1、高考资源网（） 您身边的高考专家实验5加酶洗衣粉的使用条件和效果(略)实验6淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测学考报告知识内容考试属性考情解读淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测加试1.尝试用吸附法制作固定化淀粉酶。2运用固定化淀粉酶进行淀粉水解的测定。3说明酶固定化的方法及制作原理。4通过此实验探讨固定化酶的应用价值一、酶与固定化酶酶的定义酶是活细胞产生的具有催化作用的一类有机物，它是生物体内各种化学反应的催化剂。大多数酶是蛋白质，少数是RNA。固定化酶将水溶性的酶用物理或化学方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。将酶改造成固定化酶的原因由于酶在水溶液中很不稳定，且不利于工
2、业化使用，所以要将酶改造成固定化酶。酶固定化的方法：吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。固定化酶作用的机理将固定化酶装柱，当底物经过该柱时，在酶的作用下转变为产物。二、淀粉水解的过程及其在淀粉指示剂下的颜色反应淀粉糊精麦芽糖葡萄糖 遇碘显蓝色遇碘显红色遇碘不显色遇碘不显色三、淀粉酶的固定化及淀粉水解的实验实验原理(1)用吸附法将淀粉酶固定在石英砂上，一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示剂KII2指示液测试，流出物呈红色，表明水解产物糊精生成。(2)本实验使用的酶是枯草杆菌的淀粉酶，其作用的最适温度为 5075 ；最适pH为 5.57.5。实验步骤(1)淀粉溶液流
3、经固定化酶柱：将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上，用滴管加淀粉溶液，使该溶液以0.3 mL/min的流速过柱。(2)接取流出物：待从固定化酶柱中流出5 mL的溶液后，接收0.5 mL 流出液。(3)流出物鉴定：在流出物中加入KII2溶液，观察颜色。用水稀释1倍后再观察颜色。(4)洗涤、保存固定化酶柱：实验后，用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱。放置在4 冰箱中保存。(5)重复实验：几天后取出冰箱中该固定化酶柱，重复实验，观察结果。实验结果的比较1如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶？提示：可在试管中加入1 mL可溶性淀粉，再加几滴淀粉酶柱流出液，保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色，则流出
4、液中没有淀粉酶了。2耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途？提示：可以在高温下使淀粉水解快，而且酶不会因高温而失活，所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应中使用。固定化酶的特点及固定方法特点固定化酶与游离酶相比不但稳定性好，而且与底物和产物容易分离，且易于控制，能反复多次使用，便于运输和贮存，有利于自动化生产。固定化酶技术是在20世纪60年代发展起来的一项技术，很快在工业、医学和生化分析等方面得到了广泛应用。特点具体如下：(1)使酶固定化后有一定的机械强度，催化反应的过程可管道化、连续化和自动化。(2)酶不溶解在催化反应的溶液中，产物更易纯化。(3)固定化酶可反复使用，更经济，更利于工厂化生产
5、。(4)固定化酶提高了酶的稳定性，可较长时间地贮存和使用。(5)一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都是通过一系列的酶促反应才能得到的。因此，在固定化酶技术的基础上，又发展出了固定化细胞技术。固定方法方法图示原理优缺点吸附法物理吸附法将酶蛋白的分子吸附在惰性载体上优点：适用的酶范围广，酶活性高缺点：酶与载体的结合力较弱，酶容易脱落离子交换法利用蛋白质的两性性质，使其带有电荷的基团与离子交换剂形成离子键，而被交换结合至交换剂上续表方法图示原理优缺点共价偶联法将酶与聚合物载体以共价键相结合。酶中的氨基、羧基、巯基、羟基、咪唑基、吲哚基、苯环等常与载体共价结合，从而被固定优点：
6、都是结合稳定，适用范围广缺点：都是制备条件不够温和，酶活性较低交联法使用双功能或多功能试剂使酶分子之间相互交联呈网状结构的固定化方法化学结合法将酶分子相互结合，或将其结合到纤维素、琼脂糖，离子交换树脂等载体上的固定方式很多情况下，与交联法几乎是等同的包埋法凝胶包埋法微胶囊包埋法酶被包埋成网格型，常用的载体有海藻酸钠凝胶优点：酶活性高、稳定性也较高缺点：适用范围小酶被包埋成微胶囊型，常用的载体有聚酰胺、火棉胶、醋酸纤维素(1)吸附法固定酶应选择不引起变性且能保持一定酶活力的载体，对蛋白质有高度吸附能力的有机硅胶、多空玻璃、活性炭和石英砂等。(2)共价偶联法中参加共价结合的氨基酸残基应当是酶催化活
7、性的非必需基团，如若共价结合包括了酶活性中心有关的基团，会导致酶的活力损失。(3)交联法使用的交联剂是水溶性化合物，其中使用最广泛的是戊二醛。戊二醛和酶蛋白中的游离氨基发生反应，从而使酶分子之间相互交联形成固定化酶。交联法中酶的活性中心构造可能受到影响，而使酶失活明显。(4)吸附法和共价偶联法又可统称为载体结合法。1下列关于固定化酶技术的说法中，正确的是()A固定化酶技术就是固定反应物，让酶依附着载体围绕反应物旋转的技术B固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C固定化酶中的酶无法重复利用D固定化酶是将酶固定在一定空间的技术解析：选D。固定化酶是利用物理或化学的方法将酶固定在一定的空间内，将酶
8、固定在不溶于水的载体上，使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，还可以重复利用，这样既可以降低生产成本，提高产品质量，还可以减少环境污染，由于固定化酶只能固定一种酶，不可能催化一系列的酶促反应。2下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，错误的是()A固定化酶的主要目的是实现酶的重复利用B溶解氧交换受阻是固定化酶应用的重要限制因素C固定化细胞用于生产能分泌到细胞外的产物D凝胶与被包埋细胞之间不是通过共价键结合解析：选B。A项，固定化酶技术是指将酶固定在不溶于水的载体上，使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，可实现重复利用。B项，固定化酶发挥作用不需要供氧，溶解氧交换受阻不会成为其应用的限制因素。C项，
9、固定化细胞只能用于生产分泌到细胞外的产物，否则无法获得需要的产品。D项，用凝胶包埋细胞利用的是物理方法。实验过程中的注意事项实验中要待固定化酶柱中流出5 mL液体后再接收流出液用于鉴定。因为固定化酶柱中的酶与流经柱子的淀粉反应需要一定的时间，刚开始流出的液体中由于反应时间过短，糊精未生成或生成的量太少，所以不利于后面的颜色鉴定。本实验中选用石英砂来固定化酶。固定化酶有许多方法，本实验中采用的是吸附法。现已证明石英砂对固定化淀粉酶、胰蛋白酶的作用效果较好。证明洗涤固定化淀粉酶柱的流出液中没有淀粉酶。可在试管中加入可溶性淀粉液，再加入几滴淀粉酶柱的流出液，混合后用手握住试管使温度增加，几分钟后加入
10、12滴KII2指示剂，如果混合液仍显蓝色，即可断定流出液中没有淀粉酶。用固定在石英砂上的淀粉酶柱再作用于淀粉液，使其自柱中流出，这样，作用的结果才能表明是淀粉酶的固定化酶作用的结果。使底物溶液通过装有固定化酶的柱，柱流出液即为酶催化的产物。有时也可将固定化酶或固定化细胞悬浮于底物溶液中，一定时间后溶液即被酶催化成产物。不管是固定化柱还是固定化悬浮体，回收后，在一定条件下贮存，都可以利用。控制滴灌流速。0.3 mL/min的流速，即滴管流出量为每分钟6滴。这样做的目的是控制流速让淀粉和淀粉酶充分接触、反应。在流出5 mL后接取0.5 mL流出液，然后向试管中加入12滴KII2溶液。切记，KII2
11、溶液不要加入太多，以免碘液颜色覆盖糊精淀粉反应后的颜色。1淀粉在各种酶的作用下会依次水解，不同阶段的水解产物遇到指示剂会出现不同的显色反应，下列选项中属于本实验中的反应物质和显色现象的是()A淀粉遇碘显蓝色B糊精遇KII2溶液显红色C麦芽糖遇碘不显色D葡萄糖遇本尼迪特试剂显红黄色解析：选B。淀粉流经淀粉酶固定化酶柱时，淀粉被酶水解成了糊精，而糊精遇到KII2溶液显红色。所以A、C、D选项中的物质都是错误的，不是淀粉、麦芽糖、葡萄糖，而是糊精。只有选项B正确。2下列关于淀粉酶的固定化过程的叙述，错误的是()A首先要在烧杯中将5 mg 淀粉酶溶于4 mL蒸馏水中B再将5 g石英砂加入上述烧杯中，不
12、时搅拌30 minC随后将烧杯中的物质装入1支下端接有气门心但并不封住的注射器中D最后用10倍体积的蒸馏水洗涤此注射器，除去那些未吸附的游离淀粉酶解析：选C。淀粉酶的固定化酶的制备应该是将烧杯中的物质装入1支下端接有气门心并用夹子封住的注射器中，而不是不封住的注射器中。一、选择题酶的固定方法不包括()A将酶吸附在固体表面上B将酶相互连接起来C将酶包埋在细微网格里D通过基因工程改造酶答案：D下列不属于固定化酶在利用时的特点的是()A可以被反复利用B有利于酶与产物分离C能自由出入依附的载体D固定化酶的活性受外界环境因素影响较小解析：选C。固定化酶由于酶被固定在不溶性的载体上很容易与产品分离，同时酶
13、也能反复使用，这是固定化酶的主要优点。固定化酶的化学本质和作用机理没有发生变化，其特性与正常酶是相同的。下列选项中是淀粉酶固定化所采用的方法是()A吸附法B共价偶联法C交联法D包埋法解析：选A。固定化酶的方法包括吸附法、共价偶联法、交联法、包埋法等。其中，淀粉酶固定化所采用的是吸附法，所以A选项是正确的。淀粉酶与其固定化酶的化学本质分别是()A蛋白质、脂质B蛋白质、蛋白质CRNA、蛋白质DRNA、脂质解析：选B。固定化酶是酶的衍生物，两者的化学本质是一样的。其中淀粉酶的化学本质是蛋白质，因此其固定化酶的化学本质也是蛋白质。酶的固定有多种方法，其中，通过酶分子的侧链基团相互作用，形成共价键而连接
14、起来的一种方法是()A吸附法B共价偶联法C包埋法D交联法解析：选B。共价偶联法是将酶与聚合物载体以共价键相结合。酶中的氨基、羧基等常与载体共价结合，从而被固定。酶的固定化常用的方式不包括()A吸附B包埋C交联D将酶加工成固体解析：选D。将酶加工成固体属于酶制剂，不属于固定化酶。固定化酶的方法主要有吸附法、交联法、包埋法、化学结合法等。下列属于固定化酶的优点是()A有利于酶的活性B有利于产物的纯化C有利于提高反应速度D有利于酶发挥作用解析：选B。将酶固定化使酶与产物易于分离、降低成本、提高产物的品质。下列不是用于包埋法固定化细胞的载体是()A琼脂糖B醋酸纤维素C聚丙烯酰胺D聚乙烯树脂解析：选D。
15、用于包埋法的载体的特点是多孔性载体，不溶于水。研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸二酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可以用来降解残留在土壤中的有机磷农药，与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的()A温度BpHC水分D营养解析：选D。酶不是生命有机体，不需要营养。用吸附法将淀粉酶固定在石英砂上，当一定浓度的淀粉溶液流过固定化酶柱后，柱底端收集到的溶液中，加入KII2溶液，其颜色变化为()A显蓝色B显红色C不显色D流出液中因含淀粉酶，使得溶液颜色显紫色解析：选B。一定浓度的淀粉溶液流过固定化淀粉酶酶柱后，淀粉可转化为糊精，糊精遇KII2溶液显红色，酶经固定化后，不能
16、从柱底端流出。如图表示某同学进行的澄清苹果汁生产实验，下列相关叙述正确的是()A实验中所用的固定化果胶酶只能利用吸附法获得B为防止杂菌污染，图示装置制作完毕后应瞬间高温灭菌C通过控制阀调节苹果汁流出的速率，保证反应充分进行D固定化果胶酶不可重复使用，每次生产前应重新装填反应柱解析：选C。固定化酶获得的方法不只有吸附法；瞬间高温灭菌会造成果胶酶失活；固定化酶可反复多次使用。有关固定化酶和固定化细胞的说法，不正确的是()A它们都受到外界pH的影响B它们都受到外界温度的影响C它们都需要从外界吸收营养物质D要将微生物的发酵过程变成连续的酶促反应，应选择固定化细胞解析：选C。固定化酶不需要营养。下列图形
17、依次表示包埋法、载体结合法、物理吸附法和交联法的一组是()ABCD解析：选C。为物理吸附法，为载体结合法，为包埋法，将酶包埋在网格中，为交联法。下列有关叙述，不属于酶固定化的原因的是()A可以持续发挥作用B在溶液中直接使用酶，难以回收，成本高C固定化酶使酶既可催化反应物，又易与产物分离D使用物理、化学等方法，将酶固定在一定的空间内解析：选D。酶固定化是用物理或化学的方法使酶固定在一定空间的技术与一般的酶制剂相比，具有A、B、C项描述的优点。D项不是酶固定化的原因。下列说法正确的是()A图甲表示淀粉分子链的一段，数字对应“”表示单糖之间的化学键，则淀粉酶发挥作用的位置一定是1、3、5处B图乙表示
18、酶活性与温度的函数关系。图示温度X时底物能量太高，所以不能与酶形成稳定的复合物C若图甲表示一条多肽链的片段，则肽酶的作用部位一定是“”D对酶的任何一部位进行改造，都会导致酶的活性发生改变解析：选C。淀粉酶只能将淀粉分解成麦芽糖，不能将其分解成葡萄糖；温度X时，酶部分失活；肽酶的作用部位是肽键，可将多肽分解成氨基酸；对除酶活性中心外的部位进行改造，对酶活性影响较小。下列有关固定化技术的叙述，正确的是()A固定化酶只是在细胞内才能发挥作用B固定化酶能提高酶的利用率C酶的固定是酶分离纯化的常用方法D固定化酶的固定化方式就是吸附在固体表面上解析：选B。固定化酶可反复利用，提高了酶的利用率。关于固定化酶
19、中的酶说法正确的是()A酶的种类具有多样性，可催化一系列的酶促反应B酶被固定在不溶于水的载体上，可反复利用C酶作为催化剂，反应前后结构不改变，所以固定化酶可永远利用下去D固定化酶由于被固定在载体上，所以丧失了酶的高效性和专一性特点解析：选B。固定化酶可反复利用，降低了成本。下列说法不正确的是()A固定化酶和固定化细胞的技术方法包括包埋法、化学结合法和物理吸附法B固定化酶更适合采用化学结合法和物理吸附法C由于细胞个大，而酶分子很小，因此细胞多采用物理吸附法固定D与固定化酶技术相比，固定化细胞制备的成本更低，操作更容易解析：选C。细胞个大，难以被吸附或结合，多采用包埋法，不易从包埋材料中漏出。关于
20、固定化酶和一般酶制剂在应用效果上的说法错误的是()A固定化酶活性强可长久使用B一般酶制剂应用后和产物混在一起，产物的纯度不高C一般酶制剂参加反应不能重复利用D固定化酶可以反复利用，降低生产技术成本、提高产量和质量解析：选A。固定化酶不能长久使用。目前，酶已经大规模地应用于各个领域，下列属于应用中面临的实际问题的是()A酶通常对强酸、强碱、高温非常敏感，但对有机溶剂不敏感B酶的结构比较稳定，所以催化功能很强C酶用于生产时可能会混在产物中，影响产品质量D直接用于生产中的酶可以多次利用解析：选C。生产中直接应用酶，不能对酶重复利用，且酶可能会混在产物中，影响产品质量。二、非选择题在上个世纪50年代，
21、酶已经大规模地应用于各个生产领域，到了60年代又发明了固定化酶技术。请回答下列有关问题：(1)固定化酶技术将酶固定在不溶于水的载体上，使酶既能与_接触，又能与_分离，同时固定在载体上的酶还能_。常用的固定方法有_。(2)“淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测实验”中：淀粉酶固定在 _ 上，使用了下图中方法_(填出号码及名称)。实验中，用滴管滴加淀粉溶液时，使淀粉溶液以_流速过柱，目的是_。灌注了固定化酶的注射器在使用完后要_，放置在_中保存。答案：(1)反应物产物反复利用吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法(2)石英砂乙吸附法0.3 mL/min使淀粉充分与酶接触用10倍体积的蒸馏水洗涤4 冰箱昆
22、虫学家用人工诱变的方法使昆虫产生基因突变，导致酯酶活性升高，该酶可催化分解有机磷农药。近年来已将控制酯酶合成的基因分离出来，通过生物工程技术将它导入细菌体内，并与细菌内的DNA分子结合起来。经过这样处理的细菌仍能分裂繁殖。请根据上述资料回答：(1)人工诱变在生产实践中已得到广泛应用，因为它能提高_，通过人工选择获得_。(2)酯酶的化学本质是_，基因控制酯酶合成要经过_和_两个过程。(3)用固定化酶技术将该酯酶固定在尼龙网膜上后，再用于降解污水中有机磷的突出优点是_。(4)通过生物工程产生的细菌，其后代同样能分泌酯酶，这是由于_。(5)请你具体说出一项上述科研成果的实际应用。_。解析：用生物工程
23、技术可以改造生物的遗传特性，为人们所用；用诱变技术提高生物基因的突变率，从中选育出优良的生物品种；酶固定化技术使酶能反复使用，提高效率降低成本，或增大酶与反应物接触面积，并且不混合在生成物中，可互相利用。答案：(1)基因突变频率人们所需要的突变性状(2)蛋白质转录翻译(3)酶被固定化后可连续反复使用，降低成本(4)控制酯酶合成的基因随细菌DNA分子复制而复制，并在后代中表达(5)用于降解污水中的有机磷农药，以保护环境某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。请回答下列问题：(1)图中用KMnO4溶液浸泡苹果的目的是_。黑曲霉提取液中含有的_可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过
24、_方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去_。(2)实验中，操作流程A和B的先后顺序为_。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是_。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否带有果胶，可取一定量的果汁与等量的_混合，如果出现_现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调_。(3)实验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被_使用。解析：(1)KMnO4有杀菌消毒的作用，可将苹果表面的杂菌杀死。果汁中因含有果胶等而使苹果汁浑浊，用果胶酶处理可使果胶水解，使果汁澄清。固定化酶技术是将酶固定在固定化柱的载体上，固定化柱
25、内填充的石英砂可以起到很好的吸附作用。酶被固定后用蒸馏水冲洗是为了除去未被固定的酶。(2)具体操作时，先提取果胶酶，将果胶酶固定在固定化柱中，再将阀2打开，使苹果汁进入固定化柱，与酶接触，固定的果胶酶就能将果汁中的果胶分解，而果胶酶不流失。果胶中的果胶酸钙能与乙醇作用形成沉淀，故可用乙醇鉴定果汁中的果胶，如有浑浊现象，说明果汁中仍有果胶存在，此时应控制流速调节阀2的流量，调慢果汁流速。(3)酶被固定化后，便于与反应物和产物分离，可重复利用，提高酶利用率。答案：(1)消毒果胶酶吸附未被固定的酶(2)AB阀1乙醇浑浊(沉淀)慢(3)重复用淀粉酶将玉米粉水解生成寡糖，再用糖化酶处理产生95%97%的
26、葡萄糖液。由于葡萄糖的甜度比蔗糖低得多，所以，利用葡萄糖异构酶将葡萄糖异构化转变成果糖，就可以解决这一问题。现通过淀粉酶、糖化酶和固定化葡萄糖异构酶，将玉米粉转化成含葡萄糖50%、果糖42%、其他糖8%的反应物，称为高果糖浆或果葡糖浆。它虽然是一种混合物，但甜度与蔗糖相同，而比葡萄糖高出许多。因此，在饮料、食品生产中大量应用。现在，一些发达国家高果糖浆的年产量已达几百万吨，高果糖浆在许多饮料的制造中已经逐渐代替了蔗糖。请回答下列问题：(1)在生产高果糖浆的过程中，为了使葡萄糖异构酶能够反复使用，采用了_技术。(2)在上述生产过程中，若直接用固定化葡萄糖异构酶处理寡糖，能得到高果糖浆吗？说明理由
27、。_。(3)为使固定化葡萄糖异构酶发挥最大的催化效果，在生产过程中需要注意什么？_。(4)如何测定葡萄糖异构酶的最适pH和最适温度？写出大致的实验设计思路。_。解析：(1)目前食品加工、医药等行业广泛采用了固定化酶技术，使酶可以反复使用。(2)若直接用固定化葡萄糖异构酶处理寡糖，不会得到高果糖浆，原因是葡萄糖异构酶只能作用于葡萄糖，使之转化为果糖，而对寡糖不起作用，这是由酶的专一性决定的。(3)由于葡萄糖异构酶是生物催化剂，它需要适宜的温度和适宜的pH。(4)酶的最适温度和最适pH是人们在长期的摸索中得出的，一般测定方法是将温度或pH作为自变量，设置合理的梯度，通过比较生成物的量来确定。答案：
28、(1)固定化酶(2)不能。葡萄糖异构酶具有专一性(3)控制生产过程中的温度和pH值(4)配制浓度相同的酶溶液，设置合理的温度(或pH)梯度与足量葡萄糖混合，经过相同的时间后，测定果糖的生成量即可确定葡萄糖异构酶的最适温度(或pH)25下面是关于固定化酶和细菌培养实验的问题。请回答：(1)某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验，分组见下表。组别固定化酶柱长度(cm)淀粉溶液的流速(mL/min)甲100.3乙100.5丙150.3丁150.5将吸附了淀粉酶的石英砂装入柱中后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去_。按上表分组，将配制好的淀粉溶液加入到固定化酶柱中，然后取一定量的流出液进行KI
29、I2检测。若流出液呈红色，表明有_生成；若各组呈现的颜色有显著差异，则流出液中淀粉水解产物浓度最高的是_组。(2)下列关于上述固定化酶实验的叙述，错误的是_。A固定化酶柱长度和淀粉溶液流速决定了酶柱中酶的含量B淀粉溶液流速过快会导致流出液中含有淀粉C各组实验所用的淀粉溶液浓度应相同D淀粉溶液的pH对实验结果有影响(3)现有一份污水样品，某兴趣小组欲检测其中的细菌数，进行以下实验。将一定量的污水样品进行浓度梯度稀释。取适量不同稀释度的稀释液，用_法分别接种于固体平面培养基上，经培养后进行计数。该实验应注意，接种前，从盛有_的容器中将玻璃刮刀取出，放在酒精灯火焰上灼烧，冷却后待用；分组时，需用_作
30、为对照。(4)在上述细菌培养实验中进行计数时，应计数的是接种了_。A各个稀释度样品的培养基上的细菌数B合理稀释度样品的培养基上的细菌数C各个稀释度样品的培养基上的菌落数D合理稀释度样品的培养基上的菌落数解析：(1)利用固定化酶进行酶解淀粉的实验时，先要将酶固定化。此题中利用石英砂吸附淀粉酶。装入固定化酶柱时有些酶没有完全吸附在石英砂上，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的游离的淀粉酶。淀粉酶可使淀粉水解成糊精，如果用淀粉指示剂(KII2)检测糊精，则呈现红色。酶的量不同，水解的效果也不同，丙组固定化酶柱的长度较长，其固定化酶的总量较多，且柱中淀粉溶液的流速也较慢，反应充分，故产物浓度高
31、，颜色最深。(2)A项，固定化酶柱的长度决定了酶的含量，反应是否充分与淀粉溶液的流速有关，从而决定了产物的浓度。B项，如果淀粉溶液的流速过快，则淀粉与酶接触不充分，从而使淀粉不能被充分水解。C项，各组淀粉溶液的浓度是实验的无关变量，故各组实验所用的淀粉溶液浓度应该相同。D项，温度、pH会影响酶的活性，从而对实验结果造成影响。(3)细菌的分离与计数常用涂布平板法，即用玻璃刮刀将一定体积的稀释液涂布到固体平面培养基上。玻璃刮刀在使用前需进行灭菌处理，即将其浸入体积分数为70%的酒精中，随后取出放在酒精灯火焰上灼烧，冷却后待用。为排除其他因素的影响，提高实验的可信度，实验中要设置空白对照。(4)将菌液涂布到固体平面培养基上后，倒置放在恒温箱中培养，培养一段时间后，统计菌落数。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，这样通过统计菌落数就可估算出待测样品的细菌数目，所以要选择合理稀释度的样品。答案：(1)未吸附的淀粉酶糊精丙(2)A(3)涂布分离70%酒精未接种的培养基(4)D高考资源网版权所有，侵权必究！
