1、高考资源网（） 您身边的高考专家专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养一、选择题1下列有关培养基配制原则的叙述，正确的是()A任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子B碳源和氮源必须具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素C微生物的生长除受营养因素影响外，还受pH、O2、渗透压的影响D营养物质的浓度越高越好解析：选C培养基一般含有碳源、氮源、无机盐和水等，有的微生物还需要生长因子，A项错误；碳源和氮源必须具有一定比例，但碳元素的含量不一定最多，自养型微生物的培养基不需要碳源，B项错误；微生物的培养过程中除受营养因素影响外，还受到pH、O2、渗透压的影响，C项正确；营
2、养物质的浓度过高时，可能会造成微生物渗透失水死亡，D项错误。2下列叙述正确的是()A培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌解析：选A培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求而配制出的供微生物生长繁殖的营养基质；按不同的分类标准可有不同的种类和作用，其中固体培养基是在液体培养基里加入琼脂等凝固剂配制而成的，加水不能再变成液体培养基；单个细菌是不能用肉眼看见的，可以通过一定方法，培养出具有特定形态的由一个或一种细菌繁殖而来的菌落进行观察。3采用干热灭菌、灼烧
3、灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可分别杀灭哪些部位的杂菌()A接种环、吸管、培养基、接种室B吸管、接种环、培养基、接种箱C培养基、接种环、吸管、接种箱D培养皿、吸管、培养基、双手解析：选B干热灭菌是将灭菌物品放入干热灭菌箱内，在160170 下加热12 h，适用于耐高温且需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等；灼烧灭菌是利用酒精灯火焰的外焰灭菌，如接种针、接种环等；高压蒸汽灭菌用高压蒸汽灭菌锅，压力为100 kPa，温度为121 ，维持1530 min，主要用于培养基灭菌；紫外线照射适用于表面灭菌和空气灭菌，如接种室、接种箱、超净工作台等，使用前用紫外线照射约30
4、 min。4(2019山东师大附中模拟)有关平板划线操作不正确的是()A将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红B接种环在平板上划线位置是随机的C在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰D最后将平板倒置，放入恒温箱中培养解析：选B将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红，A项正确；接种环在平板上划线位置不是随机的，B项错误；在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰，C项正确；最后将平板倒置，放入恒温箱中培养，D项正确。5下列操作与消毒、灭菌无关的是()A接种前用肥皂清洗双手，再用酒精擦拭双手B接种前用火焰灼烧接种环(针)C培养基在50 左右时搁置斜面D接种时在酒精灯的火焰旁完成解析：选C在
5、培养微生物时，一定要建立“无菌”概念，因此在各步接种操作时都必须注意灭菌，这是获得微生物纯培养物的关键。对各种器具进行消毒和灭菌，常用的方法有化学消毒和物理灭菌两大类。题中用肥皂洗手、酒精擦拭属于消毒，火焰灼烧属于灭菌；培养基在50 左右时搁置斜面，因为培养基在50 左右时呈液态，温度降低时，培养基凝固，可形成固体斜面培养基。6做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是()A高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上解析
6、：选D高压灭菌加热结束时，应切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的指针指向0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品，A项错误；倒平板时应将培养皿打开一条稍大的缝隙再缓慢倒入培养基，B项错误；高温的接种环会杀死细菌，应等接种环冷却后再挑取菌落，C项错误；培养皿一般倒置放在培养箱中，用记号笔标记在皿底便于取出时分类，D项正确。7微生物(除病毒外)需要从外界吸收营养物质，并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列有关微生物培养的说法，正确的是()A纤维素分解菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的B培养基中的凝固剂，常常被微生物利用，因此需定时添加C培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有
7、利D生长因子是微生物生长必需的，而微生物本身合成这些物质的能力往往不足解析：选D纤维素分解菌是异养型微生物，其碳源为有机物，如纤维素等。硝化细菌是自养型微生物，其碳源为CO2，A项错误；加入培养基中的凝固剂，一般不能被微生物利用，只起到凝固作用，B项错误；培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水，将出现失水过多而死亡的现象，对生长不利，C项错误；生长因子是微生物生长必需的，而微生物本身合成这些物质的能力往往不足，D项正确。8. (2019黄冈调考)如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5，下列操作方法正确的是()A操作前要将接种环放在火焰旁灼烧灭菌B划线操作必
8、须在火焰上进行C在5区域中才可以得到所需菌落D在1、2、3、4、5区域划线的前后都要对接种环进行灭菌解析：选D在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法是在火焰的充分燃烧层灼烧，接种时划线操作是在火焰旁的无菌区进行的。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落。9(2019北京丰台一模)为探究大叶木姜子多糖的抑菌效果，研究人员将下列4种菌分别用无菌水稀释成菌悬液，于固体培养基上制成含菌平皿，在平皿上放置经不同浓度大叶木姜子多糖溶液浸泡23小时的滤纸片，培养一段时间后，测定各供试菌的抑菌圈直径，结果如表。相关叙述错误的是()大叶木姜子多糖的抑菌效果(mm)多糖浓度%金黄色
9、葡萄糖球菌酵母菌灰绿曲霉黑曲霉10.02.83.32.61.25.02.73.11.80.92.52.32.71.00.31.01.40.30.51.2A金黄色葡萄球菌与另外三种菌的主要区别是没有核膜B制备含菌平皿可用稀释涂布平板法或平板划线法C每个浓度每种菌重复多次实验，所得数据取平均值D大叶木姜子多糖对黑曲霉抑制效果最差解析：选B金黄色葡萄球菌属于细菌，没有核膜包被的细胞核，其余三种微生物都是真菌，A项正确；根据题干接种使用的是菌悬液且测定的是抑菌圈的直径，所以是使用稀释涂布平板法接种的，B项错误；为避免实验误差，每个浓度每种菌重复多次实验，所得数据取平均值，C项正确；黑曲霉在含有不同浓度
10、的大叶木姜子多糖的滤纸上产生的抑菌圈的直径最小，抑制效果最差，D项正确。10(2019运城期中)如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是()A步骤使用的培养基已经灭菌并调节过pHB步骤接种环经火焰灭菌后应趁热快速沾取菌液C到过程中，每次接种前后都需要对接种环进行灼烧处理D步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行解析：选B步骤表示倒平板，在倒平板之前培养基已经灭菌并调节过pH，A正确；步骤为用接种环沾取菌液，需在酒精灯火焰旁等接种环冷却后沾取，B错误；到过程中，每次接种前后都需要对接种环进行灼烧处理，C正确；步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行，以防被杂菌污染，D正确。11
11、(2019中山调研)下表所示为某微生物培养基的配方，有关叙述错误的是()成分含量成分含量NaNO33 gFeSO40.01 gK2HPO41 g(CH2O)30 g琼脂15 gH2O1 000 mLMgSO47H2O0.5 g青霉素0.1万单位A依物理性质划分，该培养基属于固体培养基；依用途划分，该培养基属于选择培养基B由培养基的原料可知，所培养微生物的同化作用类型是异养型，培养的微生物可以是酵母菌或毛霉C本培养基中青霉素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求D若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和NaNO3，并应加入尿素解析：选C由培养基中含有琼脂可推测其为固体培养基，由培养基
12、中含有青霉素可推测其为选择培养基；培养基中含有有机碳源，故所培养微生物的同化作用类型是异养型。由于青霉素能抑制细菌的生长而不抑制真菌的生长，故能培养酵母菌或毛霉；若用该培养基分离能分解尿素的细菌，则应以尿素为唯一氮源，即除去NaNO3，同时还应除去青霉素以防止其抑制目的菌的生长。12(多选)漆酶属于木质素降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。如图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是()A生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品B选择培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落C在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化D斜面培养基中含有大量营
13、养物，可在常温下长期保存菌株解析：选BC漆酶属于木质素降解酶类，生活污水中含木质素类的物质少，则能降解木质素的产漆酶微生物较少，故生活污水不是分离产漆酶菌株的首选样品，A项错误；产漆酶菌株可降解木质素，筛选培养基中应加入木质素来筛选产漆酶的菌株，可依据漆酶菌株的菌落特征挑出产漆酶的菌落，B项正确；在涂布平板上挑取的菌落可能含有其他杂菌，可再通过平板划线法进一步分离纯化，C项正确；对于需要长期保存的菌株，不适宜在常温下保存，应低温冷冻保存，D项错误。二、非选择题13为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板
14、法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过_灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_。(3)示意图A和B中，_表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中_的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高_的利用率。解析：(1)涂布接种前随机取若干灭菌后的空白平板
15、先行培养是检测培养基平板灭菌是否合格。(2)接种环进行灼烧灭菌，从上一次划线的末端开始划线的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)根据图示，B为稀释涂布平板法接种培养后的结果。(4)振荡培养能提高溶解氧含量，同时使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。答案：(1)检测培养基平板灭菌是否合格 (2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)B(4)溶解氧营养物质14(2019全国卷)回答下列与细菌培养相关的问题。(1)在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是_(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其
16、原因是_。硝化细菌在没有碳源的培养基上_(填“能够”或“不能”)生长，原因是_。(2)用平板培养细菌时一般需要将平板_(填“倒置”或“正置”)。(3)单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因_。(4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过_处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。解析：(1)葡萄糖只能为细菌提供碳源，硝酸钠为细菌提供无机盐，而蛋白胨既可以为细菌提供碳源，也可以为细菌提供氮源；由于不同的细菌生长繁殖的最适宜pH是不同的，因此制备培养基时要根据所培养的细菌的不同来调节培养基的pH；硝化细菌属于化能自养型微生物，其可以利
17、用氨氧化释放的能量将空气中的二氧化碳固定为有机物，因此硝化细菌可以在无碳培养基中生长。(2)用平板培养细菌时，一般需要将平板倒置培养，以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。(3)由于每一大类微生物都有其独特的细胞形态，因而其菌落形态特征也各异，因此根据菌落的形态、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物。(4)有些使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境。答案：(1)蛋白胨不同的细菌生长繁殖的最适宜pH不同能够硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源(2)倒置(3)在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征(4)灭菌15某学习小组为调查湖水中细菌的污染情况进行了如下相
18、关实验，实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、观察统计菌落数。(1)制备培养基时，在进行称量、溶化、定容后，灭菌之前还需进行的操作是_；对培养基进行灭菌，一般采用的方法是_。(2)整个微生物的分离和培养过程，一定要注意在_条件下进行。(3)图甲和图乙是采用两种接种方法接种培养后得到的菌落分布图，图甲对应的接种方法是_，图乙对应的接种方法是_。(4)为使该实验所得结果可靠，还应该实施的操作是_。(5)获取目的菌后如要临时保存，可将其接种在_上，等长出菌落后放在_的冰箱中保存。解析：(1)培养基的制作流程主要是：计算、称量、溶化、定容、调整pH、灭菌、倒平板。培养基一般采取高压蒸汽灭菌法灭菌。(2)微生物培养成功的关键是无菌操作。(3)接种微生物的方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法，据图分析，图甲对应的接种方法是稀释涂布平板法，图乙对应的接种方法是平板划线法。(4)实验还需要设置对照实验，即在另一平板上接种无菌水作为对照。(5)临时保存菌种时可以使用斜面固体培养基，待菌落长成后，将试管放入温度为4 的冰箱中。答案：(1)调整pH高压蒸汽灭菌法(2)无菌(3)稀释涂布平板法平板划线法(4)同时在另一平板上接种无菌水作为对照 (5)斜面固体培养基4 高考资源网版权所有，侵权必究！
