1、返回目录 细胞工程 专题2 返回目录 2.2 动物细胞工程2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体返回目录 课前 教材预案课堂 深度拓展课末 随堂演练课后 限时作业目录Contents 返回目录 1概念指_动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。2原理细胞膜的_。课前教材预案要点一 动物细胞融合两个或多个 流动性 返回目录 3诱导融合的方法(1)物理、化学方法：与植物体细胞杂交相同，如电激、聚乙二醇(PEG)等。(2)生物方法：_。灭活的病毒 返回目录 4过程：具有不同_的两个或多个细胞灭活的病毒PEG、电激等 _细胞。遗传信息 杂交 返回目录 5结果形 成 具 有 原 来 两 个 或 多
2、个 细 胞 遗 传 信 息 的_，称为_。6意义突破了有性杂交方法的局限，使_；为_开辟了新途径。单核细胞 杂交细胞 远缘杂交成为可能 制造单克隆抗体 返回目录 1传统抗体的制备(1)抗体概念：机体_产生的，并且能与该抗原发生_的具有_的球蛋白。(2)产生：浆细胞。要点二 单克隆抗体的制备受抗原刺激后 特异性结合 免疫功能 返回目录(3)分布：主要分布于血清中。(4)方法：向动物体内反复注射单一抗原，使之产生抗体，然后从该动物血清中分离抗体。(5)缺点：_、纯度低、_。产量低 特异性差 返回目录 2单克隆抗体的制备(1)存在的问题：B淋巴细胞(浆细胞)能产生抗体，但 _；骨 髓 瘤 细 胞 能
3、 无 限 增 殖，但_。(2)解决思路：将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合为_。不能无限增殖 不能产生抗体 杂交瘤细胞 返回目录(3)制备过程答案 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 杂交瘤细胞返回目录(4)杂交瘤细胞的特点：既能产生_，又能_。(5)单克隆抗体的特点：_、_，_。特异性抗体 无限增殖 特异性强 灵敏度高 并可能大量制备 返回目录 1作为诊断试剂具有准确、_、简易、_的优点。2用于治疗疾病和_要点三 单克隆抗体的应用高效 快速 运载药物 返回目录 思考：单克隆抗体制备过程中有两次筛选，其目的分别是什么？提示 第一次筛选是在B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后，筛选出B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融
4、合的杂交细胞。第二次筛选需先在多孔培养皿上进行，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，通过抗原与抗体的特异性反应，筛选出能产生所需抗体的细胞群。返回目录 课堂深度拓展考点一 动物细胞融合1对动物细胞融合过程的理解(1)细胞融合的过程包括细胞膜的融合、细胞质融合和细胞核融合，其中细胞膜的融合是细胞融合的先导，在细胞膜融合中体现出细胞膜具有流动性。返回目录(2)动物细胞融合完成的标志：来自不同细胞的两个或多个细胞核融合成一个细胞核。返回目录 2动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性细胞融合前的处理 用纤维素酶、果胶酶
5、去除细胞壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散诱导手段离心、电激、振动、聚乙二醇等诱导与植物体细胞杂交相比，还可用灭活的病毒诱导返回目录 比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合结果形成杂种植株形成杂交细胞，以生产细胞产品用途克服远缘杂交不亲和的障碍，扩展杂交亲本范围，培育新品种制备单克隆抗体、病毒疫苗、干扰素等意义突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能返回目录【例题1】下列对植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较，叙述正确的是()A动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法也完全相同B两者都可以跨越种属间的生殖隔离，突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能返回目录 C利用植物体细胞
6、杂交技术而发展起来的杂交瘤技术，为单克隆抗体的诞生开辟了新途径D目前科学家终于实现了两个植物物种间的体细胞杂交，得到了同时具有两个物种遗传物质的超级植物，并使它们的性状全部得以体现思维导引：返回目录 答案 B 解析 动物细胞融合可用灭活的病毒诱导，而植物原生质体的融合则不能使用此法，A项错误；利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为生产单克隆抗体开辟了新途径，C项错误；生物性状的体现是基因型与环境共同作用的结果，“超级植物”具有两个亲本的遗传物质，但性状不一定能全部表达，D项错误。返回目录【变式1】用于诱导动物细胞融合的病毒需灭活，灭活的目的是使病毒()A易于促进细胞的融合B不侵染细胞C易
7、被抗体消灭D没有了抗原结构返回目录 答案 B 解析 病毒灭活使其丧失感染性，但保留融合活性，使其能作用于细胞膜上的糖蛋白，促进细胞相互融合。返回目录 考点二 单克隆抗体1制备原理将能产生单一抗体但在体外不能大量增殖的B淋巴细胞与在体外能大量增殖的骨髓瘤细胞融合，得到既能产生单一抗体又能大量增殖的杂交细胞。返回目录 2制备过程返回目录 3单克隆抗体的应用(1)作为诊断试剂，如早早孕诊断试剂盒。(2)用于治疗疾病和运载药物单独使用：直接用于癌症或其他疾病的治疗(作为药物本身)。综合使用：与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成“生物导弹”，主要用于治疗癌症，也可少量用于其他疾病的治疗。返回目
8、录【例题2】单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后，要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是()B淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞返回目录 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞ABCD思维导引：返回目录 答案 A 解析 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后，要用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和自身融合的细胞都会死亡，只有融合的杂交细胞才能生长，因此不能存活增殖的细胞是。返回目录【变式2】单克隆抗体(简称单抗)实质上是单个浆细胞通过克隆形成的细胞群产生化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中，错
9、误的是()A单抗作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位B单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术C单抗制备的过程中必须至少经过两次细胞筛选返回目录 D只有用物理或化学法诱导，才能促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合答案 D 解析 诱导B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞的融合有三种方法：生物法(灭活的病毒诱导)、物理法(电刺激等)、化学法(聚乙二醇诱导)。返回目录 1基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞()AAAaaBAaBbCAabbDBBbb课末随堂演练返回目录 答案 C 解析 基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的病毒处理后，会
10、出现以下情况：基因型为Aa的细胞相互融合形成的细胞基因型是AAaa，基因型为Bb的细胞相互融合形成的细胞基因型是BBbb，基因型为Aa和Bb的细胞相互融合形成的细胞基因型是AaBb。返回目录 2下列关于动物细胞融合的说法，不正确的是()A动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程B动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞返回目录 C常用的诱导动物细胞融合的手段有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射D细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能答案 C 解析 A、B项是动物细胞融合和杂交细胞的概念，D项是细胞融合的意义，
11、C项中紫外线照射不能诱导细胞融合。返回目录 3科学家用灭活的病毒诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞，灭活病毒的作用是()A病毒比较小，可钻入细胞内B利用灭活病毒的抗原感染细胞，促使被感染细胞相互融合C灭活的病毒已失去感染活性，对各种动物细胞不造成破坏，但所保留的融合活性，使不同的动物细胞进行融合返回目录 D灭活的病毒带有目的基因，通过融合可以让杂交细胞带有目的基因答案 C 解析 根据教材信息可知，灭活的病毒失去了感染能力，但保留融合活性。返回目录 4研究单克隆抗体治疗癌症的思路是()A利用单克隆抗体特异性对抗癌细胞B以单克隆抗体作为抗癌药物杀死癌细胞C抗癌物质在克隆细胞中大量合成D
12、单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合答案 D 返回目录 解析 借助单克隆抗体的导向作用，将单克隆抗体跟抗癌药物结合，制成所谓的“生物导弹”，可以直达病灶部位，杀死癌细胞。返回目录 5单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞，其合成核酸的途径能被氨基嘌呤阻断。现将从预先注射了某种抗原的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞与上述骨髓瘤细胞混合，加入PEG促融后，再加入含氨基嘌呤的培养液。若将这些混合物分装于细胞培养板的小孔中培养(如图所示)，则小孔中的培养物不可能出现的结果是()返回目录 A细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阴性B细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阳性C没有
13、活细胞，产生抗体D没有活细胞，不产生抗体答案 C 返回目录 解析 在单克隆抗体的制备过程中，细胞的融合方式有骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合、骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合、B淋巴细胞和B淋巴细胞融合。只有活细胞才能产生抗体；B淋巴细胞和B淋巴细胞融合形成能产生抗体但不能分裂繁殖的融合细胞；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合后不能再增殖，也不能产生抗体；产生的杂交瘤细胞可能有多种，有可能出现抗体但抗体检测呈阴性的结果。返回目录 6下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。(1)_技术是单克隆抗体技术的基础。返回目录(2)在图中HAT培养基上，未融合的_和融合的_都会死亡，只有融合的杂交细胞才能生长。动物细胞融合除了采
14、用植物细胞原生质体融合常用的诱导方法外，还可以采用_诱导。(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最主要的优点是_。返回目录(4)选 出 的 杂 交 瘤 细 胞 既 具 备 骨 髓 瘤 细 胞 迅 速_的特点，又具备淋巴细胞_的特点，经 过 选 择 性 培 养 的 杂 交 瘤 细 胞，还 需 进 行_和_，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或在小鼠腹腔内增殖，从_或_中就可以提取出大量的单克隆抗体了。返回目录(5)淋巴细胞是由动物体_中的_细胞分化、发育而来的。解析 动物细胞融合技术最主要的应用就是制备单克隆抗体，动物细胞融合和植物体细胞杂交的不同点在于动物细胞融合可以使用灭活的病毒进行诱导。灭活是指使病毒失去感染能力，但是具有诱导细胞融合的能力。返回目录 答案(1)动物细胞培养(或细胞融合)(2)亲本细胞 具有同核的细胞 灭活的病毒(3)特异性强、灵敏度高，并可大量制备(4)在体外大量增殖 分泌专一抗体 克隆化培养 抗体检测 细胞培养液 小鼠腹水(5)骨髓 造血干返回目录 课后限时作业
