1、考点规范练29微生物的利用、酶的应用1.下面是有关微生物的培养和分离实验,请回答下列问题。(1)培养大肠杆菌时必须进行无菌操作。实验前所需的各种器材如三角烧瓶、培养皿等需要经过法灭菌。(2)配制培养大肠杆菌的培养基时,根据“细菌喜荤,霉菌喜素”的规律,通常在培养基中加入作为营养物质,还需要考虑温度、渗透压和等条件。(3)大肠杆菌培养和分离的实验中,在LB液体培养基中进行。培养液经后,在LB固体培养基上进行,并将培养皿放在恒温培养箱中培养,可以获得下图效果。通常对获得的纯菌种可以依据的形状、大小等特征进行初步的鉴定。(4)微生物与人类的生活关系越来越密切,在制作果酒、果醋、泡菜的过程中,用到的主
2、要微生物分别是。A.酵母菌、乳酸菌、乳酸菌B.酵母菌、醋杆菌、乳酸菌C.乳酸菌、醋杆菌、酵母菌D.酵母菌、乳酸菌、醋杆菌2.尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响,但尿素只有通过土壤中某些细菌的分解作用,才能被植物吸收利用。某同学要分离出土壤中能分解尿素的细菌,并尝试进行计数,培养基配方如下:K2HPO4NaClH2O葡萄糖尿素酚红琼脂0.12 g0.12 g15 mL0.025 g2.0 g0.25 mg0.5 g请回答下列问题。(1)分解尿素的细菌都能合成,该种细菌在生态平衡中起到什么作用?。写出细菌分解尿素的方程式:。(2)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?
3、(填“能”或“不能”),原因是。(3)为了提高尿素肥效,可以将分解尿素的酶和尿素混合,制成“加酶尿素”,为了提高“加酶尿素”中酶的利用率,可采用技术。3.(2015浙江自选模块)某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂,开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究,其流程如下图所示。土样中的菌种筛选菌株鉴定优良菌株扩大培养植酸酶提纯植酸酶固定化植酸酶特性分析请回答下列问题。(1)土壤悬液首先经80 处理15 min,其目的是筛选出。(2)在无菌条件下,将经过处理的土壤悬液进行,然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到,其周围出现透明水解圈,圈的直径大小与强弱相关。(3)筛选获得的菌株
4、经鉴定后,将优良菌株进行液体扩大培养。培养时需要振荡,其主要目的是。液体培养基与固体培养基相比,不含有的成分是。(4)在合适条件下,将提纯的植酸酶与海藻酸钠混合后,滴加到一定浓度的钙离子溶液中,使液滴形成凝胶固体小球。该过程是对酶进行。A.吸附B.包埋C.装柱D.洗涤(5)温度与植酸酶相对酶活性的关系如图所示。下列叙述错误的是。A.测试温度中,固定化与非固定化植酸酶的最适温度分别为60 和45 B.测试温度范围内,固定化植酸酶的相对酶活性波动低于非固定化植酸酶C.固定化与非固定化植酸酶相比,相对酶活性在80%以上时的温度范围较宽D.65 时固定化与非固定化植酸酶的相对酶活性因蛋白质变性而位于最
5、低点参考答案1.答案:(1)高压蒸汽(2)蛋白胨(酵母提取物)pH(3)扩大培养稀释涂布分离倒置菌落(4)B解析:(1)微生物培养实验中的各种器材常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(2)蛋白胨营养丰富,常用于配制微生物培养基,培养基除了含有必需的营养物质,还要注意温度、渗透压和pH等条件。(3)LB液体培养基用于扩大培养,LB固体培养基用于分离,图中的菌落均匀分布,所以用的是涂布分离法;菌落特征是鉴定菌种的重要依据。(4)果酒发酵用到酵母菌,果醋发酵需要醋杆菌,泡菜制作主要需要乳酸菌和假丝酵母。2.答案:(1)脲酶参与了氮循环(或维持氮平衡)(NH2)2C=O+H2O2NH3+CO2(2)不能琼脂
6、是未被纯化的混合物,内含一定的含氮化合物,尿素不是唯一氮源,不能选择出只以尿素为氮源的微生物(3)固定化酶解析:(1)含有脲酶的细菌通过降解尿素为氨,获得生长所需的氮源,同时也起到维持生物圈中氮元素平衡的作用。(2)从培养基的成分看含有琼脂,因为琼脂是一种未被纯化的混合物,内含一定量的含氮化合物,不利于以尿素为氮源的细菌的筛选,所以不能分离出分解尿素的细菌。(3)固定化酶技术可以提高酶的利用率。3.答案:(1)耐高温菌株(2)稀释单菌落植酸酶的活性(3)供氧琼脂(4)B(5)D解析:(1)对含菌的土壤悬液首先经80 处理15 min,目的是筛选出耐高温菌株。(2)涂布前需对土壤悬液进行稀释处理,经培养后可观察到单菌落。植酸酶能水解植酸,使菌落周围出现透明水解圈,且圈直径大小与酶活性强弱有关。(3)菌株扩大培养时需要振荡的目的是增加氧气供应量,液体培养基不含有琼脂。(4)植酸酶与海藻酸钠混合后形成凝胶固体小球,这是对酶用包埋法进行固定化处理。(5)由图中两条曲线可见,65 时固定化植酸酶的活性不处于最低点。
