凝胶色谱法的凝胶是多孔球体，蛋白质分子小的能通过凝胶颗粒内部而滞留，蛋白质分子大的排阻在外，迅速通过。(3)蛋白质的提取和分离实验中，首先要用生理盐水洗涤红细胞，去除杂蛋白。(4)红细胞吸水胀破后，离心分离出血红蛋白。(5)透析时要将透析袋放入pH为7.0的磷酸缓冲液中。36(12分)分析回答下列有关生物技术实践的问题：导学号 06350466PCR是一种DNA体外扩
28、增技术。1988年，PCR仪问世，并被广泛应用于基因扩增和DNA序列测定。如图是PCR技术示意图，请回答下列问题：(1)标准的PCR过程一般分为_、_、_三大步骤。(2)引物是此过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一小段_。(3)将双链DNA_，使之变性，从而导致_。(4)引物延伸需提供_作为原料。答案(1)变性复性延伸(2)单链DNA或RNA(3)加热到90以上双链DNA解聚为两条单链(4)四种脱氧核苷酸解析本题考查的主要是PCR技术的扩增原理和过程，属识记层面的考查。(1)PCR一般分三步：变性、复性和延伸。(2)引物从化学本质上说是一小段单链DNA或RNA。(3)用热变性原理使D
29、NA变性。(4)引物延伸需提供四种脱氧核苷酸。37(14分)(2014湖北联考)DNA复制过程也可在细胞外进行，以获得大量相同的DNA片段，该项技术称之为PCR技术，又称多聚酶链式反应，请分析回答：导学号 06350467(1)PCR技术过程的三个步骤：_、_、_。(2)PCR技术中当温度降低至55时，_原则保证引物与模板末端特异性结合。升温至72，在_的作用下，从子链的_方向延伸。(3)PCR技术能在几小时内将极微量的DNA片段特异性地扩增上百万倍，从而解决了样品中DNA含量低，难以分离的难题。试举两例，说明PCR技术的应用。_答案(1)变性复性延伸(2)碱基互补配对耐高温的DNA聚合酶(或Taq DNA聚合酶)53(3)刑侦案件；亲子鉴定；疑难疾病的诊断；基因序列分析等(任选两例)解析(1)PCR技术过程包括变性、复性和延伸。(2)碱基互补配对原则保证引物与模板末端特异性结合；在升温至72时，在Taq DNA聚合酶的作用下，从子链的53方向延伸。
