1、动物细胞融合技术与干细胞技术(建议用时：40分钟)题组一动物细胞融合1下列关于动物细胞融合的说法，不正确的是 ()A细胞融合前要用酶解法分散成单个细胞B细胞融合的原理是细胞膜的流动性C融合后得到的杂交细胞能表现出两个亲本细胞的特点D融合后得到的杂交细胞具有两个细胞核D动物细胞融合前需用胰蛋白酶处理将组织细胞分散成单个细胞，A正确；动物细胞融合的原理是细胞膜具有流动性，B正确；融合后得到的杂交细胞获得了两个亲本的遗传物质，能表现出两个亲本细胞的特点，C正确；融合后得到的杂交细胞是单核细胞，D错误。2下列不属于细胞融合技术应用的是()A细胞遗传与细胞免疫的研究B生物新品种的培育C单克隆抗体的制备D
2、濒危动物的克隆D克隆濒危动物是体细胞核移植技术的应用，不属于细胞融合技术的应用。题组二单克隆抗体的制备技术3下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述正确的是()A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的T细胞B中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群D明确单克隆抗体制备过程的几个关键环节是准确解答本题的关键。是从小鼠脾脏中获得的能产生抗体的浆细胞，A项错误；中应该使用能促进细胞融合的促融剂，如聚乙二醇等，B项错误；同时具有从脾脏中分离出的浆细胞和骨髓瘤细胞的特性，C项错误；是经筛选培养获得的能产生特异性抗体的细胞群，D
3、项正确。4(多选)下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述正确的是()A图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原B利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法均可诱导细胞融合获得乙C用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长D丙需要进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁ABD图中从注射了甲的小鼠中获得的B细胞可以产生特异性抗体，所以甲为相应的抗原，A正确；利用聚乙二醇(化学法)、灭活的病毒(生物法)和电激(物理法)等方法均可诱导细胞融合获得杂交细胞，B正确；用特定的选择培养基对乙筛选，同种细胞的融合细胞和未融合细胞均不能生长
4、，只有融合的杂交细胞(杂交瘤细胞)能生长，C错误；杂交瘤细胞经过选择培养基的筛选并经单一抗体检测呈阳性后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞，即可制备单克隆抗体，D正确。5人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题：(1)制备单克隆抗体过程中要用到_和_技术。(2)制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于_，注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了_和_等细胞以及_，此过程属于特异性免疫中的_免疫。(3)此过程生产的单克隆抗体可以与_发生特异性结合，从而诊断早孕。(4
5、)在动物细胞原代培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_。而在体外培养杂交瘤细胞时，瓶壁上形成的细胞层数是_。解析(1)制备单克隆抗体的诱导过程有：正常小鼠进行免疫处理、动物细胞融合、杂交瘤细胞的筛选与培养、专一抗体检测阳性细胞培养、单克隆抗体的提纯。因此，该过程要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。(2)题图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，给小鼠注射的HCG相当于抗原，使小鼠产生记忆细胞和分泌抗HCG抗体的浆细胞，抗体是参与体液免疫的免疫活性物质。(3)抗体与抗原发生特异性结合，人绒毛膜促性腺激素(或HCG)相
6、当于抗原，可以与抗HCG单克隆抗体发生特异性结合。(4)在动物细胞培养过程中，当细胞表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。由于接触抑制，在动物细胞培养时，瓶壁上只能形成单层细胞，而在体外培养杂交瘤细胞时，具有无限增殖的特点，瓶壁上形成多层细胞。答案(1)动物细胞培养动物细胞融合(2)抗原浆细胞记忆细胞抗体体液(3)人绒毛膜促性腺激素(或HCG)(4)相互接触接触抑制一层(或单层)多层题组三干细胞技术及其应用6治疗性克隆有望解决供体器官的短缺和器官移植出现的排异反应等问题。下图表示治疗性克隆的过程，下列有关叙述不正确的是()A上述过程利用了动物体细胞核移植和动物细胞培
7、养等技术B上述过程充分说明动物细胞具有全能性C过程的完成离不开胚胎干细胞的增殖和分化D过程都发生了DNA的复制和蛋白质的合成B图示过程利用了动物体细胞核移植和动物细胞培养等技术。图示过程中，由于最终没有形成完整个体且移植的是病人体细胞的细胞核，故不能说明动物细胞具有全能性。过程都有细胞的增殖、分化，因此都会发生DNA的复制和蛋白质的合成。7下图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。请回答下列问题。(1)在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因_的结果。(2)某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的。骨髓移植的实质是将图中的_细胞移植到患者体内。(3)若要克隆某种哺
8、乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞、皮肤细胞、神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的_，其原因是_。(4)若某药物可抑制肝肿瘤细胞DNA的复制，使用该药物可使肝肿瘤细胞停留于细胞周期的_期。解析(1)细胞分化是基因选择性表达的结果。(2)骨髓是人体的造血组织，存在造血干细胞，骨髓治疗的实质是将题图的造血干细胞移植到患者体内。(3)克隆某种哺乳动物需要供体提供细胞核，而成熟的红细胞没有细胞核，所以不能作为供体。(4)DNA分子的复制在细胞分裂间期进行。答案(1)选择性表达(2)造血干(3)红细胞成熟的红细胞中无细胞核(4)间8利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗
9、体。下列相关叙述正确的是()A将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B体外培养单个B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C将等量B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者D经过抗原刺激后的B细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，产生杂交瘤细胞，克隆化培养并经抗体检测筛选后的杂交瘤细胞能产生特异性强、灵敏度高的单克隆抗体。SARS病毒感染者体内有SARS病毒核衣壳蛋白，用相应的单克隆抗体与之发生特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，D正确。9.(多选)右图为细胞融合的示意图，下列叙
10、述正确的是()A若a细胞和b细胞是植物细胞，需先脱分化再诱导融合Ba细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现Cc细胞的形成与a、b细胞膜的流动性都有关Dc细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因BC若a细胞和b细胞是植物细胞，应该先用酶解法去掉它们的细胞壁再诱导融合，A错误；无论是动物细胞还是植物细胞，两个细胞的融合都需要促融处理后才能实现，B正确；两个细胞融合成一个细胞，利用了细胞膜的流动性，C正确；c细胞同时具备了a细胞和b细胞中的所有基因，但是基因是选择性表达的，因此c细胞中基因不一定都能够表达，D错误。10在单克隆抗体制备中，关于杂交瘤细胞制备的叙述，正确的是()A可利用电激等物理
11、方法直接诱导两个细胞的融合B可利用细胞中染色体的数目和形态筛选出杂交瘤细胞C利用了细胞膜的流动性和基因重组等原理D用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体A诱导细胞融合通常有物理法、化学法、生物法等，电激和离心是常用的物理融合法，A正确；杂交瘤细胞的筛选需要使用特定的选择培养基，观察细胞染色体数目和形态只能判断细胞是否融合，B错误；杂交瘤细胞的制备利用了细胞膜的流动性，但不涉及基因重组，C错误；经选择培养基筛选出的杂交瘤细胞还需要进行克隆化培养和专一抗体检测，才能用于生产单克隆抗体，D错误。11下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”，一段时间后
12、被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列说法不正确的是()A单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的B活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程C在治疗中，应先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物导弹D单克隆抗体特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害C单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和B细胞融合形成的杂交瘤细胞合成和分泌的，A正确；活化阿霉素抑制DNA和RNA的合成，DNA合成要经过DNA的复制，RNA的合成要经过DNA的转录，B正确；根据图中信息可知，阿霉素的活化需要生物导弹携带的碱性磷酸酶，所以在治疗中，应先注射生物导弹再注射非活化磷酸阿霉素，但不能间隔时
13、间太长，因为没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除，C错误；单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备的特点，根据特异性强这一特点，在该过程中是针对肿瘤细胞的，所以能减轻阿霉素对正常细胞的伤害，D正确。12动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。现在已经广泛应用于多种学科的研究工作中，特别是新发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径。研究表明DNA合成有两条途径：“S途径”和“D途径”，淋巴细胞(浆细胞)有“S途径”和“D途径”，骨髓瘤细胞只有“D途径”，HAT培养液中氨基喋呤可以阻断DNA合成的“D途径”。下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。回
14、答下列问题：(1)_技术是单克隆抗体技术的基础。(2)单克隆细胞是指_。(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是_。(4)杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞的_的特点，又具备淋巴细胞的_的特点。(5)图示过程，有两次筛选。第一次是用HAT培养液筛选出杂交瘤细胞，那么淋巴细胞(浆细胞)在HAT培养液中不生长的原因是_，骨髓瘤细胞在HAT培养液中不生长的原因是_。解析(1)单克隆抗体技术的基础是动物细胞培养和动物细胞融合技术。(2)单个细胞增殖形成的细胞群为单克隆细胞。(3)与常规抗体相比，单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。(4)杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞的能在体外无限增殖和淋巴
15、细胞的能产生特异性抗体的特点。(5)淋巴细胞不增殖，而骨髓瘤细胞的DNA合成途径被氨基喋呤阻断而不能进行DNA复制，导致骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中生长。答案(1)动物细胞培养、动物细胞融合(2)单个细胞增殖形成的细胞群(3)特异性强、灵敏度高、可大量制备(4)在体外大量增殖(无限增殖)分泌特异性抗体(5)缺乏在体外培养液中增殖的能力其DNA合成途径被氨基喋呤阻断而不能进行DNA复制不能准确区分单克隆抗体制备过程中的两次筛选13以下是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤，其中对单克隆抗体制备的相关叙述不正确的是()从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞将X抗原注入小鼠体内，获得能
16、产生抗X抗体的B细胞将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞从腹水中提取抗体利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合A实验顺序应当是B过程中产生的多个杂交瘤细胞称为克隆C过程获得的细胞均可无限增殖D利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选C单克隆抗体制备的实验顺序：从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B细胞利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养从腹水中提取抗体，故为，A正确；过程进行有丝分裂产生多个杂交瘤细胞，保持了亲本的遗传性状，属于广义上的克隆，B正确；在细胞融合过程中，如果只考虑两两细胞的融合，有骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合，骨髓瘤细胞和B细胞的融合，B细胞和B细胞的融合，其中B细胞和B细胞的融合不能无限增殖，C错误；利用细胞融合生产单克隆抗体通常要经过两次筛选，第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，D正确。
