1、DNA 和蛋白质技术 单元测试 学校:_姓名：_班级：_考号：_ 一、单选题 1下表是关于 DNA 粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用，表述正确的是 试剂 操作 作用 A 柠檬酸钠溶液 与鸡血混合 防止染色质螺旋缠绕 B 蒸馏水 与鸡血细胞混合 保持细胞正常的形状 C 蒸馏水 加入溶解有 DNA 的 NaCl 中 析出 DNA 丝状物 D 冷却的酒精 过滤后的 DNA 加入其中 产生特定的颜色反应 A.A B.B C.C D.D【答案】C【解析】柠檬酸钠溶液是抗凝剂，与鸡血混合后可防止血液凝固，故 A 错误；第一次使用蒸馏水是让蒸馏水与鸡血细胞混合，作用是让血细胞吸水膨胀，加速血细胞
2、破裂，故B 错误；第二次使用蒸馏水是将蒸馏水加入到溶解有 DNA 的 2mol/L 的 NaCl 溶液中，作用是使 NaCl 溶液的浓度降低至 0.14 mol/L，此时 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度最小，从而使 DNA 析出，故 C 正确；DNA 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的 DNA，故 D 错误。22下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是 A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法 B.在洗脱过程中，大分子不能进入凝胶内部而最先流出，而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢，以致最后流出 C.凝胶内部有很微细的多
3、孔网状结构，其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系 D.一般情况下，凝胶对要分离的物质没有吸附作用，因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来【答案】C【解析】试题分析：凝胶内部有很微细的多孔网状结构，其孔隙大小决定了被分离的物质分子的运输路径，从而实现了物质的分离，C 错误。考点：本题考查于凝胶色谱法分离蛋白质的原理及操作。3下列利用菜花进行“DNA 的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是 A.采用不同浓度的 NaCl 溶液反复溶解与析出 DNA 的方法可去除部分杂质 B.在切碎的菜花中加入一定量的洗涤剂和食盐，充分研磨，过滤后弃去滤液 C.用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 0.14mol/
4、L，用单层滤纸过滤获取析出物 D.将白色丝状物溶解在 NaCl 溶液中，加人二苯胺试剂后震荡，观察颜色变化【答案】A【解析】DNA 在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度变化而改变的，利用该原理可以进行 DNA 的粗提取，A 正确；提取菜花的 DNA 时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液，B 错误；随着 NaCl 溶液浓度降低，DNA 析出，用多层纱布过滤，取纱布上 DNA 的黏稠物，C 错误；将白色丝状物溶解在 NaCl 溶液中，加人二苯胺试剂后沸水溶中加热 5min，观察颜色变化，D 错误。4标准的 PCR 过程一般分为变性、复性、延伸三大步
5、，这三大步需要的温度依次是（）A.92、50、72 B.72、50、92 C.50、92、72 D.80、50、72【答案】A【解析】标准的 PCR 过程一般分为变性、复性、延伸三大步，其中变性需要高温使 DNA解螺旋，故为 94；而复性是在较低温度下，两种引物和 DNA 单链相结合，故温度为55；延伸是在 DNA 聚合酶的作用下合成新的 DNA 链，温度应为 DNA 聚合酶的最适温度72；故选 A。【点睛】当温度上升到 90以上时，双链 DNA 解聚为单链，称之为变性；当温度下降到 50左右时，两种引物通过互补配对与两条单链 DNA 结合，称之为复性；当温度上升到 72时，溶液中的四种脱氧核
6、苷酸在 TaqDNA 聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的 DNA 链，称为延伸。5下列有关生物技术实践的叙述错误的是 A.制作腐乳时，料酒的量超过 50%时，腐乳成熟的时间将会缩短 B.发酵装置设置出料口便于取料及对发酵的情况进行及时的监测 C.采用不同浓度的 NaCl 溶液反复溶解与析出 DNA 的方法可去除部分杂质 D.用移液管稀释菌液时，要轻压橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀【答案】A【解析】制作腐乳时，料酒的量应为 12%左右，超过 50%时，腐乳成熟的时间将会延长，A 项错误；发酵装置设置出料口便于取料及对发酵的情况进行及时的监测，B 项正确；DNA 在 0.14mol
7、/L 的 NaCl 溶液中溶解度最大，而部分杂质在此浓度下溶解度较小，采用不同浓度的 NaCl 溶液反复溶解与析出DNA 的方法可去除部分杂质，C 项正确；用移液管稀释菌液时，轻压橡皮头，吹吸三次，可使菌液与水充分混匀，D 项正确。6下列有关生物技术实践应用的叙述，正确的是（）A固定化酶技术在多步连续催化反应方面优势明显 B与自然发酵相比，人工接种发酵获得的产品品质更好 C相同 pH 时，加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉 D向鸡血细胞中加入冷却的 95%的酒精，可以获得无杂质的 DNA【答案】B【解析】试题分析：固定化酶技术固定的是一种酶只能催化一种或一类反应，不能多步连续催化反应，A 错误；
8、人工接种发酵所用的菌种好于自然菌种，所以发酵获得的产品品质更好，B 正确；适宜 PH 条件下加酶洗衣粉洗涤效果才能好于普通洗衣粉，C 错误；向鸡血细胞中加入冷却的 95%的酒精，可以对 DNA 进行粗提纯，D 错误。考点：本题考查有关生物技术实践应用的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。7以下为形成 cDNA 过程和 PCR 扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是（）A.催化过程的酶是 RNA 聚合酶 B.过程发生的变化是引物与单链 DNA 结合 C.催化过程的酶都是 DNA 聚合酶，都能耐高温 D.如果 RNA 单链中 A 与 U
9、之和占该链碱基含量的 40%，则一个双链 DNA 中，A 与 U 之和也占该 DNA 碱基含量的 40%【答案】B【解析】图示中的表示以 RNA 为模板形成单链 DNA 的逆转录过程，因此催化过程的酶是逆转录酶，A 项错误；是 PCR 扩增过程中的复性过程，发生的变化是引物与互补的单链 DNA 结合，B 项正确；是以单链 DNA 为模板合成双链 DNA 的 DNA 分子复制过程，催化此过程的 DNA 聚合酶不耐高温，是 PCR 扩增过程中的延伸阶段，催化此过程的 DNA 聚合酶耐高温，C 项错误；依据碱基互补原则，如果 RNA 单链中 A与 U 之和占该链碱基含量的 40%，则以该 RNA 为
10、模板形成的单链 DNA 中，A 与 T 之和也占该 DNA 链碱基含量的 40%，在此基础上通过过程形成的一个双链 DNA 分子中 A与 T 之和也占该 DNA 分子的碱基含量的 40%，但 DNA 分子中不含碱基 U，D 项错误。【考点定位】DNA 复制与利用 PCR 技术扩增 DNA 的过程【名师点睛】本题以图文结合的形式，考查学生对 DNA 分子的复制过程及 PCR 扩增过程的理解和掌握情况。正确解答此题，需要理清脉络，建立知识网络；此外还需要与DNA 分子结构、逆转录过程等相关知识建立联系。在此基础上，能正确分析图示，并结合图中信息准确答题。8对下列实验操作与实验目的的分析，错误的是
11、A.提取绿叶中的色素时加入碳酸钙以防止色素被破坏 B.观察细胞中 DNA 和 RNA 分布用盐酸形成酸性环境 C.凝胶色谱法分离蛋白质加入缓冲液以维持 pH 稳定 D.萃取胡萝卜素采用水浴加热的方式以防止温度过高【答案】B【解析】碳酸钙以防止色素被破坏，A 正确。盐酸的作用是改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，B 错误。缓冲液可维持 PH 稳定，C 正确。水浴加热可防止温度过高，D 正确。【考点定位】实验的操作及目的 9在 DNA 的粗提取过程中，初步析出 DNA 和提取较纯净的 DNA 所用的药品分别是 01 g/ml 的柠檬酸钠溶液 200mol/L 的 NaCl 溶液 014 mol
12、/L 的 NaCl 溶液 体积分数为 95%的酒精溶液 A.B.C.D.【答案】D【解析】试题分析：DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度随 NaCl 溶液浓度的变化而变化，在NaCl 溶液的浓度为 014mol/L 时，DNA 的溶解度最低；DNA 不溶于酒精，而其它杂质能溶，在提取较纯的 DNA 时，用体积分数为 95的酒精溶液能得到更纯的 DNA。综上所述，供选答案组合，A、B、C 三项均错误，D 项正确。考点：本题考查了 DNA 的粗提取的相关知识，意在考查学生能识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。10如图表示细胞内 DNA 复制和细胞外 PCR 扩增两个过程,两反应过
13、程的条件中相同的是（）A.模板 B.原料 C.酶 D.能量供应【答案】B【解析】本题主要考查细胞内 DNA 复制和细胞外 PCR 扩增的知识,意在考查考生对细胞内外 DNA 复制条件的理解。选项 A 模板不同,胞内 DNA 复制以整个 DNA 分子作为模板,PCR扩增却以一段目的 DNA 作为模板。选项 B 原料相同,均以 4 种脱氧核苷酸为原料。选项C 酶不相同,胞内 DNA 解旋需要解旋酶,延伸需要 DNA 聚合酶等;胞外 PCR 扩增通过高温解旋而不需要解旋酶,延伸只需热稳定的 Taq 酶。选项 D 能量供应不同,胞内 DNA 复制过程由 ATP 提供能量,而 PCR 扩增主要由外界供能
14、。11下列关于科学家探究“DNA 是遗传物质”实验的叙述，正确的是()A用含35S 标记的噬菌体侵染未标记的细菌，子代噬菌体中也有35S 标记 B分别给两组小鼠注射 R 型活细菌、加热杀死的 S 型细菌，小鼠均不死亡 C用含32P 标记的噬菌体侵染未标记的细菌，离心后上清液中具有较强的放射性 D艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验，赫尔希与蔡斯的噬菌体侵染细菌实验的技术相同【答案】B【解析】35S 标记的是噬菌体的蛋白质外壳，噬菌体侵染细菌时，蛋白质外壳未进入细菌，而且合成子代噬菌体所需的原料均由细菌提供，所以子代噬菌体中不含35S，A 错误；R 型活细菌没有毒性，将其注射到小鼠体内，小鼠存活，加热
15、会导致 S 型细菌的蛋白质变性，使其失去侵染能力，再将其注射进小鼠体内，小鼠不死亡，B 正确；32P 标记的是噬菌体的 DNA，噬菌体侵染细菌时，DNA 进入细菌并随细菌离心到沉淀物中，所以沉淀物中具有较强的放射性，C 错误；艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验没有用到同位素示踪技术，而赫尔希与蔡斯的噬菌体侵染细菌实验用到了该技术，D 错误。12下列试剂可用于血红蛋白释放的是 0.9%的生理盐水 甲苯 磷酸缓冲液 蒸馏水 梓檬酸钠 A.B.C.D.【答案】D【解析】0.9%的生理盐水是洗涤红细胞是应用的试剂，不能用于血红蛋白释放，错误；甲苯的作用是溶解细胞膜的磷脂，加速血红蛋白的释放，正确；磷酸缓冲
16、液用于粗分离蛋白质，不能用于释放血红蛋白，错误；蒸馏水作用是使红细胞吸水胀破，释放其中的血红蛋白，正确；柠檬酸钠的作用是采血时，防止血液凝固，不能用于血红蛋白的释放，错误。故选 D。【考点定位】蛋白质的提取和分离 【名师点睛】在蒸馏水和甲苯作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白。加入蒸馏水后红细胞液体积与原血液体积要相同。加入甲苯的目的是溶解细胞膜，有利于血红蛋白的释放和分离。13下列有关提取和分离血红蛋白实验的叙述，错误的是 A.该实验的材料必须选用鸡血 B.通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质，此为样品的粗提取 C.凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质 D.电泳法是利用
17、各种分子带电性质的差异及分子的大小差异分离蛋白质【答案】A【解析】本题考查血红蛋白的提取与分离实验的相关知识。因为鸡血细胞中含有细胞核以及各种复杂的细胞器，会给提取和分离血红蛋白带来一定的难度，故提取血红蛋白一般选用哺乳动物成熟的红细胞，A 错误；通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质，而将大分子保留在袋内，此为样品的粗提取，B 正确；凝胶色谱法是根据需要被分离的蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来进行分离，C 正确；电泳法是利用待分离样品中各种分子带电性质的差异及分子本身大小、形状的不同产生不同的迁移速度，由此将各种分子分离，D 正确。14下列操作中，对
18、DNA 的提取量影响较小的是（）A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出 DNA 等核物质 B.搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动 C.在析出 DNA 黏稠物时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中黏稠物不再增多 D.在用酒精析出 DNA 时，要使用冷酒精，甚至可将混合液放入冰箱中冷却【答案】B【解析】使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，可以增加 DNA 提取量，对 DNA 的提取量影响较大；搅拌时，用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动，可以防止 DNA 断裂，但对 DNA提取量影响较小；DNA 在 0.14mol/L 的氯化钠溶液中溶解度最低，在析出 DNA 黏稠物时，要缓缓加蒸馏水，防止氯化钠溶液浓度过低，导致 D
19、NA 的再溶解，对 DNA 的提取量影响较大；DNA 在冷酒精中溶解度较低，在用酒精析出 DNA 时，使用冷酒精，甚至将混合液放入冰箱中冷却，可以增加 DNA 提取量。选 B。【点睛】DNA 与蛋白质在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同：溶解规律 2 mol/L NaCl 溶液 0.14 mol/L NaCl 溶液 DNA 溶解 析出 蛋白质 NaCl 溶液物质的量浓度从 2 mol/L 逐渐降低的过程中，溶解度逐渐增大 部分发生盐析沉淀 溶解 15（2019江苏卷）图 1、2 分别为“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中部分操作步骤示意图，下列叙述正确的是 A.图 1、2 中加入蒸馏水稀释的
20、目的相同 B.图 1 中完成过滤之后保留滤液 C.图 2 中完成过滤之后弃去滤液 D.在图 1 鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质【答案】BCD【解析】图 1、2 中加入蒸馏水稀释的目的不同，前者是使细胞吸水涨破，后者是降低氯化钠溶液的浓度，使 DNA 沉淀析出，A 项错误；图 1 中完成过滤之后获取的是含 DNA的滤液，所以要保留滤液，B 项正确；图 2 中加蒸馏水是使 NaCl 溶液的浓度降低，DNA逐渐析出，所以完成过滤之后 DNA 存在于沉淀物中，应弃去滤液，C 项正确；在图 1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉，其中的木瓜蛋白酶能分解 DNA 中的杂质蛋白，从而有助于去除杂质，D 项正
21、确。16镰刀型细胞贫血症是一种由基因突变引起的遗传病，患者的红细胞是弯曲的镰刀状。这样的红细胞容易破裂，使人患溶血性贫血，严重时会导致死亡。某科学兴趣小组计划从血红蛋白的成分是否变化来开展研究性学习。下列是该小组成员获得纯度很高的血红蛋白的实验过程，不正确的一项是 A.对红细胞进行洗涤，在加入蒸馏水和甲苯使红细胞破裂释放出血红蛋白后，将混合液静置一段时间后分层获得血红蛋白溶液 B.将血红蛋白溶液装入透析袋中透析，可达到粗分离的目的 C.利用凝胶色谱操作对血红蛋白进行纯化 D.使用 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定，以获得纯度很高的血红蛋白【答案】A【解析】对样品进行处理时，应先通过低速短
22、时间离心的方法对红细胞进行洗涤，再加入蒸馏水和甲苯使红细胞破裂释放出血红蛋白后，将混合液置于离心管中，以 2 000 r/min 的转速离心 10 min 后分层获得血红蛋白溶液，A 项错误；将血红蛋白溶液装入透析袋中，再将透析袋放入盛有 300mL 的物质的量浓度为 20mmol/L 的磷酸缓冲液中（pH为 7.0），透析 12h，可达到粗分离的目的，B 项正确；可利用凝胶色谱操作对血红蛋白进行纯化，C 项正确；使用 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定，以获得纯度很高的血红蛋白，D 项正确。17下列关于 DNA 粗提取与鉴定的说法正确的是（）A洗涤剂能瓦解细胞膜，同时也能控制 DNA 在
23、 NaCl 溶液中的溶解度 B在探究洗涤剂对植物细胞 DNA 提取的影响实验中，需控制的变量是洗涤剂和植物细胞 C常温下，DNA 遇二苯胺被染成蓝色 D将滤液放在 6075的恒温水浴箱中保温 1015 分钟能去除滤液中的部分杂质，其原理是利用了 DNA 和蛋白质对高温耐受性的不同【答案】D【解析】试题分析：A、洗涤剂能瓦解细胞膜，但不能控制 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度，A 错误；B、在探究洗涤剂对植物细胞 DNA 提取的影响实验中，需控制的变量是洗涤剂，植物细胞是无关变量，B 错误；C、沸水浴条件下，DNA 遇二苯胺被染成蓝色，C 错误；D、将滤液放在 6075的恒温水浴箱中保温 1
24、015分钟能去除滤液中的部分杂质，其原理是利用了 DNA 和蛋白质对高温耐受性的不同，D 正确。考点：本题主要考查考查 DNA 的粗提取和提纯相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。18下列对生物技术及应用的有关叙述，正确的是 A果胶酶和纤维素酶都不是单纯的一种酶，而是一类酶 B植物组织培养时需要对外植体和接种器材进行灭菌处理 C用 PCR 技术扩增 DNA 时需要在 72以上的温度条件下进行 DDNA 在常温下遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可用于鉴定 DNA【答案】A【解析】试题分析：果胶酶和纤维素酶都不是单纯的一种酶，而是一类酶，A 正确；植物组织培养时需
25、要对外植体和接种器材进行消毒处理，B 错误；用 PCR 技术扩增 DNA 时需要在55以上的温度条件下进行，C 错误；DNA 在水浴条件下遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可用于鉴定 DNA，D 错误。考点：本题考查生物技术的应用。19图 1、2 分别为“DNA 的粗提取与鉴定实验中部分操作步骤示意图,下列叙述不正确的是（）A.图 2 中加入蒸馏水的目的是增大 DNA 的溶解度 B.图 1 中完成过滤之后保留滤液 C.图 2 中完成过滤之后弃去滤液 D.在图 1 鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质【答案】A【解析】试题分析：DNA 在 0.14mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最小，图
26、 2 中加入蒸馏水的目的是降低 DNA 的溶解度，A 错误；图 1 中完成过滤之后保留滤液，因为滤液中含有要提取的DNA，B 正确；图 2 中完成过滤之后弃去滤液，因为粗 DNA 附着在玻璃棒上，C 正确；在图 1 鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质，因为嫩肉粉中含蛋白酶能分解蛋白质，D 正确。考点：本题考查“DNA 的粗提取和鉴定”实验，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。20生物组织中有机物的提取方法有多种，如电泳、压榨、萃取等，不同的有机物提取方法各不相同。下列有关的说法中不正确的是（）A香料工业中“液体黄金”玫瑰油的提取中要求不含有任何添加
27、剂或化学原料，其提取方法主要是水蒸气蒸馏 B杏仁油富含矿物质和维生素，主要通过压榨法提取 C用萃取法提取胡萝卜素，萃取的效率只受萃取剂的性质和使用量的影响 D为了纯化提取的 DNA，往 DNA 滤掖中加入嫩肉粉，其目的是木瓜蛋白酶能够分解蛋白质【答案】C【解析】试题分析：玫瑰油的提取中要求不含有任何添加剂或化学原料，所以其提取方法主要是水蒸气蒸馏，A 项正确；杏仁油存在于杏仁里面，可以用机械压力直接榨出，所以通常采用压榨法提取，B 项正确；用萃取法提取胡萝卜素，萃取的效率主要取决于受萃取剂的性质和使用量，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响，C 项错误；嫩肉
28、粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质，所以可以直接在 DNA滤液中加入嫩肉粉，以达到纯化提取的 DNA 的目的，D 项正确。考点：本题考查生物组织中有机物的提取方法的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。21下列操作正确的是 A.分离红细胞时采用低速长时间离心 B.红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可 C.分离血红蛋白溶液是低速短时间离心 D.透析时要用 20 mmol/L 的磷酸缓冲液，透析 12 h【答案】D【解析】试题分析：分离红细胞时采用低速短时间离心，A 错误；红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水和甲苯，B 错误；分离血红蛋白溶液是快
29、速短时间离心，C 错误；透析时要用 20mmol/L 的磷酸缓冲液，透析 12h，D 正确。考点：本题考查蛋白质分离的相关操作。22下列有关 DNA 粗提取与鉴定的叙述，正确的是（）A.用菜花替代鸡血作为实验材料进行“DNA 的粗提取与鉴定”，其实验操作步骤相同 B.用不同浓度 NaCl 溶液反复溶解与析出 DNA 可去除蛋白质 C.利用鸡血进行“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中，将丝状物溶解在 2 mol/L NaCl 溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色 D.用洋葱进行 DNA 粗提取和鉴定实验，加入洗涤剂后需用力进行快速、充分的研磨【答案】B【解析】试题分析：菜花需要瓦解细胞膜，而动物细胞不需
30、要，故 A 错误。DNA 在氯化钠溶液中的溶解度不同，在 0.14mol/L 时溶解度最低可以析出 DNA，可以利用此特点除去蛋白质，故 B 正确。二苯胺加入后需要加热，故 C 错误。加入洗涤剂后要轻缓，故 D 错误。考点：本题考查 DNA 的粗提取与鉴定相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。23下列有关 PCR 技术的说法不正确的是 APCR 技术需要特殊的 DNA 解旋酶 BPCR 技术体外复制 DNA 以指数形式扩增 CPCR 技术的原理与 DNA 复制的原理相同 DPCR 技术的前提是有一段已知目的基因的核苷酸序列【答案】A【解析】试题分析：PCR 过程不需要解旋酶的参与，
31、而是通过加热来实现 DNA 解旋的。A 错误。考点：本题主要考查 PCR 的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间内在联系的能力。24下列关于 PCR 技术的叙述，错误的是 A.引物必须不断的加进每一次的扩增当中 B.所用的原料有 dATP、dCTP、dGTP、dTTP C.需要提供热稳定的 DNA 聚合酶和 DNA 连接酶 D.DNA 高温变性的原理与蛋白质高温变性的原理不同【答案】C【解析】PCR 技术需要两种不同的引物，必须不断的加进每一次的扩增当中，A 正确；PCR 技术的实质是 DNA 的复制，原料是四种脱氧核苷酸，即所用的原料有 dATP、dCTP、dGTP、dTTP，
32、B 正确；PCR 技术需要热稳定的 DNA 聚合酶，但是不需要 DNA 连接酶，C错误；DNA 高温变性的原理与蛋白质高温变性的原理不同，D 正确。25下列有关生物工程与技术的叙述不正确的是 APCR 技术可用于目的基因的获取 B选择单核居中期向单核靠边期过渡的花粉进行离体培养成功率高 C在以尿素为唯一碳源的培养基上长出的菌落一定是尿素分解菌 D“三北防护林”建设中，应遵循协调与平衡原理和物种多样性原理【答案】C【解析】试题分析：PCR 可以用于外源目的基因的大量扩增，故 A 正确。在花粉选择进行离体培养时应选择单核靠边期的成功率高，故 B 正确。在以尿素为唯一碳源的培养基上长出的菌落有可能是
33、尿素分解菌也有可能是以氮气为主的细菌，还要加入酚红指示剂进行鉴别，故 C 错误。“三北防护林”建设中，应遵循协调与平衡和物种多样性原理，故 D 正确。考点：本题考查现代生物技术相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。二、非选择题 26（1）“闻着臭，吃着香”的臭豆腐驰名中外，其制作过程中所用的微生物主要是_，臭豆腐表面往往有一层致密的皮，这层皮实际上是微生物的_，它对人体是无害的。（2）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入_制成选择培养基进行分离；若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是_。（3）Taq 细菌 1966 年被发现于美国黄石国
34、家公园，它的发现促成了 PCR 技术的自动化，这是因为它为 PCR 技术提供了_，这说明在寻找目的菌时要根据它对生存环境的要求去寻找，实验室中微生物的筛选，也应用了同样的原理，即人为提供目的菌生长的条件，实验室培养微生物的培养基一般都含_(至少答出 3 种）等主要营养物质。（4）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是_，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是_。【答案】毛霉 菌丝 有机磷农药 稀释涂布平板法 耐高温的 DNA 聚合酶 水、碳源、氮源及无机盐 防止外来杂菌的污染(无菌技术）干热灭菌法【解析】【试题分析】本题考查了腐乳的制备、PCR 技术、微生物的分离和培养、无菌技术等方面的知识，考生
35、要识记腐乳制备的原理；明确稀释涂布平板法可用于微生物的计数；明确 PCR 技术中 DNA 聚合酶的来源等相关知识点，然后根据题目所涉及的内容回忆课本知识，对各小题进行分析作答。（1）臭豆腐制作过程中所用的微生物主要是毛霉；臭豆腐表面有一层致密的皮，实际上是毛霉的白色菌丝，包括直立菌丝和匍匐菌丝。（2）可利用选择培养基的功能筛选能高效降解有机磷农药的细菌，即在培养基中加入有机磷农药；稀释涂布平板法对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数 利用选择培养基的功能筛选，加入有机磷农药；常用稀释涂布平板法对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数。（3）PCR 技术的原理是 DNA 复制，过程可以分为高温变性（D
36、NA 解链）、低温复性（引物结合到互补 DNA 链）、中温延伸（Taq 酶从引物起始进行互补链的合成）三步。Taq细菌为 PCR 技术提供了耐高温的 DNA聚合酶；实验室培养微生物的培养基一般都含水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）及无机盐等主要营养物质。（4）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的污染(无菌技术）；对培养皿等玻璃器皿进行灭菌常用的方法是干热灭菌法，也就是将培养皿放入干热灭菌箱内，在 160170加热 12h 可达到灭菌的目的。27红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的。我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来
37、提取和分离血红蛋白,请回答下列有关问题:(1)分离蛋白质分子的一种常用方法是凝胶色谱法,也叫做 ,是根据 分离蛋白质的有效方法。(2)血红蛋白提取和分离的程序可分为 、和纯度鉴定。(3)洗涤红细胞的目的是 ,以利于后续步骤的分离强化。采集的血样要及时分离红细胞,分离时采用低速短时间 ,然后用胶头吸管吸出上层透明的 ,将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯,再加入 洗涤,如此重复,直至上清液中没有黄色。(4)将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加入 和 充分搅拌,红细胞破裂,释放出血红蛋白。【答案】(1)分配色谱法 相对分子质量(2)样品处理 粗分离 纯化(3)去除杂蛋白 离心 黄色血浆 五倍体积的生理盐水(
38、4)蒸馏水 40%体积的甲苯【解析】(1)凝胶色谱法也叫分配色谱法,其依据是相对分子质量的大小;(2)血红蛋白提取和分离的步骤为:样品处理、粗分离(透析)、纯化和纯度鉴定;(3)红细胞洗涤目的是去除杂蛋白,以利于后续步骤的分离纯化;洗涤红细胞是采用低速短时间离心;(4)血红蛋白的释放时要加入蒸馏水和甲苯,分离血红蛋白是采用高速长时间离心的方法。28在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，DNA 鉴定通常选用的试剂是 ，将DNA 与该试剂混合后，经沸水浴处理，呈现 色反应，则表明提取物中含有 DNA。【答案】二苯胺 蓝【解析】29生物选修 1：生物技术实践如图是“DNA 粗提取与鉴定”相关实验步骤，
39、请据图分析回答：（1）鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料，这是因为_，从鸡血细胞中释放出核物质的处理方法是向鸡血中加入_，并_。如果选用植物细胞，需要选用洗涤剂_。（2）图 a 表示释放核物质后进行过滤的过程，过滤后取_进行下一步实验。（3）图 b 表示的相关操作过程中，加入 2mol/LNaCl 溶液的作用是_。（4）图 c 表示在滤液中加入冷却的_，进一步提取含杂质更少的 DNA。（5）实验室提取高纯度的 DNA 时，通常采用_、SDS、吐温等化学试剂。【答案】（1）鸡血细胞易吸水胀破，核 DNA 含量丰富 蒸馏水 揽拌 溶解细胞膜（2）滤液（1 分）（3）溶解 DNA 分子（4）95%的
40、酒精 （5）CTAB（十六烷基三甲基溴化胺）【解析】（1）根据 DNA 粗提取实验中材料选择的原则，鸡血细胞核的 DNA 含量丰富,材料易得（以及鸣血细胞极易吸水胀破），因此鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料。要从鸡血细胞中释放出核物质，需要向鸡血细胞中加入蒸馏水,让红细胞吸水胀破，并搅拌加速红细胞的破裂。如果选用植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜。（2）图 a 表示释放核物质后进行过滤的过程，此时 DNA 溶解在氯化钠溶液中，因此过滤后取滤液进行下一步实验。（3）（3）图 b 表示的相关操作过程中，加人 2 mol/LNaCl 溶液的作用是溶解 DNA 分子。图 c 表示在滤液中加人冷却的
41、95%的酒精，由于 DNA 不溶于酒精，而其他杂质可以溶于酒精，因此可以提取含杂质更少的 DNA（或去除脂溶性杂质）。（5）实验室提取高纯度的 DNA 时，通常釆用 CTAB、SDS、吐温等化学试剂。【考点定位】DNA 粗提取与鉴定实验【名师点睛】DNA 的粗提取与鉴定的实验原理：提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于 DNA 的粗提取而言，就是要利用 DNA 与 RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取 DNA，去除其他成分。1、DNA 的溶解性（1）DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同（01
42、4mol/L 溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使 DNA 充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（2）DNA 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将 DNA 与蛋白质进一步的分离。2、DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质，但是对 DNA 没有影响。大多数蛋白质不能忍受 6080的高温，而 DNA 在 80以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对 DNA 没有影响。3、DNA 的鉴定 在沸水浴条件下，DNA 遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂。30通过基因工程研制的某新型基因治疗药物，其本质是
43、利用腺病毒和人 P53 基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的 P53 蛋白可对癌变前的 DNA 损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。该药物的载体采用第一代人 5 型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不会污染。请回答下列问题：（1）在该药物的生产中，为了获得更高的安全性能，在载体一般应具备的条件中，科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的_（在“能自我复制”“有多个限制性酶切位点”“在宿主细胞中能稳定保存”中选答）。检测 P53 基因基因是否插入到染色体上，可从分子水
44、平上检测，方法是_。（2）如果要获取人类基因组中抑癌基因 P53，可以采取的方法通常包括_和人工方法合成。目的基因的大量扩增则可以采用_技术，该技术中需使用一种特殊的酶是_。（3）如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎干细胞可来源于_的内细胞团，或胎儿的原始性腺，也可以通过_技术得到重组细胞后再进行相应处理获得。在培养液中加入_，如牛黄酸等化学物质时就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段。【答案】能自我复制 DNA 分子杂交技术 从基因文库获取 PCR 热稳定 DNA 聚合酶 囊胚 核移植 分化诱导因子【解析】试题分析：本题考查了基因工程的
45、应用和胚胎干细胞的相关知识，意在考查考生的识记并理解所学知识，把握知识间内在联系的能力。基因工程中获得目的基因的方法有三种：从基因文库中获取 利用 PCR 技术扩增 人工合成，其中利用 PCR 技术扩增相当于 DNA 分子在体外进行复制，其数量是呈指数增长的。载体具备的条件：能在受体细胞中复制并稳定保存，具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入，具有标记基因，供重组 DNA 的鉴定和选择。（1）据题意可知，载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不能污染。故在载体一般应具备的条件中，科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的自我复制功能。检测 P53 基因的表达产物，可从分子水平上检测，采用 DNA 分子杂交技术。（2）如果要获取人类基因组中抑癌基因 P53，可以采取的方法通常包括从从基因文库获取和通过化学方法人工合成。目的基因的大量扩增则可以采用 PCR 技术，该技术中因需要高温处理，故需使用的一种特殊的酶是热稳定 DNA 聚合酶。（3）在研究中如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎干细胞可来源于囊胚期的内细胞团，或胎儿的原始性腺，也可以通过核移植技术得到重组细胞后再进行相应处理获得。在培养液中加入分化诱导因子，可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化。
