1、课时达标训练(五)动物细胞培养和核移植技术(时间：25分钟；满分：50分)一、选择题(每小题2分，共20分)1下列关于动物细胞培养过程的叙述，错误的是()A制作细胞悬液时可以使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B悬液中分散的细胞很快贴附在细胞壁上，细胞贴壁体现了细胞的适应性C细胞进行有丝分裂，数量增加到相互接触时可以使用胃蛋白酶处理后分瓶培养D10代以内的细胞保持细胞正常的二倍体核型2核移植的受体细胞是M期卵母细胞，下列有关说法错误的是()AM期卵母细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质BM期卵母细胞体积比较大，操作起来相对容易C可以把供体细胞直接注入去核的卵母细胞中DM期卵母细胞对克隆动物的遗传特性
2、没有任何影响3利用下列细胞工程技术培育出的新个体中，只具有一个亲本遗传性状的是()组织培养细胞融合动物胚胎移植克隆羊技术(多利)A BC D4下列有关植物组织培养和动物细胞培养的比较中，叙述错误的是()A所用的培养基的成分基本相同B植物组织培养的结果是培育成植株，动物细胞培养的结果是培育成细胞系C植物组织培养的目的是为了快速繁殖和获得无病毒的植株，动物细胞培养的目的是为了获得细胞产物或细胞D植物组织培养的原理是细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞的增殖5动物细胞培养的特点是()细胞贴壁有丝分裂分散生长接触抑制减数分裂A BC D6动物细胞培养技术的用途有()生产有价值的生物制品，如病毒疫苗、
3、干扰素等生产基因工程技术中所用的受体细胞可以用于检测有毒物质培养的各种细胞可直接用于生理、病理、药理等方面的研究A BC D7下列关于克隆的说法不正确的是()A由一个受精卵发育为一个完整的个体叫做克隆B基因克隆是指某目的基因复制的过程C动物体细胞克隆要通过细胞核移植形成重组细胞D动物克隆的技术基础是动物细胞的培养8细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键，下列选择不合理的是()A选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞B选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率C选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗D选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得优质的突变体9(浙江高考
4、)实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示，下列叙述错误的是()A甲过程需要对实验小鼠进行消毒 B乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化 C丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型 D丁过程得到的细胞具有异质性10如图为克隆羊“多利”的培育过程示意图，下列表述不正确的是()A由于细胞核基因完全来自甲羊，所以克隆羊“多利”的性状与甲羊完全一致B克隆羊“多利”的培育过程中采用的生物技术有核移植C乙羊的去核卵细胞为重组细胞基因表达提供了细胞内的环境条件D此过程说明高度分化的动物细胞核也具有全能性二、非选择题(共30分)11(9分)现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质；
5、B品种牛则为B细胞核、B细胞质。(1)如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是：从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出_注入B品种牛的_卵母细胞，经过某种刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为_，将该胚胎移入代孕母牛的_中，通过培育可达到目的。(2)克隆牛的产生说明_具有全能性。克隆牛的性状主要表现_品种牛的特征。由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自_个亲本，细胞质几乎完全来自_性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成_(选填“相同”或“不同”)。12(13分)回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)在动物细胞培养过程中
6、，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是_。(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现_的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成_细胞，该种细胞的黏着性_，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量_。(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是_。(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到_期的细胞用显微镜进行观察。(5)在细胞培养过程中，通常在_条件下保存细胞。因为
7、在这种条件下，细胞中_的活性降低，细胞_的速率降低。(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作_进行攻击。13(8分)如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的过程图解，请据图回答下列问题：(1)图中所示的结构名称是_。(2)图中、所示的生物技术名称分别是_、_。(3)过程通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它_。(4)过程通常用作为受体细胞的原因是_。(5)图示方法与一般的异体核移植相比最大的优点是_，该种基因治疗所属类型为_。答 案1选C胃蛋白酶在pH7时就会变性失活，而细胞培养的pH一般是7
8、.27.4。2选D直接把供体细胞注入去核的卵母细胞中也是可以的，并且这样可以减少对细胞核的损伤，更有利于重组细胞的分裂。M期卵母细胞提供了线粒体，所含的基因仍然能够控制一些性状，所以克隆动物并不是100%的供体动物的复制。3选C组织培养是由同一种生物的细胞分裂分化形成新个体，属于无性生殖，因而新个体只有一个亲本的遗传性状。细胞融合是由两个细胞融合在一起，融合后的细胞同时具有原来两个细胞的遗传物质。动物胚胎移植本质仍是有性生殖，只不过当受精卵卵裂到一定阶段后找一个代孕场所，同样具有两个亲本的遗传性状。克隆羊技术中，多利的产生是通过把一乳腺细胞的细胞核分离出来移植到另一个去核的卵细胞中，发育形成的
9、，它的基因主要来自乳腺细胞的细胞核，也有少数基因来自卵细胞线粒体中的DNA。4选A动植物细胞培养时培养基的成分差别较大，动物培养基需加入血清，植物培养基需加入激素和琼脂。5选A动物细胞培养的过程是细胞有丝分裂的过程，在动物细胞培养的过程中存在细胞贴壁、接触抑制等特点。6选D动物细胞培养技术有许多用途，题干中所列内容均属于细胞培养技术的用途范围。7选A克隆是无性繁殖的过程，而受精卵是有性繁殖的产物，因而由一个受精卵发育为一个完整的个体不能叫克隆。8选A高度分化的动物体细胞的分裂增殖能力很低，因此很难培养获得大量细胞。胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易，因此选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提
10、高克隆动物的成功率。9选C图示甲过程是进行动物细胞培养的第一步获取动物组织，为了避免杂菌污染，应进行消毒处理，A正确；乙过程为获取单个动物细胞，可用胰蛋白酶消化，B正确；丙过程得到的细胞系通常为有限细胞系，遗传物质和染色体数未发生变化，大多数不具有异倍体核型，C错误；未经克隆化的细胞系具有异质性，D正确。10选A生物的性状是由细胞核基因和细胞质基因共同控制的，还要受环境的影响。题中“多利”的细胞核基因来自甲羊，而细胞质基因主要来自乙羊，所以“多利”羊的性状应与甲羊基本相同，同时受乙羊和环境的影响。11解析：动物细胞的全能性表达受到抑制，但克隆牛(羊)等动物的过程可以证明其细胞核仍具有全能性。克
11、隆牛的性状主要由核基因控制，因此主要表现为供核牛的性状。杂交牛中细胞核的遗传物质来自公牛和母牛两个亲本，而细胞质基因几乎完全来自母牛亲本，所以杂交牛和克隆牛的遗传物质不同。答案：(1)细胞核去核重组胚胎子宫 (2)动物体细胞核A两雌不同12解析：(1)在动物细胞培养时，当贴壁细胞分裂生长到相互接触时，就会停止生长繁殖，这种现象称为接触抑制。瓶壁上形成的细胞成单层排列，要使贴壁生长的细胞从瓶壁上分离下来，需用胰蛋白酶处理，溶解细胞间的蛋白质。(2)随着细胞传代次数增多，绝大部分细胞分裂停止，出现衰老或死亡现象，但极少数细胞因遗传物质发生改变，变成不死性(癌变)细胞，这种细胞的黏着性降低，细胞膜表
12、面糖蛋白的量减少。(3)用某种大分子染料，对细胞进行染色，活细胞具有生物活性(膜的选择透过性)，大分子染料不能进入活细胞内，所以活细胞不着色，而死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料可以进入细胞而着色。(4)观察细胞染色体数目的最佳时期为处于有丝分裂中期的细胞，此时染色体形态稳定数目清晰。(5)细胞最好在冷冻(超低温或液氮)条件下保存，温度低，细胞中酶的活性下降，代谢速率减慢，有机物损耗速率减慢，细胞存活时间延长。(6)给患者移植组织器官时，由于不同人的组织相容性抗原不同，会引起机体的免疫反应。这里移植的皮肤对于患者来说相当于抗原，患者的免疫系统会加以排斥。答案：(1)相互接触接触抑制单层(或
13、一层)胰蛋白酶(2)衰老甚至死亡不死性降低减少 (3)由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色)(4)中(5)冷冻(或超低温、液氮)酶新陈代谢(6)抗原13解析：(1)是从供体(患者)体细胞中分离出的细胞核。(2)表示核移植技术，表示转基因技术。(3)核移植的受体细胞一般是卵母细胞，原因是它体积大、易操作、营养物质丰富，而且还含有促进细胞核全能性表达的物质。(4)早期胚胎中的细胞分化程度低，全能性高，可诱导分化成各种组织器官。(5)图示培育出的细胞(胰岛B细胞)核遗传物质来自患者本人，所以移植后不发生免疫排斥反应；图中所示基因治疗是体外转基因，故所属类型为体外基因治疗。答案：(1)细胞核(2)核移植技术转基因技术(或基因工程、DNA重组技术、基因拼接技术)(3)含有促进细胞核全能性表达的物质(4)这些细胞分化程度极低，具有全能性，可以定向地诱导分化为各类细胞 (5)没有免疫排斥反应体外基因治疗
