1、1回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是_。(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现_的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成_细胞，该种细胞的黏着性_，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量_。(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是_。(4)检查某种有毒物质是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到_期的细胞用显微
2、镜进行观察。(5)在细胞培养过程中，通常在_条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中_的活性降低，细胞_的速率降低。(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作_进行攻击。答案(1)相互接触接触抑制单层(或一层)胰蛋白酶(2)衰老甚至死亡不死性降低减少(3)由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色)(4)中(5)冷冻(或超低温、液氮)酶新陈代谢(6)抗原解析在动物细胞培养过程中，细胞会表现出接触抑制现象，此时是单层细胞。用胰蛋白酶可以使贴壁细胞从
3、瓶壁上分离开来。随着细胞传代培养代数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象，但极少数细胞可以连续增殖，有些细胞会因遗传物质改变而变成不死性细胞。由于活细胞的膜具选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，而死细胞的细胞膜丧失选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色。由于中期染色体形态固定、数目清晰，因此最好选用细胞分裂到中期的细胞用显微镜观察染色体数目。由于在冷冻超低温液条件下，细胞中酶的活性降低，细胞新陈代谢的速率降低，通常在此条件下保存细胞。机体把移植的皮肤组织当作抗原攻击，会发生排斥现象。2下图是克隆羊的培养过程示意图，请据图回答：(1)克隆羊D的繁殖方式是_。(2)D
4、羊的表现型与_羊相同，基因型是_，性别是_。(3)若培育克隆羊时，将B羊换成雄性，且基因型为Aa，得出克隆羊的性别将是_。答案(1)无性生殖(2)B；aa；雌(3)雄解析(1)克隆“colone”一词的希腊文原意是“一段树枝”。即用树枝繁殖的过程。根据已学的无性生殖的概念，可知此为营养生殖，即属于无性生殖。所以第(1)小题答案为无性生殖。(2)由于生物体性状主要由细胞核中遗传物质决定，细胞质中遗传物质量极少。因此，D羊的性状主要由细胞核决定，其基因型应与提供细胞核的B羊相同，性别也相同。(3)克隆羊的性别应与提供细胞核的羊的性别一致，因为性染色体存在于每个体细胞的细胞核中，所以，D羊的性别与B
5、羊一致。3下图是单克隆抗体制备过程示意图。据图回答问题：(1)通过过程得到的B淋巴细胞从小鼠体内分离出之前，应对小鼠进行的处理是_，该处理的实质是在小鼠体内发生_过程。(2)骨髓瘤细胞与进行原代培养的细胞相比较，核物质发生的主要变化是_，从而违背了“程序性细胞死亡”规则，打破了细胞产生与死亡的动态平衡。(3)培养瓶中的杂交瘤细胞在有丝分裂中期，核内DNA分子数染色体数_。(4)试设想运用生物工程其他领域的技术制备单克隆抗体的一条途径：_。答案(1)注射相应的抗原体液免疫(2)基因突变(或遗传物质发生了改变)(3)2:1(4)运用转基因技术制造含相应抗体基因的工程菌，并运用发酵技术获得单克隆抗体
6、4科学家利用细胞工程培育“白菜甘蓝”杂种植株，如图所示，请据图回答下列问题：(1)由D形成F过程所依据的原理是_，从本质 上讲，“白菜甘蓝”杂种植株具有的性状是_的结果。(2)若“白菜甘蓝”杂种植株为四倍体，则该植株的花粉经离体培养得到的植株是_倍体。(3)“白菜甘蓝”杂种植株的食用部分是叶，但叶又易受昆虫危害而影响产量，科学家又利用基因工程培育出带有抗虫基因的“白菜甘蓝”植株，请你设计实验，检测此植株的抗虫基因是否表达。取昆虫幼虫放到带有抗虫基因的“白菜甘蓝”植株甲上，再取等量生活状态基本一致的昆虫幼虫放在_植株乙上。适宜条件下培养一段时间后，分别观察_的生活情况。若_，说明甲植株的抗虫基因
7、未得到表达；若_，说明甲植株的抗虫基因得到表达。答案(1)细胞的全能性基因选择性表达(2)单(3)长势相似的普通“白菜甘蓝”昆虫幼虫甲、乙植株上昆虫幼虫均正常生活甲植株上昆虫幼虫死亡，乙植株上昆虫幼虫正常生活(、其他答案合理也给分)解析(1)DF的过程说明细胞具有全能性，杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果。(2)凡是由未受精的配子发育而成的个体都是单倍体。(3)应注意实验设计的对照原则、等量原则及单一变量原则。5(2011惠州)微生物细胞融合的方法与动植物细胞融合基本相同。下图是利用细胞融合技术培育能直接利用可溶性淀粉生产酒精的酵母菌No.220菌株过程示意图。(注：H28菌株可直接分解
8、可溶性淀粉，不能形成孢子；IFO1046菌株不能利用淀粉，可将葡萄糖酵解为酒精，能形成孢子)。试回答有关问题：(1)图中所示的生物技术是_。在研究中通常选用处于对数期的菌株作为实验材料，是因为该时期菌体_。(2)“去壁”的常用方法是_；去壁获得的原生质体形态呈球形，这体现了细胞膜_。(3)“诱导”过程主要是通过某些物质诱导原生质体形成新的细胞壁，直接参与此过程的细胞器是_。(4)试根据给予的信息设计简单方案，以筛选出糖化酵母菌No.220菌株。(提示：产孢培养基可以诱导IFO1046菌株产生孢子；孢子能耐受60的热处理)。答案(1)细胞工程新陈代谢旺盛，形态和生理特性稳定(2)酶解法具有一定的
9、流动性(3)高尔基体(4)将再生细胞接种在产孢培养基(含淀粉和单糖)上，培养一段时间以诱导IFO1046及其融合细胞产生孢子，在60下进行热处理灭菌；将上一步处理的培养基，在适宜条件下培养，获得菌株后，将菌种接种到仅以淀粉为碳源的培养基上，在适宜条件下培养一段时间，选择能生长的菌株即为能直接利用可溶性淀粉生产酒精的酵母菌No.220菌株。6(2011厦门)某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞、乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他
10、培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_。(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是_。细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_。(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长_。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可传代的次数更_。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需要_处理。(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_。答案(1)多(2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质维持培养液的pH(3)停止多胰蛋白酶(4)抗生素解析由题干可获取的信息有：试验材料是肝细胞。肝细胞有两种，一种是
11、肝肿瘤细胞，一种是正常的肝细胞。解答本题时需明确动物细胞培养的过程、条件及应用，再结合每小题作答。7(2011湘潭)科学家对鼠源杂交瘤抗体进行改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠人嵌合抗体的过程。请据图回答：(1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫的小鼠脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与_融合，形成_细胞，并通过体内培养或体外培养生产的单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于它的_，并可大量制备。(2)与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用_诱导融合。(3)生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞
12、，主要原因是_。(4)改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠人嵌合抗体，属于_工程的范畴。答案(1)骨髓瘤细胞杂交瘤特异性强和灵敏度高(2)灭活的病毒(3)浆细胞不能无限增殖(4)蛋白质8(2011北京西城)1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请根据图回答问题：(1)病原体注入小鼠体内后，要经过_细胞处理后形成抗原MHG复合体，才能被免疫细胞识别。(2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集，然后以_作诱导剂，使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养，获得的杂交瘤细胞具有_的特点。(3)单克隆抗体的特点是_。根据上图写出应用杂交瘤技术获得单克隆抗体的两种主要方法_。答案(1)吞噬(或巨噬)(2)灭活的仙台病毒或聚乙二醇既能产生特异性抗体，又能无限增殖(3)特异性强，纯度高(或：专一性强、灵敏度高)体外培养法和动物体内培养法解析抗原进入小鼠体内首先被吞噬细胞吞噬形成抗原MHG复合体，然后才能被免疫细胞识别。制备单克隆抗体时，细胞的融合可以用灭活的仙台病毒或者聚乙二醇，得到的杂交瘤细胞具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特点，既能无限增殖也能分泌特异性抗体。可以通过体外培养法和动物体内培养法获得单克隆抗体，这种抗体具有纯度高、特异性强的特点。
