1、考纲内容1植物细胞工程2动物细胞工程命题规律1植物组织培养与植物体细胞杂交2植物细胞工程的应用3动物细胞培养4动物克隆5动物细胞融合与单克隆抗体制备命题趋势主要考查植物组织培养和植物体细胞杂交以及单克隆抗体的制备过程。常以医学实践应用和农业生产应用为背景考查。知识梳理想一想一、植物细胞工程1原理：细胞的全能性。(1)原因：生物的任何一个细胞都包含本物种的_。(2)全能性表达的条件：处于_状态，提供一定的营养、_和其他适宜外界条件。2植物组织培养过程离体的器官、组织或细胞 脱分化形成_ 再分化幼根和芽完整植株。离体全部遗传信息激素愈伤组织3植物体细胞杂交技术(1)过程为去除_获得具有活力的原生质
2、体，常用方法是酶解法，所用到的酶是_。(2)过程是原生质体间的融合。人工诱导融合的方法有物理法和化学法。物理法包括_、振动、_等；化学法一般用_作为诱导剂来诱导细胞融合。(3)过程是原生质体融合后再生出细胞壁，这是原生质体融合成功的标志。(4)意义：克服远缘杂交不亲和的障碍。植物细胞壁纤维素酶和果胶酶离心电激聚乙二醇(PEG)二、动物细胞培养1过程2原理：_。胰蛋白原代传代遗传物质细胞增殖3条件(1)无菌、无毒的环境：培养液应进行_处理。(2)营养(合成培养基成分)：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素，通常需加入_、血浆等。(3)温度：适宜温度 36.50.5；pH 为_。(4)气体环境
3、：空气 95%，_5%。无菌血清7.27.4CO2三、动物体细胞核移植技术和克隆动物1核移植过程(以高产奶牛克隆为例)2原理：_。去核细胞融合胚胎移植动物细胞核具有全能性四、动物细胞融合与单克隆技术1动物细胞融合(1)概念：指两个或多个动物细胞结合形成_的过程。(2)融合方法：物理法(离心、振动、电激)、化学法和_。一个细胞灭活病毒2单克隆技术(1)单克隆抗体的制备：(2)杂交瘤细胞特点：既能大量_，又能产生_。(3)单克隆抗体的优点_、_、产量大。B 淋巴细胞繁殖专一的抗体特异性强灵敏度高能力排查试一试一、理解能力1判断下列有关植物细胞工程叙述的正误。(1)棉花根尖细胞经诱导形成幼苗能体现细
4、胞的全能性()(2)二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株()(3)理论上，每个正常活细胞都具有全能性()(4)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性()(5)原生质体融合的原理是细胞膜的流动性()(6)在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞()(7)再生出细胞壁是原生质体融合成功的标志()2判断下列有关动物细胞培养叙述的正误。(1)动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育()(2)传代培养的细胞失去接触抑制现象()(3)原代培养和传代培养都需要用胰蛋白酶处理()(4)连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型()3判断下列有关动物体细胞核移植叙述的正误
5、。(1)动物细胞核移植的受体细胞是卵细胞()(2)克隆动物的性状与供体动物完全相同()4判断有关单克隆抗体制备叙述的正误。(1)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体能体现细胞全能性()(2)体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体()(3)单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点()(4)杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生专一性抗体()(5)制备单克隆抗体过程要经过两次筛选()二、识图析图 下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。(1)细胞是什么细胞？(2)过程促进效应B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的方法有哪些？答案(1)已免疫过的效应 B 淋巴细胞。(2)物理法、化学法、灭活的病毒。考点突破考点一植物细
6、胞工程核心知识1细胞全能性(1)原理：细胞含有本物种全部的遗传信息。(2)体内细胞全能性不表达的原因：基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果。(3)细胞全能性表达的条件：完整细胞核；离体；无菌；一定的营养、激素；适宜的外界条件。(4)细胞全能性大小与细胞分化程度成反比。(5)全能性大小：植物细胞：受精卵生殖细胞体细胞动物细胞：受精卵生殖细胞胚胎干细胞体细胞核(动物细胞全能性受限制，但细胞核具有全能性)2植物组织培养与植物体细胞杂交3.人工种子(1)制作方法：人工种子是利用植物组织培养获得胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等，然后包上人工种皮就形成了人工种子，如图。(2)优点：可使在自然条件下不结
7、实或种子昂贵的植物得以繁殖；因该过程为无性繁殖。所以可保持亲本的优良性状，节约粮食，减少种子的使用；可以控制添加一些物质，如除草剂、农药、促进生长的激素、有益菌等。易误警示易误点 1 具有全能性体现(实现)全能性(1)具有全能性：理论上，活细胞都具有全能性。(2)体现全能性：只有发育成完整个体，才能说明实现了细胞的全能性。易误点 2 细胞全能性的大小比较植物细胞：受精卵生殖细胞体细胞动物细胞：受精卵生殖细胞胚胎干细胞体细胞核(动物体细胞全能性受限制，但细胞核的全能性能表现出来)易误点 3 对植物体细胞杂交和有性杂交辨析不清(1)植物体细胞杂交：若两个不同品种的植物细胞 A、B 进行融合，A 含
8、有 2X 条染色体，2 个染色体组，基因型为 Aabb，B 含有 2Y 条染色体，2 个染色体组，其基因型为 ccDd，则新植株应为四倍体，其体细胞中染色体数为 2X2Y，基因型为 AabbccDd，从中不难看出，体细胞杂交即两个细胞融合成一个细胞，不管是染色体数、基因型还是染色体组都采用直接相加的方法。(2)植物有性杂交：有性杂交的子代细胞中染色体数、基因型分别为“XY”、“AbcD”或“abcD”或“Abcd”或“abcd”，即先减半再相加。跟踪演练1(2016衡阳一中期中)甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分 A，乙含有效成分 B。某研究小组拟培育同时含有 A 和 B
9、 的新型药用植物。回答下列问题：(1)为了培育该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用_酶和_酶去除细胞壁，获得具有活力的_，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成_组织，然 后 经 过 _ 形 成 完 整 的 杂 种 植 株。这 种 培 育 技 术 称 为_。(2)上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指_。(3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的_等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。纤维素果胶原生质体愈伤再分化植物体细胞杂交技术体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体胚状体、不定芽、顶芽、腋芽【解析】(1)植物体细胞隔合，先用纤维素酶和果胶酶处
10、理，除去细胞壁，获得原生质体，再用化学诱导剂聚乙二醇诱导融合形成杂种细胞，进一步培养形成愈伤组织，经过再分化形成根、芽，长成完整植株，以上获得杂种植株的方法叫植物体细胞杂交，能克服远缘杂交不亲和的障碍；(2)由受精卵发育而来，体细胞含有三个或三个以上的染色体组的个体叫多倍体；(3)人工种子生产不受气候、季节和地域等因素限制，而且可以避免后代不发生性状分离等优点，因此，植物细胞工程重要的应用之一是制备人工种子，用到的核心技术是植物组织培养技术；将植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽、腋芽等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。2.(2016宁夏月考)A、B 是染色体数目相同的两种二倍体生物，看图
11、填写有关细胞工程的内容：(1)若该过程是制备单克隆抗体，A 为小鼠效应 B 淋巴细胞，那么，图 中D称 为 _ 细 胞。若 筛 选 成 功 则D细 胞 有_的特点。(2)动物细胞培养时除需要适宜的温度、营养、无菌、无毒等环境条件以外，还要向培养液中通入氧气和二氧化碳。若要保证无菌环境可 采 取 的 方 法 是 _ 和_。(3)若 A、B 是植物细胞，在细胞融合之前已用_处理获得原生质体；则形成的 D 细胞还要应用_技术把 D 培养成植株。杂交瘤无限增殖，且能产生特定抗体在培养液中加入一定量的抗生素定期更换培养液、维持培养液的 pH纤维素酶和果胶酶植物组织培养(4)上述杂种植株属于_倍体。假设
12、A 与 B 有性杂交的后代是 不 育 的，而 上 述 杂 种 植 株 是 可 育 的，造 成 不 育 的 原 因 是_。此项技术的重要意义在于_。这种杂交植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖，方法是经植物组织培养得到的_等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。四减数分裂时染色体联会紊乱，无法产生正常配子克服远缘杂交不亲和的障碍胚状体、不定芽、顶芽、腋芽【解析】(1)若该过程是制备单克隆抗体，A 为小鼠效应 B 淋巴细胞，那么，图中 D 是效应 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞，具有无限增殖、且能产生特定抗体的特点。(2)动物细胞培养时，若要保证无菌环境可采取的方法是在培养液中加入一
13、定量的抗生素和定期更换培养液、维持培养液的 pH。(3)若 A、B 是植物细胞，应先用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体后，再诱导原生质体的融合，形成的杂种细胞还需应用植物组织培养技术才能培养成杂种植株。(4)上述杂种植株属于四倍体。假设 A 与 B 有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成不育的原因是减数分裂时染色体联会紊乱，无法产生正常配子。此项技术的重要意义在于克服远缘杂交不亲和的障碍。这种杂交植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖，方法是经植物组织培养得到的胚状体等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。【解题技巧】1新细胞壁的生成是原生质体融合完成的标志。2植物体细胞杂交的终点
14、是培育杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。考点二 植物组织培养、动物细胞培养和细胞核移植核心知识1三者比较项目植物组织培养动物细胞培养动物体细胞核移植原理植物细胞的全能性细胞增殖动物细胞核的全能性关键环节细胞的脱分化和再分化细胞增殖和癌变细胞核融合、细胞分化结果与外植体相同的个体相同分化程度的细胞群获得克隆动物应用植株快速繁殖脱毒作物苗的培养人工种子细胞产物工厂化生产转基因植物的培育生产生物制品医学研究检测有毒物质加速良种繁育保护濒危物种生产医用蛋白作为异种移植的供体用于组织器官的移植2.动物细胞核移植的疑难解析(1)卵母细胞选择时期及原因：M中期的卵母细胞，此时具备受精能力，细胞质中合成与分
15、裂、分化有关的物质能刺激融合后重组细胞进行分裂分化，形成重组胚胎。(2)选卵细胞作为受体细胞的原因。卵细胞大，易于操作。卵黄多，营养丰富，为发育提供充足的营养。能激发重组细胞分裂分化。(3)供体细胞：取供体动物的体细胞培养，一般选用传代 10 代以内的细胞，因为 10 代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础。(4)动物体细胞不能经培养直接发育成完整个体的原因：动物体细胞的全能性受到限制。(5)该过程用到的技术手段：动物细胞培养、动物细胞融合、早期胚胎培养和胚胎移植。易误警示动物细胞培养和核移植技术的理解误区易误点 1 动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用不同：第一
16、次用胰蛋白酶处理剪碎的组织使之分散成单个细胞，第二次使贴壁细胞从瓶壁上脱落下来。易误点 2 核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本可能不同。(1)克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本，与植物组织培养不同(来自一个亲本)，即克隆动物遗传物质来自两个亲本。(2)在发育过程中可能发生基因突变、染色体变异导致性状改变。(3)外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。跟踪演练3下列关于细胞工程的叙述，错误的是()A电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的 B 淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D某种植物甲乙两品种的体细胞杂
17、种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同【解析】电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合，形成杂种细胞，A 正确。用纤维素酶和果胶酶分散植物细胞，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分散动物细胞，B 正确。骨髓瘤细胞无需增殖，经抗原免疫小鼠的 B 淋巴细胞能够生成抗体，故二者融合形成的杂交瘤细胞可以生成单克隆抗体，C 正确。体细胞杂种染色体数目为杂交后代的 2 倍，D 错。【答案】D4在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是()A所用的技术手段完全相同B两者的基本原理相同，诱导融合的方法也完全相同C结果是相同的D杂种细胞的形成过程基本相同，两者都使远缘杂交成为可能【解析】动物细胞融合和植物体细胞杂交
18、所用的技术手段不完全相同，A 项错误；动物细胞融合的基本原理是细胞膜的流动性，诱导动物细胞融合的方法除了物理和化学的方法外，还可以用灭活的病毒诱导，而植物体细胞杂交技术的基本原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，诱导原生质体融合的方法有物理和化学的两种方法，因此，两者的基本原理不完全相同，诱导融合的方法也不完全相同，B 项错误；动物细胞融合的结果是形成杂交细胞，而植物体细胞杂交的结果是形成杂种植株，C 项错误；杂种细胞的形成过程基本相同，两者都使远缘杂交成为可能，D 项正确。【答案】D【解题技巧】1动物细胞培养中两次用到胰蛋白酶，第一次用胰蛋白酶处理剪碎的组织使之分散成单个细胞，第二次使贴壁
19、细胞从瓶壁上脱落下来。2核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本不同的原因：克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本，所以与植物组织培养不同只来自于一个亲本，即克隆动物遗传物质来自两个亲本。在发育过程中可能发生基因突变、染色体变异导致性状改变。外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。考点三动物细胞融合、单克隆抗体核心知识1植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞的增殖融合前处理除去细胞壁使细胞分散开使用的酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶诱导手段物理法：离心、电激、振动化学法：聚乙二醇等试剂诱导除物理法和化学法外，也可用灭活的病毒诱
20、导结果杂种植株杂交细胞应用培育植物新品种主要用于制备单克隆抗体意义突破远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离，扩展了杂交的亲本组合相同点原生质体融合原理相同，原生质体融合的方法相似2.单克隆抗体的制备易误警示植物体细胞杂交和动物细胞融合过程中所选酶和结果的辨析易误点 1 植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同，纤维素酶和果胶酶作用于细胞壁，而胰蛋白酶作用于细胞间的蛋白质。易误点 2 植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性，但动物杂交细胞的全能性不能表达。易误点 3 取相应 B 淋巴细胞前必须先注射相应抗原，否则不能获得单克隆抗体。跟踪演练5关于单克隆抗体的生产和应用，错误的是()A对小动
21、物注射特定抗原以获取所需的 B 细胞B融合并筛选特定的杂交瘤细胞，原代培养产生遗传物质改变后才能进行传代培养C特定的单克隆抗体可制成试剂，用于检测人体是否受某种抗原的感染D治疗癌症的“生物导弹”原理之一是利用单克隆抗体的特异性识别癌细胞【解析】单克隆抗体是由杂交瘤细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。生产杂交瘤细胞要用发生免疫的 B 细胞和骨髓瘤细胞融合，而发生免疫的 B 细胞是从注射特定抗原的小动物脾脏中提取的，A 项正确；杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生专一抗体，所以融合并筛选特定的杂交瘤细胞后，无需经过原代培养产生遗传物质改变后才能进行传代培养，B 项错误；
22、单克隆抗体最广泛的用途是作为诊断试剂，在人类的多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用，C 项正确；抗癌细胞的单克隆抗体能特异性识别癌细胞，若把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成“生物导弹”，注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物带到癌细胞所在位置，在原位就能将癌细胞杀死，D 项正确。【答案】B6目前单克隆抗体的应用受到越来越多的重视，如作为诊断试剂、制成生物导弹等。请根据所学知识，回答下列问题：(1)制备单克隆抗体涉及到_和_技术。(2)为获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞需要多次筛选，其中第一次筛选用_培养基。经初次筛选的杂交瘤细胞，还需进行_(操作)。
23、(3)杂交瘤细胞的增殖方式为_分裂，在此过程中其遗传性状_。(4)杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内，这样可从_或_中提出大量的单克隆抗体。(5)单 克 隆 抗 体 与 常 规 的 血 清 抗 体 相 比 最 大 的 优 点 是_。动物细胞培养动物细胞融合选择克隆化培养和抗体检测有丝保持不变细胞培养液小鼠腹水特异性强，灵敏度高(可大量制备)【解析】(1)制备单克隆抗体涉及到动物细胞培养和动物细胞融合技术。(2)为获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞需要多次筛选，其中第一次筛选用选择培养基，以便筛选出杂交瘤细胞；经初次筛选的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，以获得既能无限
24、增殖又能产生所需抗体的杂交瘤细胞。(3)杂交瘤细胞的增殖方式为有丝分裂，在此过程中其遗传性状保持不变。(4)杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内，这样可从细胞培养液或小鼠腹水中提出大量的单克隆抗体。(5)单克隆抗体与常规的血清抗体相比最大的优点是特异性强，灵敏度高(可大量制备)。【解题技巧】1植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同，纤维素酶和果胶酶作用于细胞壁，而胰蛋白酶等作用于细胞间的蛋白质。2灭活的病毒保持了其抗原性，但毒性消失。3植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性，但动物杂交细胞的全能性不能表达。题组一 植物细胞工程1(2015浙江卷)下面是关于植物克隆和生态
25、工程的问题。请回答：(1)为培育能高效吸收和富集重金属镉的转基因植物，将野外采得的某植物幼叶消毒后，用酶混合液处理，获汲了原生质体。酶混合液中含有适宜浓度的甘露醇，其作用是_。(2)将目的基因导入到原生质体，经培养形成愈伤组织，再通过_得到分散的胚性细胞，发育成_，生长发育后获得转基因植株。维持渗透压液体悬浮培养胚状体(3)愈伤组织继代次数过多会丧失细胞全能性的表达能力，下列原因错误的是_。A愈伤组织发生遗传变异B愈伤组织不能分散成单细胞C愈伤组织中激素平衡发生改变D愈伤组织对外源激素敏感性发生改变B【解析】(1)植物原生质体的获得方法是在 0.50.6 mol/L 的甘露醇溶液环境下用纤维素
26、酶和果胶酶混合液处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞，将细胞壁消化除去，获得球形的原生质体。甘露醇的作用是维持溶液较高的渗透压，防止原生质体吸水涨破。(2)将目的基因导人原生质体后，可在培养基上培养形成愈伤组织，再通过液体悬浮培养得到分散的胚性细胞，发育成胚状体，胚状体继续发育，可形成植株。(3)愈伤组织继代次数过多会丧失细胞全能性的表达能力，可能的原因有染色体畸变、细胞核变异或非整倍体产生等，或细胞中激素平衡被打破，或细胞对外源激素的敏感性发生改变。题组二 动物细胞工程2(2015天津卷)2015 年 2 月 3 日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿
27、的培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述错误的是()A该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代B捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿C三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核D三亲婴儿的培育还需要早期胚胎培养和胚胎移植等技术【解析】“去核、取核、移植”操作属于核移植操作，形成受精卵及之后的操作属于体外受精、胚胎培养、胚胎移植。三亲婴儿的母亲只提供了细胞核，细胞质基因不会传递给后代；捐献者提供的卵母细胞只利用细胞质，而红绿色盲基因在细胞核中；三亲婴儿的染色体来自母亲细胞核和精子；三亲婴儿的培育需要将受精卵进行早期胚胎培养，到 816 个细胞时，经胚胎移植到母亲子宫继续发育。【答
28、案】C3(2015安徽卷)科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子医用蛋白，其技术路线如图。(1)由过程获得的 A 为_。(2)在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是_。受体应选用_期卵母细胞。(3)进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生_，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。(4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为_。含目的基因的表达载体保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞M免疫排斥反应整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养【解析】(1)根据题意可知，要将人凝血因
29、子 IX 基因导入绵羊胎儿成纤维细胞中。必须构建基因表达载体，所以由过程获得的 A为基因表达载体。(2)为保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞。在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核。受体应选用减数第二次分裂中(M中)期卵母细胞。(3)进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。(4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养。4某研究者用抗原(A)分别免疫 3 只同种小鼠(X、Y 和 Z)，每只小鼠免疫 5 次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗
30、体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的 B 淋巴细胞(染色体数目为40 条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目为 60 条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗 A 抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题：(1)制备融合所需的 B 淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到 16000 以上，则小鼠最少需要经过_次免疫后才能有符合要求的。达到要求的 X、Y、Z 这 3 只免疫小鼠中，最适合用于制备B 淋巴细胞的是_小鼠，理由是_。(2)细胞融合实验完成后，融合体系中除含
31、有未融合的细胞和杂交廇细胞外，可能还有_，体系中出现多种类型细胞的原因是_。(3)杂交瘤细胞中有_ 个细胞核，染色体数目最多是_条。(4)未融合的 B 淋巴细胞经过多次传代培养后都不能存活，原因是_。四YY 小鼠的血清抗体效价最高B 淋巴细胞相互融合形成的细胞，骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到 100%1 200B 淋巴细胞高度分化，不能恶性增殖；不可能渡过原代培养和传代培养过程中的两次危机【解析】细胞融合是随机的，但是只有浆细胞和骨髓瘤细胞融合形成的细胞才是生产需要的。(1)据图中数据分析，第四次注射后 X、Y、Z 中 Y 小鼠的血清抗体效价达到 16 000 以上；免疫后小鼠 Y 的 B淋巴细胞产生抗体效价最高，最适用于制备单克隆抗体。(2)B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合在一起时，可能发生 B 淋巴细胞之间的融合、骨髓瘤细胞之间的融合和 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，故体系中会出现多种类型的细胞。(3)杂交瘤细胞形成后，小鼠的 B 淋巴细胞核与骨髓瘤细胞核融合成一个细胞核，染色体可达 100 条，在有丝分裂后期染色体数目可达到 200 条。(4)未融合的 B 淋巴细胞经多次传代培养后，仍然不能存活，原因是 B 淋巴细胞高度分化，不能恶性增殖，同时 B淋巴细胞不可能渡过原代培养和传代培养过程中的两次危机。
