1、调节 例题指导1探究植物激素对根生长的影响，科研人员以菊花为实验材料进行以下实验:对菊花幼苗施用不同浓度的生长素，10天后对主根长度和侧根数目分别进行计数，结果如下表。分析表中数据，回答下列问题：(1)生长素是对植物生长发育具有_作用的一类化合物，它是由_经过一系列反应转变而成的。在成熟组织中，生长素可以通过韧皮部进行_(极性/非极性)运输。(2)分析表中数据可知，生长素浓度为15010-6mol/L时，_(促进/抑制）生长侧根，促进侧根数量增加的生长素浓度_(促进/抑制）主根伸长，由表中数据可知，生长素对生长侧根的作用特点是_。(3)若某同学由于操作疏忽，未对某浓度生长素溶液做标记，用该生长
2、素溶液作用于菊花幼苗后侧根的数目是6，为确定该生长素的实际浓度，最简便的方法是将生长素溶液_(处理)后作用于插条，若_，则生长素浓度为150l0-6mol/L；若_，则生长素浓度为5010-6mol/L。1.【答案】(1)调节 色氨酸 非极性 (2)促进 抑制 具有两重性 （3）适当稀释 生根数目大于6 生根数目小于62(2017 湖北4月调研）为探讨反射弧的完整性与反射活动的关系，以损毁脑的蛙为实验材料，依次进行了如下实验：刺激前的处理用硫酸刺激的部位实验结果实验一环切掉蛙左后肢脚趾上的皮肤左后肢中趾左后肢不能运动实验二不作处理右后肢中趾右后肢能运动实验三与右后肢肌肉相连的坐骨 神经滴加麻醉
3、剂(一次）右后肢中趾 (每隔1min刺激一次）右后肢能运动，但3min后不能运动实验四实验三后立即实验右侧背部 (每隔lmin刺激一次)右后肢能运动，但5min后不能运动回答下列问题：（1）该实验过程中，控制后肢运动的神经中枢位于_；实验时，损毁蛙脑的目的是_。（2）实验一与实验二的结果不同，表明蛙趾部硫酸刺激的感受器位于_。 （3）坐骨神经中既有传入神经又有传出神经，因二者分布的位置存在差异，被麻醉的先后顺序不同。综合分析实验三和实验四，结果表明坐骨神经中的_（填“传入神经”或“传出神经”）先被麻醉剂彻底麻醉。2.【答案】(1)脊髓 排除脑对脊髓反射活动的影响 (2)皮肤内 (3)传入神经3
4、胰岛B细胞内K+浓度为细胞外28倍,细胞外Ca2+为细胞内15000倍,与神经细胞一样，都存在外正内负的静息电位。当血糖浓度增加时，葡萄糖进入胰岛B细胞引起一系列生理反应,如图所示。细胞内ATP浓度增加，导致ATP敏感的钾离子通道关闭，K+外流受阻，进而触发Ca2+大量内流,最终导致胰岛素分泌。回答下列问题：(1)胰岛素B细胞膜内外K+和Ca2+存在浓度差，其浓度差的建立和维持主要依靠的跨膜运输方式是_。当ATP升高引起ATP敏感的钾离子通道关闭,此时膜内外电位差的绝对值_(填“增大”、“减小”或“不变”）。(2)当ATP升高时，ATP与ATP敏感的钾离子通道上某一位点结合，引起该通道关闭,这
5、说明生物体内ATP除了作为直接能源物质外，还可以作为_起作用。(3)钾离子通道的关闭后，触发Ca2+大量内流，使胰岛细胞产生兴奋，钾离子通道关闭会导致细胞膜两侧的电位为_；由此引起胰岛素分泌，胰岛素通过促进靶细胞_，使血糖减低。3.【答案】(1)主动运输 减小 (2)信息分子 （3）外负内正 摄取、利用和储存葡萄糖4下表是给正常成年人和一肥胖症成年人一次性口服足量葡萄糖溶液后，血液中胰岛素含量的变化情况。据表回答下列问题：口服葡萄糖溶液后的时间（min）0306090120正常成年人胰岛素浓度（U/mL）6.739.836.922.07.1肥胖症成年人胰岛素浓度（U/mL）19.680.167
6、.260.352.3（1）人体肠道中的葡萄糖从被吸收到被肝细胞利用经过的内环境：肠道_ _ 肝细胞。（2）当血糖浓度上升时，下丘脑中的葡萄糖感受器接受刺激产生兴奋，最终作用于_，使其分泌胰岛素，此过程属于_调节；当血糖浓度降低到一定程度时，使相应细胞的活动减弱，甚至会出现血糖浓度升高，与血糖浓度升高有关的激素是_。（3）表中数据说明口服葡萄糖溶液后肥胖症成年人的胰岛素释放量_（填“高于”或“低于”）正常人的胰岛素释放量，可能的原因是_。4.【答案】(1)血浆 组织液 胰岛B细胞 (2)神经 胰高血糖素和肾上腺素 (3)高于 肥胖症人的组织细胞膜上的胰岛素受体缺少或受损5寨卡病毒疫苗被认为是预防
7、寨卡病毒传染的有效工具，目前此疫苗在老鼠身上试验成功。回答与免疫相关的问题：（1）免疫系统的功能是_。（2）研究人员为了研究寨卡病毒疫苗的预防效应，做了如下实验：实验选用40只健康小鼠随机分为4组，采用注射方式给药，28天后以致死剂量寨卡病毒悬液处理小鼠，一段时间后测定小鼠血清中IgG抗体水平，在寨卡病毒处理后21天计算各组小鼠存活率，结果如下表：实验数据显示，D组小鼠的血清抗体水平比其他组_，最可能的原因是_。实验结果表明，随寨卡病毒疫苗剂量的增加，免疫小鼠的_。5.【答案】（1）防卫、监控和清除 （2）低 D组小鼠未注射疫苗是初次免疫，产生的抗体少，其他注射过疫苗的组发生的是二次免疫，产生
8、的抗体更多 IgG抗体水平和存活率升高遗传 例题指导1、玉米茎具有绿茎和红茎之分，某实验小组以这种玉米为实验材料进行杂交实验，结果如下表:父本母本子一代（F1）笫1组一株红茎一株红茎绿茎、红茎（数量未统计）第2组株绿茎株绿茎245绿茎、81红茎（1）实验小组对该性状的遗传提出两种假说。假说一：玉米茎的颜色由三个等位基因（A+、A、a）控制，其中A决定绿茎，A+、a都决定红茎, 三个基因的显隐关系为A+相对于A、a为显性，A相对于a为显性。如果该假说成立，则第2组中的双亲基因型为 _ 。假说二：玉米茎的颜色由三个等位基因（A、a1和a2）控制，当a1和a2同时存在时，表现为红茎，其他情况均为绿茎
9、,A相对于a1和a2为显性,如果该假说成立,则第2组中双亲的基因型为 _ 。（2）为进一步探究两种假说的合理性。实验小组将第2组F1中的红茎植株自交得F2，并统计F2中茎的颜色和数量。若F2中 _ ,则支持假说一。若F2中 _ ,则支持假说二。1、（1）Aa和Aa Aa1和Aa2 （2）全为红茎 绿茎与红茎之比为1: 12、某多年生植物的性别是由性染色体XY决定的，现有一对相对性状高茎（A）与矮茎（a），但不知道其基因在常染色体还是在性染色体，于是进行探究实验，可供选择的杂交实验材料有：纯合雌性高茎、雌性矮茎、纯合雄性高茎、雄性矮茎。（1）若通过一次杂交实验分析控制该性状的基因是位于常染色体上
10、还是位于片段上，应选择的杂交组合_,若子代_，表明控制该性状的基因位于片段上（2）若选择雌性矮茎与纯合雄性高茎杂交，子代雌性、雄性都表现为高茎，_（能/否）确定其基因的位置，理由是_。为了进一步探究，最简便的办法是选择F1的雄性高茎个体与_雌性（基因型），再进行杂交，若F2中_，表明控制该性状的基因位于片段上（3）从题干所给的材料分析，控制该性状的基因_（能/否）位片段上。若控制生物一对性状的基因位于片段上，则一个比较大的种群中其基因型最多有_种2、（1）雌性矮茎 雄性纯合高茎 雌性全为高茎，雄性全为矮茎（2）不能 位于常染色体和XY同源区段上子代雌雄都表现为显性 XaXa或aa 雌性表现全为
11、矮茎，雄性表现全为高茎（3）不能 7种 3、 某植物种子的颜色有黄色和绿色之分，受多对独立遗传的等位基因控制。现有两个绿色种子的纯合品系，定为X、Y。让X、Y分别与一纯合的黄色种子的植物杂交，在每个杂交组合中，F1都是黄色，在自花授粉产生F2代，每个组合的F2代分离如下:X：产生的F2代，27黄：37绿 Y：产生的F2代，27黄：21绿回答下列问题：（1）根据上述哪个品系的实验结果，可初步推断该植物种子的颜色至少受三对等位基因控制？请说明判断的理由。（2）请从上述实验中选择合适的材料，设计一代杂交实验证明推断的正确性。（要求：写出实验方案，并预测实验结果）3、（1）X（2分）【评分细则：见“X
12、”给 2分，其它给0分】F1都是黄色，表明黄色对绿色为显性。X 品系产生的 F2中，黄色占 27/64=（3/4） 3 ，表明F1中有三对基因是杂合的，X与亲本黄色之间有三对等位基因存在差异（其他合理答案也给分）（4分）【评分细则：回答出显隐性给1分。表述F2结果与三对基因关系（3分）有两种模式参考：一种是从结果反推，从黄色所占比例27/64分析三对基因之间关系，表述清晰正确给3分，若从黄色所占比例 27/64分析，但表述欠佳，给2分；另一种是正推，参照“F1中一对基因杂合时，自交后代出现显性比例为3/4，当 F1 中有三对基因杂合时，自交后代显性所占比例为（3/4）3，与 X 的结果相符”给
13、3分，若直接表述“只有受三对等位基因控制，X 产生的 F2代才会出现27 黄：37 绿”，只给1分；其它合理答案参照给分，不正确的给0分】（2）取与 X 杂交形成的F1，与X杂交，后代中将出现黄色与绿色两种表现，且比例为1：7（4分）【评分细则：两个得分要点。方案选择正确“取与 X 杂交形成的F1，与X杂交”，给2分，若方案错误，本小题计0分；方案正确的前提下，结果预测中表现型种类及比例均正确，给2分，若表现型种类及比例答不全或错误均给0分。】选修一 例题指导1、欲从腐乳中分离筛选出产蛋白酶活力高的毛霉菌株，设计了如下实验流程：挑取腐乳样品上的菌丝，制成孢子悬浮液涂布于孟加拉红培养基，进行分离
14、去菌落接种于酪蛋白培养基，进行筛选测定蛋白酶活力。回答下列问题：（1）毛霉属于_核生物。在腐乳制作中，主要利用毛霉等微生物产生的_酶将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分子物质。（2）步骤进行涂布前，需将孢子悬浮液进行梯度稀释，进行梯度稀释的目的是_。若进行10倍稀释，一般吸取lml悬浮液注入_中，混匀。（3）孟加拉红培养基常用于分离霉菌及酵母菌，在孟加拉红培养基中加入氯酶素可以抑制细菌的生长。从功能上看，孟加拉红培养基属于_培养基。（4）毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈，在酪蛋白培养基中筛选到三个单菌落甲、乙、丙，其菌落直径分别为3.2cm、2.8cm、2.9cm，其菌落与透明圈一起的直径分
15、别为3.7cm、3.5cm、3.3cm。应选择菌落_作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。1、（1）真 蛋白酶和脂肪（2）增加悬浮液的稀释度，涂布培养能分离到单菌落（3分） 9ml 无菌水（3 分）（3）选择（2 分） （4）乙（3 分）2、生物乙醇是指通过微生物的发酵将各种生物质转化为燃料酒精。它可以单独或与汽油混含配制成乙醇汽油作为汽车燃料。我国成功利用农作物废弃物秸秆（主要成分为纤维素）代替粮食作为原料来进行燃料乙醇的工业化生产。其主要技术流程为：秸秆秸秆颗粒反应罐水解过滤除渣酒精发酵蒸馏。（1）将秸秆颗粒装入反应罐进行水解，需加入_的微生物，从而能将秸秆中的成分转变成葡萄糖。从土壤中获取该微
16、生物时，首先选择培养，然后通过_法直接筛选出该微生物。（2）若要对筛选获得的菌液进行计数，应将菌液用_法接种到平板上。如果将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别加入0.1mL的稀释液，经过培养后，3个平板的菌落分别是93、96、99，据此可得出每升菌液中的活菌数为_，通常运用该方法统计出的菌落数目_（高于、低于或等于）活菌的实际数目，原因是_。（3）酒精发酵阶段需接种的微生物是_，该微生物在_的发酵液中可以生长繁殖，而绝大多数其他的微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。【答案】 能分解纤维素 刚果红染色 稀释涂布平板 9.6X107 低于 当两个或多个细胞连在一起时，形成和观察到的只是一个
17、菌落 酵母菌 缺氧（无氧）、呈酸性3、在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复该除草剂污染的土壤，需要选育能高效降解该除草剂的细菌。请完成下列选育的实验方案：步骤一：菌种浸出液的制备（1）从_中获取一定量的样本，然后置于无菌水中，震荡一定时间，备用。步骤二：配置菌种选育培养基并灭菌（2）所配制的培养基的特点是_和_。步骤三：划线接种，_，_。（3）常用的接种划线工具是_。【答案】 使用过除草剂的土壤 固体 含不同浓度除草剂 在适宜的温度等条件下进行倒置培养一定时间 观察选取在较高浓度除草剂下的培养基中的（大）菌落 接种环4、牛的食物主要
18、是草茎类，其中含有大量的纤维素。牛胃内的微生物，在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用。回答下列问题：（1）纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，组成纤维素的单体为_。牛胃中某些微生物能够产生纤维素酶，这种酶是一种复合酶，其中的_能使纤维素分解成纤维二糖。 （2）实验室培养牛胃内的微生物，分离得到高纯度纤维素分解菌的关键环节是_。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_附近进行；倒平板用的培养皿需要保持干燥，可以采用_法进行灭菌。（3）为了从牛胃的食麋中分离出纤维素分解菌，配制的选择培养基要以_作为唯一碳源。筛选纤维素分解菌时，常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚
19、果红进行颜色反应，另一种是_。在涂布平板时滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，原因是_。【答案】 葡萄糖 C1酶、CX酶 防止外来杂菌的入侵 酒精灯火焰 干热灭菌 纤维素 在倒平板时就加入刚果红 培养基表面的菌悬液过多会导致菌体堆积，影响分离效果【解析】试题分析：在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。（1）纤维素是一种多糖，其基本组成单位是葡萄糖；纤维素酶是一种复合酶，其中的C1酶、CX酶能使纤维素分解成纤维二糖（2）微生物分离和培养的关键环节是防止外来杂菌的入侵；为避
20、免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；倒平板用的培养皿需要保持干燥，可以采用干热灭菌法进行灭菌（3）为了分离出纤维素分解菌，配制的选择培养基要以纤维素作为唯一碳源。筛选纤维素分解菌时，常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在到平板时就加入刚果红。在涂布乎板时滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，原因是培养基表面的菌悬液过多会导致菌体堆积，影响分离效果。衡水押题卷答案：（1）挥发性 NaCl（2）有效成分水解，水中蒸馏时原料易焦糊 石灰水 NaHCO3 和 Na2SO4 过滤（3）稀释涂布平板 透明圈较大(惠州四月调研）37.【生物选修
21、1：生物技术实践】（15分） 日前微博传言手机屏幕细菌比马桶按钮多。如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题：（1）该实验需制备培养基，培养基一般都含有水、碳源、 。（2）据图，两电视台均采用 法接种，该方法需要 （多选）A接种环 B酒精灯 C移液管 D涂布器 E无菌水（3）通过观察菌落的 ，可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。两电台实验操作均正确且培养基也完全相同，但报道结果截然不同，你认为原因是： 。（4）按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落
22、数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为 个/平方厘米 。该实验对照组该如何设置 。37.答案和评分标准：（除特殊说明，每空2分）（1）氮源和无机盐（2分）（答对1个给1分，共2分。“琼脂”不作为扣分或给分的标准） （2）稀释涂布平板（法）（2分） BCDE（2分）（全对2分，答对2-3个得1分，其他情况不得分）（3）形态、大小 （2分）（答出一点即给2分，也可填“颜色”或其它合理答案也可） 手机的取样和马桶的取样都不相同（2分）（能答 “取样不同”即得2分）（4）2104 （3分） 取培养基涂布0.1mL无菌水进行培养（2分）（只答无菌水没有等量或0.1mL给1分，答“取空白培养基不
23、接种进行培养”不得分，因为这是检测培养基是否合格，而不是对照实验）选修三 例题指导1【生物选修3：现代生物科技专题】 为培育出含-胡萝卜素的“黄金大米”，科研人员提出以下两套培育方案。请分析回答下列问题：（1）甲方案中，-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是_。构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有_，它能把目的基因整合到水稻体细胞的_上。（2）乙方案中，在体细胞杂交前需要用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁获得原生质体，诱导其融合的化学试剂常用_。通过获得“黄金大米”幼苗需要经过_两个过程，在培养过程中，除了在培养基中添加营养物质外还需要添加_。（3）与传统育种
24、方法相比，甲、乙两套方案共同的优点是_。2【生物选修3：现代生物科技专题】毛角蛋白型中间丝（KIF）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF基因的高绒质山羊的简单流程如下图所示：（1）在过程中构建的KIF基因表达载体时，最常用的运载工具是_；构建成功的基因表达载体上，目的基因应插入_和_之间，以便成功表达。（2）从基因文库中获得的KIF基因可用_技术进行扩增，其原理是_。（3）通过过程形成的成纤维细胞在培养过程中，将其置于含95%空气加_的混合气体培养箱中培养，培养中加入_达到无菌环境。（4）通过过程获得的卵（母）细胞，在与成纤维细胞形成重组细胞前，应先通过显微操作去掉_。3【生物一选修3
25、:现代生物科技专题】利用基因工程技术培育马铃蓽新品种，目前已经取得丰硕成果。请根据教材所学知识回答下列问题：（1）马铃幕易患多种疾病，导致其产量不高。通过导入抗病基因并使其表达可以提高马铃薯产量，基因工程中使用最多的抗病基因是_和病毒的复制酶基因。（2）马铃暮是双子叶植物，常用_(方法）将目的基因导入马铃薯受体细胞中。构建好的基因表达载体基本结构包括目的基因、标记基因、_ 、_、_等五部分。 （3）科学家还培育出抗除草剂的转基因马铃薯，其设计方法:修饰除草剂作用的靶蛋白，使其对除草剂_(填“敏感”或“不敏感”)，或使靶蛋白过量表达，植物吸收除草剂后仍能_。（4）将目的基因导入受体细胞后，还需对
26、转基因植物进行_。4【生物一选修3:现代生物科技专题】“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一，其本质是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不会污染。请回答下列问题：（1）在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，在载体一般应具备的条件中，科学家选择性地放弃了一般载体都应具有的特点_。检测P53基因的表达产物
27、，可以采用_技术。（2）如果要大量扩增P53基因，一般采用PCR技术，该技术中需使用的一种特殊的酶_。与体内DNA复制相比较，PCR反应要在_中才能进行，并且要严格控制_条件。（3）如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎干细胞可来源于囊胚的_，或胎儿的原始性腺；在培养时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为_。如果想继续培养则是需要重新用_处理，然后分瓶继续培养，这样的培养过程通常被称为传代培养。5【生物选修3：现代生物科技专题】屠呦呦获得诺贝尔生理学奖后，最新研究表明，青蒿素还可用于糖尿病的治疗。研究人员利用基因工程培育出高产的转基因青蒿。（1）青蒿的cDNA文库，是以从青蒿细胞中提取的
28、_为模板，通过_（方法）建立，该文库中的基因_（填“含有”或“不含有”）启动子。（2）基因工程操作的核心步骤是_。若选择的限制酶切出的DNA片段是平末端，应选择_进行连接。（3）目的基因的大量扩增可以采用_技术，该技术的原理是_，该技术中需使用一种特殊的酶是_。6【生物一选修3:现代生物科技专题】请根据现代生物工程技术回答下列问题：（1）基因工程技术中对已获得的目的基因，常采用PCR技术大量扩增。该技术的基本过程是：目的基因DNA受热变性后解链为单链，_与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶的作用下进行_，如此重复循环多次。（2）限制酶Smal能识别如下图，并在图中箭头位置切断DNA。用限
29、制酶Smal切割获取的目的基因需用_酶构建基因表达载体。（3）培育转基因小鼠除利用基因工程技术之外还需用到_、_等技术。（4）制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术，使_细胞与_细胞融合，融合成功的细胞经过筛选就是所需要的_细胞。参考答案1 （1）所有生物共用一套遗传密码 T-DNA 染色体DNA （2）聚乙二醇（或PEG） 脱分化和再分化 （植物）激素（生长素和细胞分裂素） （3）克服远缘杂交不亲和的障碍（打破生殖隔离）【解析】试题分析：分析甲方案：该方案采用基因工程技术育种，其中表示目的基因获取；表示将目的基因导入受体细胞；表示将转基因细胞培育成转基因植株，需要采用植物组织培养技术；分析乙方案
30、：该方案采用植物细胞工程技术育种，其中表示植物体细胞杂交过程，表示将杂交细胞培育成杂交植株，需要采用植物组织培养技术。（1）自然界中所有生物共用一套遗传密码子，因此一种生物的基因能在另一种生物体内表达；构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有T-DNA，它能把目的基因整合到受体细胞染色体DNA上。（2）诱导植物原生质体融合常用的化学试剂是聚乙二醇；过程中将杂交细胞培育成杂交植株需要采用植物组织培养激素，该技术包括脱分化和再分化两个过程，原理是植物细胞的全能性；在植物组织培养过程中，除了在培养基中添加营养物质外，还需要添加植物激素（生长素和细胞分裂素）。（3）与传统育种方法相比
31、，基因工程育种和植物细胞工程育种都能克服远缘杂交不亲和的障碍。【点睛】根据基因工程和植物体细胞杂交的知识点，分析图中的甲乙两个方案，获取信息，得出各个过程的名称是解题的关键。2 （1）质粒 启动子 终止子 （2）PCR DNA双链复制 （3）5%CO2 抗生素 （4）细胞核【解析】试题分析：图中为构建基因表达载体，为用胰蛋白酶处理动物组织使其分散成单个细胞，为获取成熟的去核卵母细胞，之后通过把含目的基因的受体细胞的细胞核移入去核的卵母细胞获得重组细胞，再经过早期胚胎的培育至桑葚胚或囊胚，通过胚胎移植到代孕母羊的子宫内，继续发育，直至分娩出转基因绒三羊。（1）基因工程中，运载工具包括质粒、噬菌体
32、及动植物病毒等，其中质粒是最常用的运载工具。目的基因要能成功表达，上游必需有启动子，下游必需有终止子，所以构建基因表达载体时，应将目的基因插在启动子和终止子之间。（2）扩增从基因文库中获得的KIF基因，可用PCR技术进行，其原理是 DNA双链复制。（3）在动物细胞培养过程中，为维持培养液的PH值，往往加入5% CO2。培养中为了抑制杂菌的污染，常常应加入一定量的抗生素。（4）成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行去核处理，以保证克隆后代的遗传性状主要来自于供体核。【点睛】本题有两个易错点：一是目的基因应插在启动子和终止子之间才可能表达；二是流程图中重组细胞的形成是将导入目的基因的细胞核移入去核的卵
33、母细胞。3 （1）病毒外壳蛋白基因 （2）农杆菌转化法 启动子 终止子 复制原点 （3）不敏感 正常代谢 （4）目的基因的检测与鉴定【解析】试题分析：熟记并理解基因工程的基本操作程序及其应用等相关的基础知识、形成清晰的知识网络，在此基础上结合题意作答。(1) 在基因工程中，使用最多的抗病基因是：病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因。(2) 常用农杆菌转化法将目的基因导入马铃薯等双子叶植物的受体细胞中。基因表达载体的基本结构包括目的基因、标记基因、终止子、启动子和复制原点等五部分。 (3)培育抗除草剂的转基因马铃薯，需通过修饰，使除草剂作用的靶蛋白对除草剂不敏感，或使靶蛋白过量表达，使植物吸收除草
34、剂后仍能正常代谢。 (4) 将目的基因导入受体细胞后，还需对转基因植物进行目的基因的检测与鉴定。4 （1）自我复制 抗原抗体杂交 （2）热稳定的DNA聚合酶（耐高温的TaqDNA聚合酶、耐热的DNA聚合酶、Taq酶） 一定的缓冲溶液 温度 （3） 内细胞团 接触抑制 胰蛋白酶【解析】试题分析：基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花
35、粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术，个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。（1）根据题干信息“载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制”可知，在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，科学家选择性地放弃了具有复制原点的载体检测目的基因是否表达产生蛋白质可采用抗原-抗体杂交技术（2）PCR技术是在较
36、高温度下进行的，因此该技术中需使用热稳定DNA聚合酶；PCR扩增目的基因的过程：高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；中温延伸：合成子链因此，与体内DNA复制相比较，PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制温度等条件。（3）胚胎干细胞来源于早期胚胎（囊胚的内细胞团）或原始性腺；在培养时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为接触抑制。如果想继续培养则是需要重新用胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培养，这样的培养过程通常被称为传代培养。【点睛】掌握基因工程的四个过程和动物细胞培养的过程是解答本题
37、的基础，在DNA复制的基础上分析PCR技术是解答本题的关键。5 （1）mRNA 反转录 不含有 （2）基因表达载体的构建 T4-DNA连接酶 （3） PCR DNA（双链）复制 热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）【解析】试题分析：基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的
38、基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。（1）cDNA文库是以mRNA为模板，通过反转录法建立的；由于启动子和终止子不能转录形成mRNA，因此以mRNA为模板逆转录形成的cDNA中不含有启动子、终止子等结构。（2）基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构建；根据酶的来源不同，DNA连接酶分为两类：EcoliDNA连接酶、T4DNA连接酶，这二者都
39、能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。（3）PCR技术可在体外大量扩增目的基因，其原理是DNA复制。PCR在较高温度下进行，因此该技术中需使用一种特殊的酶是热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）。【点睛】解答本题的关键是掌握基因工程的步骤以及每一个步骤的注意事项，关于反转录法获得目的基因的方法是解答本题的难点。6 （1） 引物 互补链的合成（或延伸） （2）T4 DNA连接(只答“DNA连接”不给分） （3）早期胚胎培养 胚胎移植 （4） (经抗原刺激)B淋巴 骨髓瘤 杂交瘤【解析】试题分析：熟记并理解基因工程的基本操作程序、动物细胞融合技术及其应用等相关
40、的基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上结合题意作答。 (1)利用 PCR技术大量扩增目的基因的基本过程是：目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶的作用下进行互补链的合成（或延伸），如此重复循环多次。(2) 题图显示：用限制酶Smal切割得到的是平末端，因此获取的目的基因需用T4 DNA连接酶构建基因表达载体。 (3)基因工程的操作是在生物体外进行的。培育转基因小鼠时，利用基因工程技术得到的转基因小鼠受精卵，还需用到早期胚胎培养和胚胎移植等技术，才能将其培育为转基因小鼠。(4) 制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术，使 (经抗原刺激)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，融合成功的细胞经过筛选就是所需要的杂交瘤细胞。
