1、重点实验课检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质配有演示视频见课件光盘一、实验原理检测物质鉴定试剂颜色反应还原糖斐林试剂砖红色脂肪苏丹(或苏丹)染液橘黄色(红色)蛋白质 双缩脲试剂紫色二、操作流程1还原糖的检测 组织样液中有可溶性还原糖2脂肪的检测方法一:花生种子匀浆3滴苏丹染液橘黄色。方法二: 制片 先在低倍镜下寻找到已着色的颗粒,再用高倍镜观察,花生子叶切片中有橘黄色颗粒 3蛋白质的检测 三、疑难点拨1斐林试剂与双缩脲试剂比较比较项目斐林试剂双缩脲试剂成分甲液乙液A液B液0.1 g/mL NaOH溶液0.05 g/mL CuSO4溶液0.1 g/mL NaOH溶液0.01 g/mL CuSO4
2、溶液反应原理含醛基的可溶性还原糖将Cu(OH)2还原为Cu2O沉淀具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2反应生成络合物添加顺序甲、乙两液等量混匀后立即使用先加入A液2 mL摇匀,再加34滴B液摇匀反应条件5065水浴加热不需加热反应现象样液浅蓝色棕色砖红色样液变紫色2.注意事项(1)三个实验中都不宜选取有颜色的材料,否则会干扰实验结果的颜色变化。(2)在还原糖、蛋白质的鉴定实验中,在加相应试剂鉴定之前,要留出一部分组织样液作为对照,以便与鉴定后的样液颜色作对比,增强实验的说服力。(3)在蛋白质的鉴定实验中,如果用蛋清稀释液作为实验材料,一定要稀释到一定程度,否则,与双缩脲试剂发生反
3、应后会粘在试管的内壁上,使反应不彻底,试管也不易洗刷干净。(4)在脂肪的鉴定中,实验用的花生种子需提前浸泡34 h,浸泡时间太短,不易切片;浸泡时间太长,则组织太软,切下的薄片不易成形。洗去浮色时不能用清水,因为染液易溶于有机溶剂、不溶于水。典例柿子成熟过程中,其贮藏物不断发生转化,柿子逐渐由苦涩变甘甜。图中两条曲线分别表示柿子成熟过程中两种物质含量的变化趋势。取已停止生长的青柿子和黄柿子果肉,分别加等量的蒸馏水制成提取液。然后在a、b试管中各加5 mL青柿子的提取液,在c、d试管中各加5 mL黄柿子的提取液。(1)在a、c试管中各加入等量碘液后,c试管呈蓝色,与c试管相比a试管的颜色_,两试
4、管中被检测的物质是_,图中能表示这种物质含量变化趋势的曲线是_。(2)为了检测上述物质转化成另一种物质导致果实变甜与成熟度的关系,某同学向b、d两试管中分别加入质量浓度为0.1 g/mL NaOH溶液1 mL摇匀,再加质量浓度为0.05 g/mL CuSO4溶液1 mL,水浴加热后比较两试管的颜色深浅就可知道成熟度与这两种物质转化的关系,你认为他的操作正确吗?_。为什么?_。(3)已知生长素含量增加能提高细胞内乙烯的含量。如果对青柿子喷洒一定浓度的生长素,则青柿子继续成熟时曲线将呈现出_趋势,曲线将呈现出_趋势。解析(1)柿子在成熟过程中由苦涩变甘甜与淀粉的转化有关,淀粉逐渐转化为具有甜味的还
5、原糖,因此,青柿子中淀粉含量高、还原糖含量少,黄柿子中淀粉含量少、还原糖含量高;曲线所示物质随时间变化含量逐渐减少,因此表示淀粉含量的变化,曲线表示还原糖含量的变化。(2)检测还原糖时,斐林试剂的甲液、乙液要等量混合均匀后,再加入待测溶液中,并要水浴加热。(3)根据题意可知,对青柿子喷洒一定浓度的生长素后,青柿子细胞内乙烯的含量将增加。乙烯促进果实成熟,因此淀粉的分解速度将加快,即曲线加速下降,相应地,还原糖的生成也将加快,即曲线加速上升。答案(1)较深淀粉(2)不正确试剂使用错误(或应将质量浓度为0.1 g/mL NaOH溶液和质量浓度为0.05 g/mL CuSO4溶液等量混合后,再滴入被
6、检测的溶液中)(3)加速下降加速上升一、本题创新角度分析本实验以果实成熟过程中物质含量变化为素材,考查淀粉和还原糖的检测。命题创新性的加入了物质含量变化曲线,增加了题目的难度和新颖度,但解题的知识和原理都在教材中,很好地体现了高考命题源于教材,又高于教材的原则。二、高考命题角度预测(1)若以血液为材料检测血浆中是否含有还原糖和蛋白质,对实验材料应如何处理?请分析原因。提示:对血液进行离心后取上清液(血清)进行检测。因血液为红色,会干扰实验结果。离心后去除血细胞,可排除干扰。(2)种子萌发过程中,蛋白质含量会发生变化。现有萌发两天和四天的大豆种子,请设计实验,探究大豆种子萌发时蛋白质含量是增加还
7、是减少。(简要说明原理即可)提示:在萌发两天和四天的大豆种子提取液中加入双缩脲试剂,据紫色深浅予以判断。1(2013长春模拟)鉴定可溶性还原糖、蛋白质、脂肪所用实验材料较合理的一组是()A韭菜叶、豆浆、大豆B梨、鸡蛋清、花生子叶C西瓜、花生子叶、大豆 D番茄、豆浆、花生子叶解析:选B韭菜、西瓜、番茄等材料都有颜色,不适于作为颜色反应实验的实验材料。2下列有关颜色反应实验的叙述,正确的是()A成熟番茄和成熟西瓜均含有较多的果糖和蔗糖等还原糖,但不适合用于还原糖的鉴定实验B利用花生的组织样液或组织切片进行脂肪鉴定实验时,需用显微镜才能观察到相应的颜色C蛋白质与双缩脲试剂作用,颜色变化为浅蓝色紫色,
8、该过程不需要水浴加热处理D还原糖鉴定实验中,应向组织样液中先加入斐林试剂甲液,后加入乙液解析:选C蔗糖为非还原糖;利用组织样液进行脂肪鉴定实验,不需要显微镜也能观察到相应的颜色;斐林试剂甲液和乙液应混合后同时加入待测样液中。3现提供可配制斐林试剂的溶液:甲液(0.1 g/mL NaOH溶液)、乙液(0.05 g/mL CuSO4溶液)、以及蒸馏水,如果充分利用上述试剂及必需的实验用具,可灵活性地鉴别出下列哪些物质()葡萄糖乳糖胃蛋白酶RNAA只有 B和C和 D、和解析:选C由于本题还提供了蒸馏水,因此0.05 g/mLCuSO4溶液可用蒸馏水稀释至0.01 g/mL,以作为双缩脲试剂的组成成分
9、。葡萄糖为还原糖,可用斐林试剂检测,胃蛋白酶的化学本质为蛋白质,可用双缩脲试剂检测。4(2012广东高考)分析下表,可推测()溶液双缩脲试剂碘液斐林试剂甲乙甲、乙混合注:“”显色,“”显色更深;“”不显色。A甲溶液含有淀汾 B乙溶液含有还原糖C混合溶液不含淀粉 D混合溶液含有淀粉酶解析:选D蛋白质能与双缩脲试剂发生紫色反应,淀粉遇碘变蓝色,斐林试剂与还原糖在水浴加热条件下生成砖红色沉淀。根据溶液甲中的颜色变化可知其含有蛋白质;根据乙溶液中的颜色变化可知其含有淀粉;甲、乙混合后,两溶液中的物质发生反应产生了还原糖,由此可知,甲溶液中含有淀粉酶,乙溶液中含有淀粉。5某学生对一待测物质进行如下实验,
10、假设实验步骤均正确,其进行的实验及观察到的现象如下表,则其可能鉴定的物质及试剂A是()实验1234检测试剂双缩脲试剂试剂A苏丹染液试剂B检测结果淡紫色无砖红色沉淀未观察到橘黄色蓝色A.鸡蛋清、斐林试剂 B鸡蛋清、碘液C劣质奶粉、碘液 D劣质奶粉、斐林试剂解析:选D鸡蛋清的主要成分是蛋白质,劣质奶粉中加入大量淀粉,蛋白质含量较低。6将小麦种子分别置于20和30培养箱中培养4天,依次取等量的萌发种子分别制成提取液和提取液。取3支试管甲、乙、丙,分别加入等量的淀粉液,然后按如图加入等量的提取液和蒸馏水,45水浴保温5分钟,立即在3支试管中加入等量斐林试剂并用5065的温水浴加热2分钟,摇匀观察试管中
11、的颜色。结果是()A甲呈蓝色,乙呈砖红色,丙呈无色B甲呈无色,乙呈砖红色,丙呈蓝色C甲、乙皆呈蓝色,丙呈砖红色D甲呈浅砖红色,乙呈砖红色,丙呈蓝色解析:选D萌发的小麦种子可产生淀粉酶,能将淀粉分解成可溶性还原糖,而在不同的温度条件下,产生酶的量是不同的,30时酶产生量远大于20时,因此在提取液中产生酶的量远大于提取液,由此产生的还原糖的量:乙甲丙,因此用斐林试剂鉴定甲呈浅砖红色,乙呈砖红色,丙呈蓝色Cu(OH)2的颜色。7(2013广州模拟)表格中是某同学探究不同材料中还原糖含量高低的实验。下列是对结果的分析,错误的是()试管1试管2试管3试管4苹果提取液2 mL雪梨提取液2 mL白菜提取液2
12、 mL蒸馏水2 mL斐林试剂1 mL1 mL1 mL1 mL水浴加热砖红色很深砖红色深砖红色较浅无砖红色A.苹果组织细胞中含还原糖较高B白菜叶肉细胞中也含有还原糖C试管4中溶液为无色D试管13中,溶液颜色渐变成砖红色解析:选C试管4中有斐林试剂,溶液颜色为蓝色或浅蓝色;斐林试剂与还原糖发生的颜色反应,颜色渐变过程为蓝色或浅蓝色棕色砖红色。8根据检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的实验,回答下列问题:(1)鉴定成熟苹果果肉中存在还原糖所用的试剂是_,该试剂与细胞内还原糖发生作用,形成_沉淀,常见的还原糖有_。(2)鉴定花生子叶中脂肪的实验中,能将脂肪染成橘黄色的是_染液,用其染色后,要用酒精冲洗
13、浮色,选用酒精的原因是_。(3)鉴定黄豆组织中存在蛋白质时,向组织样液中加入双缩脲试剂A液摇匀,再向组织样液中加入双缩脲试剂B液摇匀。其中双缩脲试剂B液的量只有34滴,而不能过量,为什么?_。(4)相关实验注意事项:斐林试剂极不稳定,其甲液和乙液需_,用时再临时混合均匀。双缩脲试剂的使用,应先加双缩脲试剂A液,造成_环境,再加双缩脲试剂B液即_。(填成分及其质量浓度)在可溶性还原糖的鉴定中,对试管中溶液加热时,试管底部不要触及_;试管口不要朝向_,以免溶液沸腾时冲出试管造成烫伤。解析:(1)还原糖具有还原性,它能将斐林试剂中的Cu2还原成Cu,生成砖红色的Cu2O沉淀,所以可用斐林试剂鉴定还原
14、糖的存在。常见的还原糖有葡萄糖、果糖和麦芽糖。(2)苏丹染液可将脂肪染成橘黄色,并能溶解在酒精中,根据这一性质可用酒精洗去浮色,便于观察。(3)双缩脲试剂鉴定蛋白质的原理是蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。若加入过量的双缩脲试剂B液即CuSO4溶液,CuSO4溶液本身呈蓝色,与双缩脲试剂A液反应产生的Cu(OH)2也呈蓝色,也掩盖生成的紫色,从而影响实验观察。(4)斐林试剂是由质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05 g/mL的CuSO4溶液配制而成的,放久了,就生成Cu(OH)2沉淀,所以斐林试剂极不稳定,实验之前要分别配制,用时再临时混合均匀。双缩脲试剂使用时要
15、先加双缩脲试剂A液再加双缩脲试剂B液,双缩脲试剂A液是质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液,先加双缩脲试剂A液的目的是营造一个碱性环境。在对试管中溶液进行水浴加热时,试管底部不要触及烧杯底部,以免温度过高;试管口不要朝向实验者,以免溶液沸腾时冲出试管造成烫伤。答案:(1)斐林试剂砖红色葡萄糖、果糖、麦芽糖(2)苏丹苏丹能溶解在酒精中(3)过量的双缩脲试剂B液会与双缩脲试剂A液反应,使溶液呈蓝色,掩盖生成的紫色(4)分别配制、储藏碱性0.01 g/mLCuSO4溶液烧杯底部实验者9(2013长沙模拟)洗衣粉是人们日常生活中的必备品,各种含酶制剂的洗衣粉因洗涤效果好而备受青睐。下面是两生物兴趣
16、小组的同学针对含酶制剂的洗衣粉所做的实验,请你分析回答相关问题:(1)甲组同学用含有不同种类酶制剂的洗衣粉进行了如表所示的实验,他们做该实验的目的是探究_。该实验还应控制的无关变量有_。该实验中_分别构成两组对照实验。组别布料大小污染物水温A(蛋白酶洗衣粉)55 cm蛋白质40B(脂肪酶洗衣粉)55 cm蛋白质40C(蛋白酶洗衣粉)55 cm淀粉40(2)乙组的同学为了探究蛋白酶洗衣粉中的蛋白酶的本质是蛋白质,用以下所给的条件进行了探究,请你帮他们完成下列实验。实验原理:蛋白质能与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。实验材料:质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液(双缩脲试剂A液)、质量浓度为
17、0.01 g/mL的CuSO4溶液(双缩脲试剂B液)、蛋白酶洗衣粉、普通洗衣粉、滴管、试管、蒸馏水等。实验步骤:取两支试管编号1、2;_;_;观察两支试管中的颜色变化。可能的现象及结论:_。解析:(1)该实验的自变量是洗衣粉所含有的酶与污染物成分之间的对应关系,因此可用来探究酶的专一性。洗衣粉的用量、污染物的含量、水质以及pH等都是无关变量。(2)本实验的目的是探究蛋白酶是否为蛋白质,加酶洗衣粉和普通洗衣粉的差异在于有没有蛋白酶,所以用双缩脲试剂对两种洗衣粉进行检测,如果含加酶洗衣粉的试管中出现紫色,而含普通洗衣粉的试管中未出现紫色,则说明蛋白酶为蛋白质,反之则不是。答案:(1)酶的专一性洗衣粉的用量、污染物的含量、水质、pH等A与B、A与C(2)实验步骤:分别向1号试管中加入2 mL蛋白酶洗衣粉溶液,向2号试管中加入2 mL普通洗衣粉溶液然后向两支试管中各加入1 mL质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液,振荡,再向两支试管中分别加入34滴质量浓度为0.01 g/mL的CuSO4溶液,振荡可能的现象及结论:1号试管中出现紫色,2号试管中未出现紫色,说明该蛋白酶洗衣粉中的蛋白酶的本质是蛋白质;1、2号试管中均未出现紫色,说明该蛋白酶洗衣粉中的蛋白酶的本质不是蛋白质