1、选修1专题3课题1菊花的组织培养（预）【学习目标】1.植物组织培养的基本原理。2.植物组织培养的基本技术。3.进行菊花或其他植物的组织培养。【知识梳理】一、基础知识(一)植物的组织培养的基本过程1.植物组织培养的原理 （1）细胞分化：个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。 根本原因：在特定的时间和空间条件下，基因的选择性表达。（2）细胞全能性：生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。植物细胞表现全能性条件：离体、营养物质、激素和其他外界条件。2.植物组织培养的基本过程 试管苗外植体：离体的植物器官或组织片段。 脱分化（去分化）：高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织
2、的过程。 愈伤组织：通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。 再分化：愈伤组织继续进行培养重新分化成根或芽等器官的过程。（二）影响植物组织培养的因素 1.外植体的选取 不同植物的组织培养难度 一般选择植物的幼嫩部分（生命力旺盛，分裂分化能力强；含有的病毒少），比如茎尖、根尖、幼嫩的叶片等； 保存时间越短，材料生命力越旺盛；保存时间越长，越容易受到污染。例如：菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。2.培养基的配制(MS培养基)MS培养基主要成分大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S ；微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、C；有机物：
3、甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等；植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等。3.不同植物激素浓度、使用顺序和使用量用量比例与根、芽的分化生长素和细胞分裂素比值结果比值高时促进根的分化，抑制芽的形成比值低时促进芽的分化，抑制根的形成比值适中促进愈伤组织的形成4. 环境条件pH、温度、光照等条件也很重要。例如菊花组织培养的条件：pH=5.8 、温度、控制在1822、每日光照12h。二、实验操作（一） 制备MS培养基1.配制各种母液 2.配置培养基菊花的茎段的组织培养比较容易，不必添加植物激素。3.灭菌（二）外植体消毒(三）接种1.接种室消毒2.无菌操作在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火
4、焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。 3.材料的切取和接种（四）培养（五）移栽【课前热身】1.判断下列说法的正误(1)二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后可得到稳定遗传的植株()(2)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是植物组织培养()(3)脱分化过程不需要植物激素，植物激素只有在再分化过程中发挥作用()(4)由于植物细胞都具有全能性，所以菊花的组织培养实验中选材不会影响实验的结果()(5)制备好的MS培养基用于植物组织培养时，需要加入植物激素()(6)被子植物的花粉发育要经过小孢子四分体时期、双核期和单核期等阶段()(7)单倍体植株的形成有两种途径，两种途径主要取决于培养基中植物激素的种类及其浓度配比
5、()(8)如果通过植物组织培养从愈伤组织中提取某种成分，应先使用生长素后使用细胞分裂素()2.下列有关植物组织培养技术的叙述，正确的是()A.经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞不具有细胞全能性B.在愈伤组织培养过程中加入聚乙二醇，可获得染色体加倍的细胞C.利用纤维素酶和果胶酶去除外植体的细胞壁有利于脱分化的发生D.培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向答案D解析幼芽细胞含有本物种全套遗传物质，具有细胞全能性；愈伤组织细胞含有细胞壁，加入聚乙二醇不能诱导细胞融合，因此不能获得染色体加倍的细胞；用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁可用于原生质体融合；生长素和细胞分裂素比例的不同将诱导愈伤组织向不同方向分化。
