1、课时跟踪检测(三十八)微生物的培养和利用授课提示：对应学生用书第371页基础对点练考纲对点夯基础考点一微生物的分离和培养1不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述，不正确的是()A氮源物质为该微生物提供必要的氮素B碳源物质也是该微生物的能源物质C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D水是该微生物的营养要素之一解析：碳源分为有机碳源和无机碳源。当有机物作为碳源时，既是碳源，又可作为能源；当无机物作为碳源时，只能作为碳源，不能作为能源。该碳源是二氧化碳，属于无机物，不能作为微生物的能源物质。答案：B2下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是(
2、)A操作顺序为计算称量溶化倒平板灭菌B将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C待培养基冷却至50左右时倒平板D待平板冷却凝固后将平板倒过来放置解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算称量溶化灭菌倒平板，其顺序不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以称好后需将称量纸一同放入烧杯，当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸，待培养基冷却到50左右，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态时开始倒平板，平板冷却凝固后才能倒置。答案：A考点二某种微生物数量的测定3能够测定样品活菌数的方法是()A稀释涂布平板法B直接计数法C质量法 D比浊法解析：直接计数法是利用特定的计数板，在显微镜下计算一定容积
3、量样品中微生物的数量，不能区分死菌与活菌；质量法是用于微生物生长测定的一种方法，有湿重法和干重法，也可以通过对蛋白质和DNA含量反映细胞的物质质量；比浊法是在一定范围内，悬液中细胞浓度与浑浊度成正比，即与光密度成正比，菌越多，光密度越大；活菌在适宜培养基和良好生长条件下通过生长形成菌落，此法又称活菌计数法，可采用稀释涂布平板法接种。答案：A4通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出()大肠杆菌霉
4、菌放线菌固氮细胞A BC D只有解析：缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，而固氮细菌能生长；在培养基中加青霉素可以抑制细菌和放线菌等原核生物细胞壁的合成，而霉菌属于真核生物，故能生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长，对放线菌的生长无影响。答案：A提能强化练考点强化重能力5(经典高考题)高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是()A将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中B将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上C将转基因植物叶片接种到无菌培养基上D将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上解析：将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中进行酿酒时，在缺氧、酸性环境下其他杂
5、菌不能生长，故不严格灭菌对其影响不大；腐乳制作中将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上，毛霉生长繁殖快且抗杂菌能力强，故不严格灭菌对实验结果影响不大；进行植物组织培养时，植物材料体积小、抗性差，而微生物繁殖快、生长迅速、会争夺培养基中的营养，产生的代谢废物还会毒害培养材料，故培养材料一旦被微生物(如细菌)污染，将严重影响实验结果；选择培养基中已经加入了某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物生长，另外土壤浸出液本身也含有一定量的微生物，因此将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上时不进行严格的无菌操作，对实验结果影响不大。答案：C6(2013安徽卷)下图为通过DNA分子杂交鉴定含有某
6、特定DNA的细菌克隆示意图。下列叙述正确的是()A根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目B外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制C重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接D放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置解析：读图可知，接种该微生物所用的方法是稀释涂布平板法，而通过该方法只能估算样品中含有的活菌数；外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行表达，而不是复制；重组质粒与探针之间的杂交原理是碱基互补配对；放射自显影结果显示的杂交链位置与原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置相同。答案：D7下图是采
7、用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，据图分析不正确的是()A获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法B获得图B效果的接种方法是平板划线法C若在纯化土壤细菌时菌液浓度过高，培养基上的菌落可能会连成一片D在接种前要对培养基进行消毒处理解析：从平板中菌落的分布来看，A图和B图的接种方法分别是稀释涂布平板法和平板划线法。如果菌液的稀释度太低，在培养基上的菌落会连成一片。在接种前要对培养基进行高压蒸汽灭菌处理。答案：D大题冲关练综合创新求突破8(2017广东肇庆期末)某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验，实验包括制备培养基、灭菌、接种、培养及菌落观察与计数，请回答与此实验相关的
8、问题。(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_和_。(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于_中培养，培养的温度设定在37，要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。(4)培养20小时后，观察到平板上有各种形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。一般来说，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。(5)如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_细菌，这种培养基被称为_。解析：(1)不同的培养基都含有基本成分：水、无机盐、
9、碳源、氮源。所以培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源、碳源，除此之外，培养基还必须含有的基本成分是水和无机盐。(2)对培养基灭菌常采用的方法是高压蒸汽灭菌，对培养皿进行灭菌采用的方法是干热灭菌法。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱中培养，培养的温度设定在37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照进行实验。(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，其总数越多，说明湖水样品中有多种细菌，污染程度越重。(5)如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐盐细菌，这种培养基被称为选择培养基。答案：(1
10、)氮源(碳源不作要求)碳源无机盐水(2)高压蒸汽灭菌(3)恒温培养箱无菌水(4)多高(5)盐(或NaCl)选择培养基9(2017贵州黔南州期末)请回答下列与微生物有关的问题：(1)微生物的分布：纤维素分解菌主要分布在富含_的土壤表层。(2)微生物的消毒和灭菌：在菊花组织培养中，对外植体常用_和氯化汞进行消毒；在微生物培养中，对培养基常用_法进行灭菌。(3)微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生型_发酵产生酒精。(4)微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是_和稀释涂布平板法。(5)微生物的计数：运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是_。(6)微
11、生物的鉴定：为筛选出纤维素分解菌，应向培养基中加入_染料，将呈红色反应，再依据培养基中是否产生_来筛选纤维素分解菌。解析：(1)微生物的分布：纤维素分解菌主要分布在富含纤维素的土壤表层。(2)微生物的消毒和灭菌：在菊花组织培养中，对外植体常用酒精和氯化汞进行消毒；在微生物培养中，对培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(3)微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生型酵母菌发酵产生酒精。(4)微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。(5)微生物的计数：运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观
12、察到的只是一个菌落。(6)微生物的鉴定：为筛选出纤维素分解菌，应向培养基中加入刚果红，将呈红色反应，再依据培养基中是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。答案：(1)纤维素(2)酒精高压蒸汽灭菌(3)酵母菌(4)平板划线法(5)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(6)刚果红透明圈10(2017山西忻州一中、长治二中、康杰中学、临汾一中联考)乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注，利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为：玉米秸秆糖液酒精(1)玉米秸秆预处理后，应该选用_酶和_酶形成纤维二糖，再使用_酶使之转化为发酵所需的葡萄糖。(2)从以下哪些微生物中可以提取上述酶？_(多选)A酿制果
13、醋的醋酸菌B生长在腐木上的霉菌C制作酸奶的乳酸菌D反刍动物瘤胃中生存的某些微生物(3)若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为_(按功能分)，培养基中的碳源为_，微生物在纯化培养时常用方法是_和_。(4)发酵阶段需要的菌种是_，生产酒精时要控制的必要条件是_。解析：(1)玉米秸秆预处理后，应该选用C1酶和CX酶形成纤维二糖，再使用葡萄糖苷酶使之转化为发酵所需的葡萄糖。(2)由于纤维素分解酶存在于分解纤维素的微生物中，故应从富含纤维素的环境中去寻找纤维素分解菌，则应从生长在腐木上的霉菌和反刍动物瘤胃中生存的某些微生物中提取，故选BD。(3)若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养
14、基按功能属于选择培养基，培养基中的碳源为纤维素，微生物在纯化培养时常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法。(4)发酵阶段需要的菌种是酵母菌，生产酒精时要控制的必要条件是无氧(密封、密闭)。答案：(1)C1CX葡萄糖苷(2)BD(3)选择培养基纤维素平板划线法稀释涂布平板法(4)酵母菌无氧(密封、密闭)11(2017山东烟台检测)大肠杆菌是人和动物肠道中普遍存在的一种兼性厌氧菌，在无氧条件下，大肠杆菌通过发酵能将葡萄糖转变为多种有机酸并产生CO2等气体。某研究机构使用“滤膜法”对受污染的河流水体进行了大肠杆菌活菌数目的测定。请回答下列问题：(1)研究人员向培养大肠杆菌的葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量
15、的溴麝香草酚蓝水溶液，培养一段时间后，可观察到溶液颜色的变化为_。为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入_作为指示剂。(2)测定大肠杆菌活菌数目时，需制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，该培养基中为细菌提供氮源的物质是_。(3)为了便于统计污染严重的水体中活菌的数目，需将水样进行适当稀释，例如取水样1 mL加入无菌水_mL制备稀释倍数为102的稀释液，并照此依次制备更高倍数的稀释液。每个稀释倍数的菌液取10 mL进行过滤，然后将滤膜放置在培养基上。为了防止杂菌污染，稀释、过滤和旋转滤膜等操作都应该在_附近进行。(4)将放有滤膜的平板置于适宜条件下培养，每隔12 h统计一次菌落数目，应选取菌落数目_时的
16、记录作为结果。如果经过培养后稀释倍数为102的4个平板上菌落数分别为43、47、42、48，那么每升河水中约含大肠杆菌_个。用这种方法测定的细菌数量比实际活菌数量要少，这是因为_。解析：(1)大肠杆菌细胞呼吸产生的二氧化碳气体可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入伊红和美蓝作为指示剂，观察是否出现深紫色并伴有金属光泽的菌落。(2)牛肉膏蛋白胨固体培养基中为细菌提供氮源的物质是牛肉膏和蛋白胨。(3)对水样进行稀释时，取水样1 mL加入无菌水99 mL可制备稀释倍数为102的稀释液。为了防止杂菌污染，稀释、过滤和旋转滤膜等操作都应该在酒精灯火焰附近的无菌区进行。(4)将放有滤膜的平板置于适宜条件下培养，每隔12 h统计一次菌落数目，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果。经过培养后稀释倍数为102的4个平板上菌落数平均为(43474248)445(个)，那么每升河水中约含大肠杆菌451021 0004.5106(个)。由于当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，所以用这种方法测定的细菌数量比实际活菌数量要少。答案：(1)由蓝变绿再变黄伊红美蓝(2)牛肉膏和蛋白胨(3)99酒精灯火焰(4)稳定4.5106当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的是一个菌落
