1、专题二 克隆技术高考真题1.【2012新课标卷.39题，15分】为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率（m），以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n），结果如表。“汉水丑生回答下列问题：（1）按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为和两类。上述培养基中，6-BA属于类生长调节剂。（2）在该实验中，自变量是，因变量是，自变量的取值范围是。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-
2、7（3）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是号培养基。（4）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入（填“6-BA”或“IAA”）。2.【2011山东35题，8分】人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可从已处死的雌鼠_中获取。（2）图中的高血压相关基因作为_，质粒作为_,二者需用_切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有_有关。（3）子代大鼠如果_和_，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压
3、相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。汉水丑生的生物同行”超级（4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是_、早期胚胎培养和胚胎移植。汉水丑生的生物同行”超级群整理校对2012-3. 【2010山东35题.8分】胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。汉水丑生的生物同行”超级群整理校对2012-7-51.从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是_；从良种公牛采集的精子需_后才能进行受精作用。2.在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供_气体以维持_
4、。3.图中过程A称为 ，它在胚胎工程中的意义在于 ，研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是_；获得转基因母牛后，如果_即说明目的基因已经表达。考纲要求1.植物的组织培养 2.动物的细胞培养与体细胞克隆3.细胞融合与单克隆抗体 第一课时一、学习目标1.简述植物组织培养和植物体细胞杂交技术。2.尝试进行植物组织培养。二、自主学习 自我检测(一)细胞工程1概念：应用 和 的原理和方法，通过 或 上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的 或获得 的一门综合科学技术。2分类：根据操作对象不同，可分为 、 。（二）植物细胞的全能性1植物细胞的基本结构包括
5、、 、 、 。2植物细胞主要的增殖方式是 ，细胞分化是指 ，_原因是 _ 。3全能性是指 ，表现为全能性的原因是 。4在理论上，生物的任何一个细胞都 ，但在生物的生长发育过程中，细胞并不表现 ，-而是分化成各种 。5特定的时间和空间条件下，细胞中的基因会有 地表达出各种 ，分化形成不同的细胞，从而构成生物体的不同 。（三）植物组织培养技术1原理：植物细胞具有 ，具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成 的潜能。2过程 离体植物的 _ 组织幼根和芽或胚状体 完整植株。3细胞脱分化：已 的细胞经过诱导后，失去其特有的 而转变成未分化细胞的过程。4植物组织培养：在 和 的条件下，将 的植
6、物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生 、丛芽，最终形成完整植株。（四）植物体细胞杂交技术1概念：不同种植物的 ，在一定条件下融合成 ，并把杂种细胞培育成新的 的技术。2过程 离体的细胞不同细胞原生质体原生质体融合 杂种细胞杂种植株。3植物体细胞杂交步骤： (1)去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体，目前最常用的去细胞壁的方法是酶解法，也就是在温和条件下用纤维素酶、果胶酶去除植物细胞的细胞壁。 (2)不同植物体细胞原生质体融合，必须通过法和法来诱导融合。方法有：离心、振动、电激等促使原生质体融合。法是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂来诱导融合。融合后再生出细胞
7、壁。 (3)用植物组织培养方法进行培育，可得到杂种植株。如图 在此过程中需要注意的问题有：植物体细胞杂交过程中，植物细胞融合所依据的生物学原理是细胞膜的流动性；植物组织培养的理论基础是细胞的全能性。体细胞融合成功以后，既有AB型杂种细胞，还能形成AA型和BB型两种融合细胞，但只有AB型细胞是植物体细胞杂交所形成的杂种细胞，因此在杂种细胞形成后还应有一个筛选过程。目前常用的去除细胞壁的方法是酶解法，保证了原生质体活性。植物体细胞杂交完成的标志是新细胞壁的形成。植物体细胞杂交过程仍以植物组织培养为前提，通过植物组织培养完成杂种植株的培育过程。植物体细胞杂交的最大突破是克服远缘杂交不亲和的障碍，但是
8、目前仍有许多理论和技术问题没有解决，离推广应用仍有一定距离。三、讲解提高1外植体的选择与制备 选择外植体时，由于外植体的脱分化难易因植物种类、器官来源及生理状况的不同而有很大差异，因此，选择哪些作为外植体应该注意。一般来讲，烟草、胡萝卜，植物的花和幼嫩的组织脱分化相对较易，而植物的茎、叶和成熟的老组织则较难。 制备外植体首先要消毒，其次要选取有形成层的部分，因形成层细胞易脱分化。 2植物组织培养注意的要点 培养基包括所有操作工具都应进行消毒和灭菌，谨防杂菌污染。 需在无菌条件下操作。 接种，继代培养的转移都应在接种箱内进行。3对于植物组织培养来说，光照条件非常重要，包括光照强度、时间和波长。但
9、在由高度分化的组织形成愈伤组织的诱导阶段往往要暗培养，而在分化形成试管苗的再生的过程中一定要有光照。诱导形成愈伤组织阶段的暗培养有利于细胞的脱分化产生愈伤组织，如果在光照条件下容易分化产生维管等组织，不利于产生大量的愈伤组织。由愈伤组织经细胞有丝分裂和分化形成试管苗的过程中需要光照，原因是叶中叶绿素的合成需要光照条件。4植物细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。5植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。杂种植株特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。四、当堂训练1.如图为两个种间植物细胞融合和再生植株示意图。请据图回答：（一八表示各主要步骤
10、）（1）从步骤一到步骤二是植物细胞形成 的阶段，其关键是使用酶去掉 。（2）从步骤二到步骤三一般要用 作为促融剂。（3）步骤四为 过程。（4）在形成再生植株的过程中与组织培养有相似之处的步骤是 ，理由是 。（5）步骤八表示选择体细胞杂种植株，杂种植株不仅在形态上表现为 ，而且在 等方面发生了明显的重组现象。2.下图为植物体细胞杂交过程示意图，据图回答：（1）步骤是去掉 ，使植物细胞成为 ，最常用的方法是 。（2）步骤一般常用的化学试剂是 ，目的是 。（3）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是 ，其中步骤相当于 ，步骤相当于 。（4）植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植株，使两株植物的性状能够在新的植物体上有所表现，其根本原因是 。（5）从理论上讲，杂种植株的育性为 。若运用传统有性杂交方法能否实现？ 理由是 。因此，这项研究对于培养作物新品种方面的重大意义在于 。 （7）利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？为什么？
