1、1转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有Pst、Sma、EcoR、Apa等四种限制酶切割位点。请回答：(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶_，对_进行切割。(2)培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有_，作为标记基因。(3)香蕉组织细胞具有_，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_。答案(1)Pst、EcoR含抗病基因的DNA、质粒(2)抗卡那霉素基因(3)全能性脱分化、再分化解析本题主要考查了基因工程及植物组织培养的相关内容。(
2、1)在构建表达载体时，要用相同的限制酶切割外源基因与运载体，以获得相同的末端，从而将两者相连。在选择限制酶时，两者都有此切割位点，且不能将目的基因破坏，故只能选择Pst、EcoR位点。(2)培养液中的卡那霉素抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，故要想培养香蕉愈伤组织，必须细胞中含有抗卡那霉素基因。所以能在此培养基上生长的细胞，都是具有抗卡那霉素基因，即具有表达载体A，具有目的基因，从而作出筛选。(3)植物组织培养原理为植物细胞的全能性。其过程要经历脱分化与再分化2人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制
3、备的流程之一如下图。请回答：(1)过程代表的是_。(2)过程构建A基因表达载体时，必须使用_和_两种工具酶。(3)过程采用的实验技术是_，获得的X是_。(4)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的_所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以疑似患者体内分离病毒与已知病毒进行_比较；或用图中的_进行特异性结合检测。答案(1)逆(反)转录(2)限制性核酸内切酶(限制性内切酶、限制酶)DNA连接酶(注：两空顺序可颠倒)(3)细胞融合杂交瘤细胞(4)A蛋白核酸(基因)序列抗A蛋白的单克隆抗体3(1)饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造
4、时，首先必须了解植酸酶的_，然后改变植酸酶的_，从而得到新的植酸酶。(2)培育转植酸酶基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是_。请简述获得转基因植株的完整过程。(3)为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过_转入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期可通过_移植方法，从而一次得到多个转基因猪个体。(4)若这些转基因动、植物进入生态环境中，对生态环境有何影响？_。答案(1)空间结构氨基酸序列(2)农杆菌转化法外源植酸酶基因农杆菌大豆细胞大豆植株再生鉴定(3)显微注射法胚胎分割(4)减少环境中磷的污染，但该基因可能扩散到环境中。解析
5、本题考查了基因工程，蛋白质工程，胚胎工程，生态工程的基本技术，并且深入考察基础知识，对蛋白质改造时，首先要知道蛋白质的结构有氨基酸序列构成的一级结构和折叠组装成的空间结构。转基因技术有四个基本步骤，经常采用农杆菌转入法，因为农杆菌容易侵染植物细胞，重组质粒被导入受体细胞时，经常用到显微注射法，而胚胎分割移植能快速繁育优良种畜，基因工程能够使个体表现出人们所需要的性状，减少环境中磷的污染，但可能会随个体的杂交扩散到环境中去，造成基因污染。4为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。(1)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所
6、用的限制性内切酶作用于图中的_处，DNA连接酶作用于_处。(填“a”或“b”)(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和_法。(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用_技术，该技术的核心是_和_。(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_作探针进行分子杂交检测，又要用_方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。答案(1)aa(2)基因枪(花粉管通道)(3)植物组织培养脱分化(去分化)再分化(4)耐盐基因(目的基因)一定浓度盐水浇灌(移栽到盐碱地中)解析限制酶可水解DNA分子中特定位点两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，DNA连接酶可催化两个脱氧核苷
7、酸分子之间磷酸二酯键的形成；运用农杆菌转化法、基因枪法或花粉管通道法将目的基因导入受体细胞之后，还需利用植物组织培养技术将受体细胞培养成植株。5农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系。请回答下列问题：(1)要获得该抗病基因，可采用_、_等方法。为了能把该抗病基因转入到棉花细胞中，常用的运载体是_。(2)要使运载体与该抗病基因连接，首先应使用_进行切割。假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该运载体连接的抗病基因分子末端是() (3)切割完成后，采用_将运载体与该抗病基因连接，连接后得到的DNA分子称为_。(4)再将连接得到的DN
8、A分子导入农杆菌，然后用该农杆菌去_棉花细胞，利用植物细胞具有的_性进行组织培养，从培养出的植株中_出抗病的棉花。(5)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是()A淀粉 B脂类C蛋白质 D核酸(6)转基因棉花获得的_是由该表达产物来体现的。答案(1)从细胞中分离化学方法人工合成Ti质粒(2)限制性内切酶(限制酶)A(3)DNA连接酶重组DNA(4)感染全能筛选(选择)(5)C(6)抗病性状解析基因工程有四步曲，解答本题时就紧扣这四步曲。获得抗病毒基因常用的方法是从细胞中直接分离目的基因或根据mRNA碱基顺序和蛋白质的氨基酸序列人工合成目的基因；在基因工程中，常用的运载体是质粒；可以先用限制性内切酶
9、把目的基因和运载体切出相同的黏性末端；再用DNA连接酶将运载体和目的基因连接起来，构成重组DNA分子；用导入重组DNA分子的农杆菌感染棉花细胞，并用组织培养的方法把这样的棉花细胞培育成个体，从中筛选出有抗病性状的棉花；最后进行鉴定，可把普通棉和抗虫棉在同等条件下让害虫吞食，观察其效果即可。6在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：(1)A过程需要的酶有_。(2)B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是_。(3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外
10、，还必须加入_。(4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用_作为探针。(5)科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。将转基因植株与_杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为11。若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为_。若将该转基因植株的花药在卡那霉素型培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占_%。答案(1)限制性核酸内切酶和DNA连接酶(2)具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存(3)卡那霉素(4)放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因(5)非转基因植株31100解析A过程为目的
11、基因与运载体相结合的过程，需要同一种限制性核酸内切酶和DNA连接酶；B过程为目的基因导入受体细胞过程，目的基因是否导入受体细胞需检测标记基因，在培养过程中，质粒能进行复制并能稳定保存；C过程加入卡那霉素对含卡那霉素抗性基因的细胞进行选择；D过程用含放射性同位素标记的抗虫基因做探针检验植株中是否含有抗虫基因；转基因植株相当于杂合子，与非转基因植株杂交，后代两种性状比例为11，转基因植株自交，后代比例为31 ，花药中含抗卡那霉素基因和不含抗卡那霉素基因的比例虽然为 11，但在卡那霉素的选择下，后代均为抗卡那霉素的植株。7就PCR技术回答有关问题：(1)PCR技术已经走入人们的生活，例如亲子鉴定、刑
12、侦破案等都用到。PCR技术的基础知识是DNA复制，辨认细胞内DNA复制的示意图，请指出1、2、3、4代表的物质：1_2._3._4._(2)比较PCR技术和DNA复制过程，完成表格：PCR技术DNA复制引物解旋答案(1)RNA引物DNA聚合酶DNA解旋酶新合成的子链DNA(2)PCR技术DNA复制引物DNA单链RNA引物解旋温度DNA解旋酶解析(1)PCR技术涉及到DNA解旋酶、DNA聚合酶、RNA引物等。(2)通过比较的方法，分析PCR技术和DNA复制的不同。8(2011中山)下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答：(1)在基因工程中，AB为_技术，利用的原理是_，其中为_过程。(2)BC为转基因绵羊的培育过程，其中用到的生物技术主要有动物细胞培养和_，在动物细胞培养过程中，需让培养液中含有一定量的CO2，其主要作用是_。(3)BD为抗虫棉的培育过程，其中过程常用的方法是_，要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体生物学水平上的鉴定过程：_。答案(1)PCRDNA分子复制DNA解旋(2)胚胎移植维持培养液的pH(3)农杆菌转化法让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定其是否具有抗虫性状。解析注意结合教材分析解答。
