1、酶的应用考点一酶活性及加酶洗衣粉(全国卷：2020全国卷)【任务驱动探究突破】任务1果胶酶在果汁生产中的作用(1)果胶酶(2)酶的活性与影响酶活性的因素酶的活性：酶催化一定化学反应的能力，可用在一定条件下，酶催化某一化学反应的_来表示。影响酶活性的因素：_、pH、酶的抑制剂等。(3)探究温度对果胶酶活性影响的实验实验方案：确定温度梯度探讨控制温度的方法和措施。实验程序：制备苹果泥苹果泥与果胶酶分别_将苹果泥与果胶酶混合保温过滤出果汁记录果汁量改变不同_后，重复上面实验。记录实验数据，并填入表格。得出结论：获得的果汁越多或果汁越澄清，表明果胶酶活性_。任务2探究果胶酶活性最适条件的实验设计(1)
2、思路方法：探究不同温度(或pH)对果胶酶活性的影响时，温度(或pH)作为自变量，应有效地控制其他无关变量，通过_来确定最适值。(2)衡量实验结果的指标：在相同时间内，滤出苹果汁的_多少；观察苹果汁的_。任务3探究果胶酶的用量(1)原理：本实验是一个探究性的定量实验，所测出的最适用量是在本实验的温度、pH条件下测出的，因而果胶酶的最适用量应标明_。(2)确定最适用量的方法：如果随酶用量的增加，过滤到的果汁的体积也增加，说明酶的用量_；当酶的用量增加到某个值后，再增加酶的用量，过滤到的果汁的体积不再改变，说明酶的用量已经足够，那么，这个值就是酶的_。任务4探讨加酶洗衣粉的洗涤效果中常用酶制剂的种类
3、及洗涤原理种类洗涤原理洗涤实例蛋白酶可将蛋白质水解为易溶解或分散于洗涤液中的_或_血渍、奶渍及各种食品类的蛋白质污垢脂肪酶把脂肪水解为较易溶解的_和游离的_食品的油渍、人体皮脂、口红淀粉酶能使淀粉迅速分解为可溶性的麦芽糖、葡萄糖等来自面条等污垢纤维素酶使纤维的结构变得蓬松，从而使渗入到纤维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触，达到更好的去污效果任务5探究不同种类加酶洗衣粉的洗涤效果(1)原理：酶的催化作用具有专一性，复合酶洗衣粉加入的酶制剂种类较多，与单一加酶洗衣粉相比，对各种污渍都有较好的洗涤效果。(2)变量(3)步骤步骤烧杯编号注入自来水500 mL500 mL500 mL加入物质(等量)
4、奶渍布奶渍布_控制水温37 _37 加入洗衣粉(等量)蛋白酶洗衣粉复合酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉用玻璃棒搅拌5 min5 min5 min观察实验现象颜色浅已消失颜色浅【考向分类对点落实】考向一影响果汁产量的物质、因素及探究方法12021长春市高三质量监测 20世纪70年代以来，燃料乙醇产业得以发展，2018年世界燃料乙醇产量已接近1 000亿升。丰富且不可食用的木质纤维素被作为潜在原料而用于乙醇生产，这首先需要获得可产生高产纤维素酶的纤维素分解菌。下图是从腐殖土中筛选纤维素分解菌的流程，请分析回答：腐殖土溶液选择培养将样品涂布到鉴别培养基上挑选产生透明圈的菌落(1)上图中步骤为_，鉴别培养基中应加
5、入_。(2)纤维素分解菌中含有纤维素酶，纤维素酶主要包括_三种组分，为进一步确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行_，纤维素酶活性的测定方法为_。(3)利用纤维素生产乙醇时，发酵罐中还需要接种_菌，发酵条件应控制的温度为_，通气情况为_。2果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一。果胶酶能够分解果胶，分解植物的细胞壁及胞间层。请完成以下有关果胶酶和果汁生产的问题：(1)在果汁生产中应用果胶酶可以提高_和_。(2)某实验小组进行了“探究果胶酶催化果胶分解的最适pH”的课题研究。本课题的实验步骤中，在完成“烧杯中分别加入苹果泥，试管中分别注入果胶酶溶液、编号、编组”之后，有下面两种操作：第一种：
6、将试管中果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥相混合，再把混合液的pH分别调至4、5、610。第二种：将试管中果胶酶溶液和烧杯中苹果泥的pH分别调至4、5、610，再把pH相等的果胶酶溶液和苹果泥相混合。请问哪一种操作更科学？_，其理由是_。如果用曲线图的方式记录实验结果，在现有的条件下，当横坐标表示pH，纵坐标表示_时，实验的操作和记录是比较可行的。根据你对酶特性的了解，分析图中最可能是实验结果的曲线图是_。若实验所获得的最适pHm，请你在所选的曲线图中标出“m”点的位置。考向二探讨加酶洗衣粉的洗涤效果32017江苏卷为了探究一种新型碱性纤维素酶的去污效能，研究性学习小组进行了相关实验，结果如图。由图中
7、实验结果能直接得出的结论是()A碱性纤维素酶对污布类型2的去污力最强B不同类型洗衣粉影响碱性纤维素酶的去污力C碱性纤维素酶对污布类型2、3的去污力不同D加大酶用量可以显著提高洗衣粉的去污力4加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。请回答下列问题：(1)由下图推知，该实验的目的是_。50 时加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量约是_%。(2)下表是添加脂肪酶的加酶洗衣粉和普通洗衣粉洗涤效果的实验记录，请据表回答问题。脸盆编号洗涤物(等量)洗涤温度洗衣粉(等量)水量洗净所需时间1油污布45 加酶2 L4 min2油污布45 普通2 L7 min3油污布5 加酶2 L9 min4油污布5 普通2 L8 min
8、该实验设计体现了_原则。若1号实验组洗净油污布所需时间接近7 min，最可能的原因是_。(3)下列衣料不适宜用添加蛋白酶的加酶洗衣粉洗涤的有_。棉织品毛织品腈纶织品蚕丝织品(4)根据以上实验结果，请写出两项提高加酶洗衣粉洗涤效果的措施：_。考点二固定化酶(细胞)的制备和应用(全国卷：2020全国卷)【任务驱动探究突破】任务1固定化细胞技术的概念及常用的固定方法(1)固定化酶和固定化细胞技术是利用_或_方法将酶或细胞固定在_的技术。(2)固定化酶或固定化细胞技术常用的固定方法_、_和_。一般来说，酶更适合采用_和_固定化，细胞多采用_固定化。任务2酵母细胞的固定化及发酵程序任务3固定化技术的比较
9、名称原理图示包埋法将酶或细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中化学结合法利用共价键、离子键将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到纤维素、琼脂糖等载体上物理吸附法通过物理吸附作用，把酶或细胞固定在活性炭、多孔玻璃等吸附剂表面任务4固定化酶与固定化细胞的比较固定化酶固定化细胞固定酶的种类一种一系列适用方法化学结合法、物理吸附法包埋法优点酶与反应物结合，又与产物分离，固定在载体上的酶可反复利用成本低，操作更容易缺点一种酶只能催化一种或一类化学反应可能导致反应效果下降实例固定化葡萄糖异构酶固定化酵母细胞【考向分类对点落实】考向一固定化酶(细胞)的制备原理及过程1某同学欲通过制备固定化酵母细胞来进行葡萄糖
10、溶液发酵实验，图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是进行葡萄糖发酵的装置(a是固定化酵母细胞，b是反应柱，c是分布着小孔的筛板)，下列叙述正确的是()A刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合以制备混合液B利用固定化酵母细胞进行发酵时，糖类的作用仅是作为反应底物C图1中X溶液为CaCl2溶液，将酵母细胞与海藻酸钠溶液混匀后快速注入CaCl2溶液中，会观察到有凝胶珠形成D图2装置中的长导管主要是排出CO2，以防止空气中的杂菌进入反应柱22016江苏卷为了探索海藻酸钠固定化对绿球藻生长的影响，以及固定化藻对含Zn2污水的净化作用，科研人员用筛选到的一株绿球藻进行实验，流程及结果如下。请回答下
11、列问题：图1图2(1)实验中的海藻酸钠作用是_，CaCl2的作用是_。(2)为洗去凝胶球上残余的CaCl2和其他污染物，并保持绿球藻活性，宜采用_洗涤。图1中1.0%海藻酸钠组培养24 h后，移去凝胶球，溶液呈绿色，原因是_。(3)为探索固定化藻对含Zn2污水的净化作用，应选用浓度为_海藻酸钠制备凝胶球。(4)图2中空白凝胶球组Zn2浓度下降的原因是_。结合图1和图2分析，固定化藻的实验组2448 h间Zn2浓度下降速度较快的主要原因是_；7296 h间Zn2浓度下降速度较慢的原因有_。考向二固定化酶(细胞)的应用3某一实验小组的同学欲通过制备固定化酵母细胞来进行葡萄糖溶液的发酵实验，实验材料
12、及用具齐全。(1)制备固定化酵母细胞常用_法。 (2)制备固定化酵母细胞的过程为使干酵母与_混合并搅拌，并使酵母菌活化； 将无水CaCl2溶解在蒸馏水中，配成CaCl2溶液；用酒精灯加热配制海藻酸钠溶液；海藻酸钠溶液冷却至室温后再加入已活化的酵母细胞，充分搅拌并混合均匀；用注射器将_的混合物缓慢滴入氯化钙溶液中。(3)该实验小组用如图所示的装置来进行葡萄糖发酵。从上端漏斗中加入反应液的浓度不能过高的原因是_。要想得到较多的酒精，加入反应液后的操作是_活塞1和_活塞2。 4下面是某同学所做的生成啤酒酿造实验，请根据其实验过程，回答相关问题：实验原理：利用固定化酵母菌分解麦芽汁，生成啤酒。实验步骤
13、：第一步：酵母细胞活化。取1 g干酵母，放入50 mL的小烧杯中，加蒸馏水10 mL，用玻璃棒搅拌均匀，放置1 h，使其活化。第二步：配制海藻酸钠溶液。取0.7 g海藻酸钠，放入另一只50 mL的小烧杯中，加蒸馏水10 mL，并搅拌直至溶化，用蒸馏水定容至10 mL。加热时，注意火候。第三步：海藻酸钠与酵母细胞混合。将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入活化的酵母细胞，充分搅拌均匀。第四步：用注射器以恒定的速度将上述混合液缓慢滴加到0.05 mol/L的CaCl2溶液，制成凝胶珠。第五步：倒去CaCl2溶液，加无菌水洗涤三次后，将凝胶珠放入500 mL三角瓶中，加入300 mL麦芽汁溶液，置于
14、25 下封口，发酵五天后，倒出发酵后的麦芽汁即为啤酒，品尝其口味。(1)酵母细胞活化的作用是_。第二步中注意火候指的是_。第三步中为什么要等海藻酸钠溶液冷却至室温，再加入活化的酵母细胞？_。(2)上述固定化细胞的方法称为_法，形成的凝胶珠颜色为_色。如果形成的凝胶珠颜色过浅，则配制的海藻酸钠溶液浓度_，如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则配制的海藻酸钠浓度_。(3)与固定化酶相比，该方法的优点是_。(4)要想反复使用固定化酵母细胞，实验过程要在严格的_条件下进行，同时要控制适宜的_和_。网络建构提升长句应答必备1果胶酶的活性受温度影响，处于最适温度时活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶
15、的活性呈正相关。2酶制剂中的蛋白酶、淀粉酶等并非是单一酶，而是复合酶，如蛋白酶制剂实际包括蛋白酶和某些肽酶，这些酶可将蛋白质水解成小分子肽和氨基酸。3酶的催化作用需要适宜的温度，用温水浸泡衣物可以缩短衣物的浸泡时间，加快洗涤。4一般来说，丝绸类的衣物不可以使用加酶洗衣粉洗涤，因为蛋白酶会水解蛋白质类的丝绸。5细胞的固定化要在严格无菌条件下进行，对制备的海藻酸钠溶液、CaCl2溶液以及注射器等器材要进行严格灭菌。6海藻酸钠溶液浓度过高，将很难形成凝胶珠；浓度过低，凝胶珠所包埋的酵母细胞数量少。翻阅教材品原味12020全国卷，37研究人员从海底微生物中分离到一种在低温下有催化活性的淀粉酶A3，并对
16、其进行了研究。回答下列问题：(1)在以淀粉为底物测定A3酶活性时，既可检测淀粉的减少，检测应采用的试剂是_，也可采用斐林试剂检测_的增加。(2)在A3的分离过程中可采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度，通常会在凝胶中添加SDS，SDS的作用是_和_。(3)本实验中，研究人员在确定A3的最适pH时使用了三种组分不同的缓冲系统，结果如图所示。某同学据图判断，缓冲系统的组分对酶活性有影响，其判断依据是_。(4)在制备A3的固定化酶时，一般不宜采用包埋法，原因是_ (答出1点即可)。高考教材人教选修1P66人教选修1P5022020全国卷水果可以用来加工制作果汁、果酒和果醋等。回答下列问题：(1)制作果汁
17、时，可以使用果胶酶、纤维素酶等提高水果的出汁率和澄清度。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、_(答出2种即可)。纤维素酶可以分解植物_(填“细胞膜”或“细胞壁”)中的纤维素。(2)用果胶酶处理果泥时，为了提高出汁率，需要控制反应的温度，原因是_。(3)现有甲乙丙三种不同来源的果胶酶，某同学拟在果泥用量、温度、pH等所有条件都相同的前提下比较这三种酶的活性。通常，酶活性的高低可用_来表示。(4)获得的果汁(如苹果汁)可以用来制作果酒或者果醋，制作果酒需要_菌，这一过程中也需要O2，O2的作用是_。制作果醋需要醋酸菌，醋酸菌属于_(填“好氧”或“厌氧”)细菌。高考教材人教选修1P
18、42人教选修1P2人教选修1P332016海南卷，30回答下列问题：(1)蛋白酶甲、乙、丙三者的活性随pH的变化如图所示。通常，用清水洗涤衣服上的新鲜血迹时，不应该使用开水，原因是_。若要去除衣服上的血渍，应选择含有_(填“蛋白酶甲”“蛋白酶乙”或“蛋白酶丙”)的碱性洗衣粉，理由是_。(2)某同学为了洗去衣服上的油渍，洗衣时在市售的蛋白酶洗衣液中添加脂肪酶，该同学的做法_(填“合理”或“不合理”)，理由是_。(3)已知溶液的pH可以影响酶活性，请推测pH影响某种蛋白酶活性的原因可能是其影响了酶和底物分子中_(填“羧基和氨基”“氨基和甲基”“羧基和甲基”或“甲基和甲基”)等基团的解离状态。高考教
19、材人教选修1P46同类选做找共性42020江苏卷产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：(1)常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是_(填编号)。编号物品培养基接种环培养皿涂布器灭菌方法高压蒸汽火焰灼烧干热臭氧(2)称取1.0 g某土壤样品，转入99 mL 无菌水中，制备成菌悬液，经_后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1 mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌_个。(3)为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行_育种。将辐照处理
20、后的酵母菌涂布在以_为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径_的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。(4)在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株_进行后续相关研究，理由是_。52019浙江4月选考回答与果胶和果胶酶有关的问题：(1)通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物，其原因除水果中果胶含量较高外，还有_。(2)为了获得高产果胶酶微生物的单菌落，通常对分离或诱变后的微生物悬液进行_。(3)在某种果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使_
21、。果汁生产中的残渣果皮等可用于果胶生产，通常将其提取液浓缩后再加入_，使之形成絮状物，然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。(4)常用固定化果胶酶处理含果胶的污水，其主要优点有_和可连续处理等。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等因素外，还需考虑的主要有_和_。课堂互动探究案4高效课堂师生互动提考能考点一【任务驱动 探究突破】任务1(1)多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶细胞壁(2)反应速率温度(3)水浴保温温度越高任务2(1)设置合理的温度(或pH)梯度(2)体积澄清度任务3(1)温度和pH(2)不足最适用量任务4小分子的肽氨基酸甘油脂肪
22、酸任务5(2)加酶洗衣粉的种类(3)奶渍布37 【考向分类对点落实】1解析：(1)结合分析可知，题中步骤为梯度稀释，鉴别培养基中应加入刚果红，刚果红能与纤维素形成红色复合物，随着纤维素被分解，在纤维素分解菌菌落的周围出现透明圈，进而将纤维素分解菌鉴别出来。(2)纤维素分解菌中含有纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，纤维素酶主要包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三种组分，为进一步确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵，纤维素酶活性的测定方法一般采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。(3)利用纤维素生产乙醇时，发酵罐中还需要
23、接种酵母菌，酵母菌在无氧条件下能将葡萄糖分解成酒精和二氧化碳，酵母菌适宜的生活温度为18 25 ，因此发酵条件应控制温度为18 25 ，并控制无氧条件。答案：(1)梯度稀释刚果红(2)C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶发酵产纤维素酶的实验一般采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定(3)酵母18 25 控制无氧条件2解析：(1)果胶酶可以分解果胶，从而提高果肉的出汁率和果汁的澄清度。(2)探究果胶酶催化果胶分解最适pH实验的关键是分别将果胶酶溶液和苹果泥调至一定的pH，然后把pH相等的这两种溶液混合，否则，在达到预定pH之前就会发生酶的催化反应，导致实验结果不准确。可见第二种操作能
24、够确保酶的反应环境从一开始便达到实验预设的pH环境，因此第二种的操作更科学。本实验自变量是不同的pH，因变量是果汁体积。如果用曲线图的方式记录实验结果，则横坐标表示pH，纵坐标表示果汁体积。在一定pH范围内，酶的活性随着pH的升高而逐渐增强，达到最适pH后，酶的活性随pH继续升高而逐渐下降，过酸或过碱会使酶永久失活，据此可推知，图甲最可能是实验结果的曲线图。过图甲曲线的峰值画一条与纵坐标相平行的线，该线与横坐标的交点即为m。答案：(1)出汁率澄清度(2)第二种第二种的操作能够确保酶的反应环境从一开始便达到实验预设的pH环境(或第一种的操作会在达到预定pH之前就发生了酶的催化反应)果汁体积甲3解
25、析：对污布类型2、3处理，洗衣粉类型、酶用量均相同，二者比较可以直接说明碱性纤维素酶对污布类型2、3的去污力不同。由图中实验结果不能直接得出A、B、D三项所述的结论，原因是它们都没有单一变量的对照实验来支持。答案：C4解析：(1)由题图可知，实验中存在两个变量：温度与碱性蛋白酶含量，即实验探究的是温度、碱性蛋白酶含量对去污力的影响。在50 时，洗衣粉的去污力在碱性蛋白酶含量为0.6%时达到最大。(2)由表中数据可知，1、3号为实验组，2、4号为对照组，1、2号与3、4号中只有是否加酶一个变量，因此该实验设计体现了对照原则和单一变量原则。若1号实验组洗净油污布所需时间接近7 min，最可能的原因
26、是酶已经变性失活。(3)蛋白酶可分解蛋白质，故毛织品、蚕丝织品等以蛋白质为主要成分的衣料不能用含蛋白酶的加酶洗衣粉洗涤。(4)用温水浸泡(提高酶的活性)、延长浸泡时间(延长酶的催化时间)、增加酶的用量等都可以提高加酶洗衣粉的洗涤效果。答案：(1)探究不同温度、碱性蛋白酶含量对去污力的影响0.6(2)对照、单一变量酶失活(3)(4)用温水浸泡；延长浸泡时间；增加洗衣粉的用量等(写出两项合理答案即可)考点二【任务驱动 探究突破】任务1(1)物理化学一定空间内(2)包埋法化学结合法物理吸附法化学结合法物理吸附法包埋法【考向分类对点落实】1解析：在制备固定化酵母细胞的实验中，将溶化好的海藻酸钠溶液冷却
27、至室温，再加入已活化的酵母细胞，否则高温会导致酵母细胞死亡；利用固定化酵母细胞进行发酵时，糖类除了作为反应底物外，还为酵母菌提供营养和能量；图1中X溶液为CaCl2溶液，将与酵母细胞混匀的海藻酸钠溶液用注射器缓慢滴加到CaCl2溶液中，会观察到有凝胶珠形成；装置中的长导管用于排出CO2，并能防止空气中杂菌进入反应柱。答案：D2解析：(1)海藻酸钠溶液在CaCl2溶液中会形成凝胶球，可包埋绿球藻。(2)用培养液或生理盐水洗去凝胶球上残余的CaCl2和其他污染物，可保持绿球藻的活性。溶液呈绿色，说明固定化的绿球藻数量少，原因是海藻酸钠浓度过低(凝胶球孔径过大)。(3)根据图1可知，浓度为2.0%的
28、海藻酸钠制备的凝胶球最有利于绿球藻的繁殖。(4)空白凝胶球可吸附Zn2，导致溶液中Zn2浓度下降；根据图1和图2分析，固定化藻的实验组2448 h间绿球藻数量增加最快，导致Zn2浓度下降速度较快，7296 h间绿球藻数量基本不再增加，且溶液中Zn2浓度已较低，导致Zn2浓度下降速度较慢。答案：(1)包埋绿球藻(包埋剂)与海藻酸钠反应形成凝胶球(凝固剂)(2)培养液(生理盐水)海藻酸钠浓度过低(凝胶球孔径过大)(3)2.0%(4)凝胶吸附Zn2绿球藻生长(增殖)速度快绿球藻生长(增殖)速度减慢，溶液中Zn2浓度较低3解析：细胞固定化常用包埋法，应用酵母细胞固定化发酵时，注意反应物浓度不应过高，过
29、高会使酵母细胞失水过多而死亡，发酵过程中应在无氧条件下，所以关闭活塞。答案：(1)包埋(2)蒸馏水海藻酸钠溶液和酵母细胞(3)葡萄糖溶液的浓度过高会使酵母细胞因失水过多而死亡关闭关闭4解析：(1)活化酵母细胞的目的是让休眠状态的酵母细胞恢复到正常生活状态。第二步中注意火候指的是用小火或间断加热，防止海藻酸钠焦糊。为防止高温杀死酵母细胞，第三步中要等海藻酸钠溶液冷却至室温，再加入活化的酵母细胞。(2)上述固定化细胞的方法称为包埋法，形成的凝胶珠颜色为浅黄色。如果形成的凝胶珠颜色过浅，则配制的海藻酸钠溶液浓度过低，如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则配制的海藻酸钠浓度过高。(3)与固定化酶相比，固
30、定化细胞的优点是成本更低，操作更容易；省去酶的分离、提纯等工序，同时酶的活性更稳定。(4)要想反复使用固定化酵母细胞，实验过程要在严格的无菌条件下进行，同时要控制适宜的温度和pH，以保证酵母细胞的活性。答案：(1)让休眠状态的酵母细胞恢复到正常生活状态用小火或间断加热防止高温杀死酵母细胞(2)包埋浅黄过低过高(3)成本更低，操作更容易；省去酶的分离、提纯等工序，同时酶的活性更稳定(4)无菌温度 pH课堂总结网络聚焦大概念网络建构提升固定化细胞历届真题分类集训培素养1解析：(1)淀粉酶A3可将淀粉水解为还原糖(葡萄糖、麦芽糖)。相同时间内，酶活性越高，淀粉的剩余量越少，淀粉的减少量越多。由于淀粉
31、遇碘液变蓝色，所以可根据蓝色的深浅判断淀粉剩余量，进而推知酶活性强弱；酶活性越高，还原糖的生成量越多，还原糖和斐林试剂在5065 水浴条件下反应，可出现砖红色沉淀，所以也可根据砖红色深浅判断还原糖的生成量，进而推知酶活性强弱。(2)SDS能使蛋白质发生完全变性，由几条肽链组成的蛋白质复合体在SDS的作用下会解聚成单条肽链，且SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。(3)由图可知，在pH为7.5时，TrisHCl缓冲系统中的淀粉酶A3活性比Na2HPO4KH2PO4缓冲
32、系统高；在pH为9.0时，TrisHCl缓冲系统中的淀粉酶A3活性比GlyNaOH缓冲系统高。即在pH相同时，不同缓冲系统条件下所测得的相对酶活性不同，说明缓冲系统的组分对酶活性有影响。(4)固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法(将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上)和物理吸附法。一般来说，酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化，而细胞多采用包埋法固定化。这是因为细胞体积大，而酶分子很小；体积大的细胞难以被吸附或结合，而体积小的酶容易从包埋材料中漏出。答案：(1)碘液还原糖(或答：葡萄糖)(2)消除蛋白质所带净电荷对迁移率
33、的影响使蛋白质发生变性(3)在pH相同时，不同缓冲系统条件下所测得的相对酶活性不同(4)酶分子体积小，容易从包埋材料中漏出2解析：(1)果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。纤维素是植物细胞壁的主要组成成分之一，纤维素酶可以将其分解。(2)用果胶酶处理果泥时，为了提高出汁率，需要控制反应的温度，这是因为温度对果胶酶活性有影响，在最适温度下酶活性最高，出汁率最高。(3)酶活性的高低可以用在一定条件下，单位时间内、单位体积中反应物的消耗量或者产物的增加量来表示。(4)利用获得的果汁制作果酒时需要用酵母菌，果酒发酵前期需要O2，O2可促进酵
34、母菌的有氧呼吸，使酵母菌大量繁殖。制作果醋需要醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，其对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。答案：(1)果胶分解酶、果胶酯酶细胞壁(2)温度对果胶酶活性有影响，在最适温度下酶活性最高，出汁率最高(3)在一定条件下，单位时间内、单位体积中反应物的消耗量或者产物的增加量(4)酵母促进有氧呼吸，使酵母菌大量繁殖好氧3解析：(1)新鲜血迹中含有蛋白质，开水会使血中的蛋白质变性而沉淀，难以清洗；若要去除衣服上的血渍，应选择含有蛋白酶丙的碱性洗衣粉，因为碱性条件下只有蛋白酶丙具有活性。(2)因为洗衣液中含有的蛋白酶会降解脂肪酶，所以
35、添加脂肪酶无效。(3)只有羧基和氨基可解离，pH通过影响酶和底物分子羧基和氨基的解离状态而影响酶的活性。答案：(1)开水使血中的蛋白质变性而沉淀，难以清洗蛋白酶丙碱性条件下只有蛋白酶丙有活性(2)不合理蛋白酶会降解脂肪酶(3)羧基和氨基4解析：(1)涂布器一般用干热灭菌法或灼烧灭菌法进行灭菌。(2)99 mL无菌水中加入1.0 g土壤制成的菌悬液为100 mL，取稀释10倍后的菌悬液0.1 mL涂布平板，平板上的平均菌落数为46，则每克土壤约含酵母菌460.110100 4.6105(个)。(3)辐射可以提高基因突变的频率，利用射线辐照进行的育种为诱变育种。本实验的目的是筛选产脂肪酶的菌株，所
36、用的培养基应该以脂肪(或油脂)为唯一碳源；最终形成的菌落直径越大，形成该菌落的菌株分解脂肪(或油脂)的能力越强，生产脂肪酶的能力也越大。(4)由图可知，相对于菌株A，菌株B的增殖速度更快，降解脂肪的能力更强；根据题干信息“在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白”可进一步推知菌株B处理含油废水时可得到更多的单细胞蛋白，故菌株B更适合作为后续研究的材料。答案：(1)(2)梯度稀释4.6105(或460 000)(3)诱变脂肪(或油脂)较大(4)B该菌株增殖速度快，单细胞蛋白产量高；降解脂肪能力强，净化效果好5解析：(1)通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物，其原因除水果中果胶含量较高外，腐烂的水
37、果中含产果胶酶的微生物也较多。(2)对微生物悬液进行涂布分离(或划线分离)可获得单菌落。(3)果胶能将植物细胞粘合在一起，果胶酶水解果胶可以使水果组织软化疏松及细胞受损。果胶不溶于乙醇，所以将其提取液浓缩后再加入95%乙醇使之形成絮状物，然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。(4)固定化酶工艺具有可提高酶的稳定性以及可连续处理等优点。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等因素外，还需考虑的主要有固定化的方法和固定化所用的介质。答案：(1)腐烂的水果中含产果胶酶的微生物较多(2)涂布分离(或划线分离)(3)水果组织软化疏松及细胞受损95%乙醇(4)提高果胶酶的稳定性固定化的方法固定化所用的介质
