1、课后分层检测案10DNA的粗提取与鉴定基础巩固练1在制备鸡血细胞液的过程中,加入柠檬酸钠的目的是()A防止凝血B加快DNA析出C加快DNA溶解 D加速凝血2用过滤的方法得到含DNA的氯化钠溶液后,还要用酒精处理,才可以得到较纯的DNA,这是因为()ADNA易溶于酒精,而滤液中某些杂质不易溶于酒精BDNA不易溶于酒精,而滤液中某些杂质易溶于酒精CDNA和滤液中其他成分更易溶于酒精DDNA和滤液中其他成分都不溶于酒精3在DNA提取过程中,最好使用塑料的试管和烧杯,目的是()A不易破碎B减少提取过程中DNA的损失C增加DNA的含量D容易洗刷4下面不能影响DNA粗提取含量的是()A选材 B洗涤剂的用量
2、C二苯胺的用量 D搅拌和研磨的程度5下列关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验操作的说法,有误的是()A该实验中有两次加入蒸馏水,均是为了析出DNAB该实验操作中多次用到搅拌,除最后一步未强调方向外,其余均要求单向搅拌C该实验中有3次过滤,过滤时使用纱布的层数与滤液或黏稠物有关D实验中3次加入浓度为2 mol/L的NaCl溶液,均是为了溶解DNA6若从植物细胞中提取DNA,发现实验效果不好,如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等。其可能的原因是()植物细胞中DNA含量低研磨不充分过滤不充分95%冷酒精的量过大A BC D7在DNA的粗提取与鉴定实验中有三次过滤(1)过滤用蒸馏水稀释过的
3、鸡血细胞液(2)过滤含黏稠物的物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液(3)过滤溶解有DNA的物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液以上三次过滤分别为了获得()A含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液B含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA滤液C含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的DNAD含较纯DNA滤液、纱布上黏稠物、含DNA滤液8DNA的粗提取与鉴定实验的正确操作步骤是()A制备鸡血细胞液提取细胞核物质溶解核内的DNA析出并滤取DNA黏稠物DNA的再溶解提取较纯净的DNA鉴定DNAB制备鸡血细胞液提取细胞核物质溶解并析出DNADNA的再溶解提取较纯净的DN
4、A鉴定DNAC制备鸡血细胞液溶解DNA提取细胞核中的DNADNA的再溶解提取较纯净的DNADNA的鉴定D制备鸡血细胞的细胞核物质提取液溶解DNA并析出提取较纯净的DNADNA的鉴定9下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的一些重要操作示意图,据图回答下列有关该实验的问题:(1)正确的操作顺序是_。(2)上图C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是_和_。(3)上图A步骤中所用酒精必须是经过_才能使用,该步骤的目的是_。(4)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加_试剂,沸水浴,如果出现_,则该丝状物的主要成分为DNA。能力提升练10下列关于DNA的粗提取和鉴定的实验过程的叙述,不正
5、确的是()A操作步骤为:制备鸡血细胞破碎细胞,获取含DNA的滤液溶解核内的DNA并过滤析出并滤取含DNA的黏稠物DNA的再溶解并过滤提取较纯净的DNA鉴定DNAB实验过程中第一次所用NaCl溶液的浓度是2 mol/L,目的是溶解细胞核内的DNAC实验过程中,过滤含黏稠物的0.14 mol/L的NaCl溶液和过滤溶解有DNA的2 mol/L的NaCl溶液的目的分别是得到纱布上的黏稠物和含DNA的滤液D向溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中加入二苯胺试剂即可出现蓝色变化11下列图示中能正确反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是()12在“DNA的粗提取和鉴定”实验中,甲、乙、丙、丁四
6、个小组除下表中所列处理方法不同外,其他操作步骤均正确,但实验结果却不同。下列有关叙述不正确的是()组别实验材料提取核物质时加入的溶液去除杂质时加入的溶液DNA鉴定时加入的试剂甲鸡血蒸馏水95%的酒精(25 )二苯胺乙菜花蒸馏水95%的酒精(冷却)双缩脲试剂丙猪血蒸馏水95%的酒精(冷却)二苯胺丁鸡血蒸馏水95%的酒精(冷却)二苯胺A.实验材料选择错误的组别是丙B沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁C甲组实验现象差的原因是25 的酒精对DNA的凝集效果差D乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂13甲、乙两图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置图。相关叙述正确的是()A图甲
7、的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为NaCl溶液,但两者浓度不同B图乙试管经稍稍加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变蓝,另一支试管中的溶液不变蓝C图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使DNA析出,并缠绕在玻璃棒上D图乙操作中所用的二苯胺需现配现用以达到较好的鉴定效果14在DNA粗提取与鉴定实验中,将第三次过滤获得的纱布上含有DNA的黏稠物(含有较多杂质)分别处理如下:序号操作过程放入2 mol/L的NaCl溶液,搅拌后过滤再加入0.14 mol/L的NaCl溶液,搅拌后过滤再加入冷却的、同体积的体积分数为95%的酒精溶液,用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物上述操作过程正确的是()A BC D15科研人员
8、以金定鸭、长乐灰鹅和象洞鸡的全血为实验材料,比较苯酚氯仿抽提法(方法A)和盐析法(方法B)提取血液中DNA的效率。下图中EDTA具有破坏细胞膜、抑制DNA酶活性的作用,SDS具有破坏细胞膜和核膜、使蛋白质变性和抑制DNA酶活性的作用。提取过程:实验结果:测定项目金定鸭长乐灰鹅象洞鸡方法A方法B方法A方法B方法A方法B纯度/OD值1.951.951.852.361.961.90浓度/gmL1534.29240.00899.17583.33385.35914.17注:纯DNA的OD值为1.8,OD值在1.751.85间,DNA纯度较好;OD值高于1.8,一般有RNA污染;OD值低于1.8,一般有蛋
9、白质或其他物质污染。请回答下列问题:(1)本实验不选择哺乳动物血液作为实验材料的原因是_。(2)步骤中,若只用蛋白酶K消化处理,对实验结果的影响是_。(3)步骤中,破碎细胞常用的方法是_。步骤中加入蒸馏水的目的是_。(4)对于长乐灰鹅、象洞鸡来说,较适宜的DNA提取方法分别是_、_。(5)结果表明,用不同方法提取DNA的实验中,影响DNA纯度的主要物质是_。不同鸟类的相同体积的血液中DNA提取量有明显差异,其原因可能是_。素养养成练16某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动,具体步骤如下:材料处理:称取新鲜的菜花、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。剪碎后分成两组,一组置于20 、另一组置于
10、20 条件下保存24 h。DNA粗提取:第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。第二步:先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步:取6支试管,分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测:在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂,混合均匀后,置于沸水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表:材料保存温度菜花辣椒蒜黄20 20 (注:“”越多表示蓝色越深)分析上述实验过程,回答下列问题: (1
11、)该探究性实验课题名称是_。(2)第二步中“缓缓地”搅拌,这是为了减少_。(3)根据实验结果,得出结论并分析。结论1:与20 相比,相同实验材料在20 条件下保存,DNA的提取量较多。结论2:_。针对结论1,请提出合理的解释:_。(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进一步提高粗提取时DNA的纯度,依据氯仿的特性,在第三步的基础上继续操作的步骤是:_,然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。课后分层检测案10DNA的粗提取与鉴定1解析:柠檬酸钠是抗凝血物质,可防止凝血,有利于鸡血细胞液的制备。答案:A2解析:DNA不易溶于酒精,而滤液中
12、某些杂质易溶于酒精,利用这个特点可去除溶于酒精的杂质,得到较纯的DNA。答案:B3解析:鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,若再被玻璃容器吸附一部分,提取到的DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,减少提取过程中DNA的损失。答案:B4解析:A项:尽量选择DNA含量高的材料粗提取DNA。B项:洗涤剂的用量和类型能影响细胞膜的瓦解程度,从而导致DNA的释放量的变化。C项:二苯胺是DNA的鉴定剂,而非提取剂。D项:搅拌和研磨充分有利于DNA的释放。答案:C5解析:两次加入蒸馏水,第一次是为了使细胞吸水破裂释放出核物质(DNA),
13、第二次是为了降低NaCl溶液的浓度,从而析出DNA。答案:A6解析:研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少;过滤不充分,也会导致提取的DNA量过少;若用于沉淀DNA的酒精量过少,也会导致DNA的沉淀量少,都会影响实验效果。答案:D7解析:过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液应取滤液(其内含DNA);过滤含黏稠物的物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液应取黏稠物(因其内含析出的DNA);DNA易溶于物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液,故过滤该溶液时应取滤液(其内溶有DNA)。答案:A8解析:B项漏掉了DNA溶解前要过滤;C项提取细胞核中DNA叙述欠妥,应是提取核
14、物质,并且应放在溶解DNA之前;D项叙述明显有误。答案:A9解析:两次加入蒸馏水的作用:第一次是使鸡血细胞吸水涨破,DNA从细胞中释放出来进入滤液;第二次是使溶解于物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中的DNA析出,与杂质分离。本题还涉及DNA的鉴定,DNA可在沸水浴条件下与二苯胺试剂作用,被染成蓝色。答案:(1)CBEDA(2)加速血细胞的破裂降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出(3)充分冷却提取含杂质少的DNA(4)二苯胺蓝色10解析:DNA的粗提取和鉴定的实验步骤包括:制备鸡血细胞破碎细胞,获取含DNA的滤液溶解核内的DNA并过滤析出并滤取含DNA的黏稠物DNA的再溶解和过滤提取较
15、纯净的DNA鉴定DNA,A正确;实验过程中第一次所用NaCl溶液的浓度是2 mol/L,目的是溶解细胞核内的DNA,B正确;过滤含黏稠物的0.14 mol/L的NaCl溶液的目的是去除溶于0.14 mol/L的NaCl溶液中的杂质,得到含有DNA的黏稠物,过滤溶解有DNA的2 mol/L的NaCl溶液的目的是得到含DNA的滤液,C正确;只有在沸水浴条件下,DNA才能与二苯胺反应呈现蓝色,D错误。答案:D11解析:在质量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小。答案:C12解析:菜花细胞有细胞壁,加入蒸馏水不破裂,须经过研磨。鉴定时要用二苯胺试剂。答案:D13解析:图甲烧杯中
16、为酒精溶液,图乙试管中为NaCl溶液;图乙试管需要在沸水中加热5 min;图甲用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌,卷起丝状物;图乙操作中所用的二苯胺最好现配现用,否则会影响鉴定的效果。答案:D14解析:第三次过滤后在纱布上的是粗提取的DNA,此DNA还含有杂质,因此将其溶于2 mol/L的NaCl溶液中,再进行过滤,以除去不溶于2 mol/L的NaCl溶液的杂质。然后向滤液中加入同体积的、冷却的体积分数为95%的酒精溶液即可析出DNA,然后挑出DNA进行鉴定。答案:C15解析:(1)哺乳动物血液中的血细胞主要是红细胞,哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核和线粒体等,故不含DNA。(2)可根据题目中的提示信息
17、解答。(3)动物细胞在蒸馏水中会吸水涨破;步骤是通过加入蒸馏水来降低NaCl溶液的浓度,DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,从而可以析出。(4)对照实验结果的表格即可得出结论。(5)结合表格中的数据和表格下的标注,因OD值都高于1.8,没有小于1.8的,则影响DNA纯度的主要物质是RNA。答案:(1)哺乳动物成熟的红细胞无细胞核和线粒体,不含DNA(2)DNA的提取量减少,纯度降低(3)向血细胞液中加入一定量的蒸馏水,并用玻璃棒搅拌降低NaCl溶液的浓度,析出DNA(4)苯酚氯仿抽提法(方法A)盐析法(方法B)(5)RNA不同鸟类血液中血细胞的密度不同(或不同鸟类血细胞中D
18、NA含量不同)16解析:(1)题目给出了多种实验材料,以探究不同保存温度对DNA提取量的不同影响,因此该实验名称可为“探究不同实验材料和不同保存温度对DNA提取量的影响”。(2)在提取DNA时,玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌,是为了有效提取DNA,防止DNA分子断裂。(3)由表格可知,菜花、辣椒、蒜黄三种不同的实验材料在20 时,DNA提取量表现为蒜黄多于菜花,菜花多于辣椒,在20 时结果相同,等质量的3种实验材料,在同一温度下DNA提取量不同(或从蒜黄提取的DNA量最多);低温下DNA水解酶的活性减弱,导致DNA降解速度慢,从而使DNA提取量相对较高。(4)由于氯仿可使蛋白质变性沉淀,而DNA易溶解于其中,对DNA结构无影响,因此可将第三步获得的滤液与等量氯仿混合,静置一段时间,蛋白质变性沉淀,而DNA溶解于上清液中,从而可吸取上清液,从上清液中提取DNA。答案:(1)探究不同实验材料和不同保存温度对DNA提取量的影响(2)DNA断裂(3)等质量的3种实验材料,在相同的保存温度下,从蒜黄提取的DNA量最多低温抑制了相关酶的活性,DNA降解速度慢(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合,静置一段时间,吸取上清液