1、专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养1不同培养基的具体配方不同，但一般都含()A碳源、磷酸盐和维生素B氮源和维生素C水、碳源、氮源和无机盐D碳元素、氧元素、氢元素、氮元素解析：培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还应考虑pH、特殊营养物质及O2等条件。答案：C2下列关于微生物的培养和分离的叙述中，不正确的是()A细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增B噬菌体或大肠杆菌可在蛋白胨培养基中增殖C灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的杂菌D稀释涂布法分散细菌得到单菌落的效果更好解析：细菌繁殖方式是二分裂方式，噬菌体是没有细胞结构的病毒，需要在活细胞中才能存活，在蛋白胨培养基中不能
2、增殖；灭菌目的是防止杂菌和培养菌发生竞争。答案：B3制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是()A计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D计算、称量、灭菌、溶化、倒平板解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，应先根据需要计算各成分用量，然后称量、溶化、灭菌、倒平板。答案：C4下列操作与消毒或灭菌无关的是()A接种前用火焰灼烧接种环B接种前用酒精擦拭双手C将平板倒置，放入培养箱中培养D接种在酒精灯的火焰旁完成解析：接种用具、器皿上以及空气中都有微生物，都有导致污染的可能，必须严格消毒、灭菌。A、B、D三项都属于实验操作过程中的消毒或灭菌。将平板倒置，放
3、入培养箱中培养是为了防止杂菌污染，不属于消毒或灭菌。答案：C5下表是从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。请回答下面的问题。试剂用量试剂用量牛肉膏5 g琼脂20 g胨10 g水1 000 mLNaCl5 g(1)培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、_和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是_。培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行_处理。(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是_和_。(3)假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？(列举两项)_解析：(1)培养微生物的培养基中一般含有水、无机盐、碳源、氮源和生长因子。牛肉膏、蛋白胨既是碳源又是氮源
4、；培养基在接种前必须灭菌处理。(2)微生物的接种方法包括平板划线法和稀释涂布平板法两种。(3)多种因素都会导致接种的菌种密度较大，没有形成单一的菌落。答案：(1)氮源牛肉膏和蛋白胨灭菌(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌又接着划第二次；培养过程灭菌不严格，受到微生物的污染A级基础巩固1下列有关培养基成分及其特殊要求的叙述，正确的是()A培养基中必须添加碳源B培养基中必须添加维生素C培养厌氧微生物需要提供无氧的条件D培养霉菌时需要将pH调到碱性解析：培养以CO2作为碳源的自养微生物时，培养基中不需添加碳源，A错误；不同微生物的营养需求不同，
5、培养基中不一定需要添加维生素，B错误；培养厌氧微生物需要提供无氧的条件，C正确；培养霉菌时需要将pH调到酸性，D错误。答案：C2下面对微生物培养中灭菌的理解不正确的是()A防止杂菌污染B灭菌就是杀死培养基中的杂菌C培养基和培养设备都必须进行灭菌D灭菌必须在接种前解析：灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。答案：B3用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是()A未接种的选择培养基B未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D接种了的选择培养基解析：将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，
6、因此，用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照实验遵循的原则之一是单一变量，所以与选择培养基一样接种、培养。答案：C4自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别在于()A碳源B氮源C无机盐 D生长因子解析：自养型微生物主要包括进行光合作用或进行化能合成作用的微生物，他们能够利用CO2来合成自身所需的有机物；而异养型微生物主要是直接利用外界的有机物来合成自身所需的有机物，所以他们培养基的主要差别就在于自养型微生物主要是利用无机物中的碳，而异养型微生物主要是利用有机物中的碳。答案：A5下列制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是()A操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B将称好的牛肉膏连同称量纸
7、一同放入烧杯C将培养基冷却至50 左右时进行倒平板D将平板冷却凝固约510 min后将平板倒过来放置解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，顺序不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏融化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。将培养基冷却至50 ，用手触摸锥形瓶感觉刚刚不烫手时倒平板，平板冷却后还需倒置。答案：A6如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是()A操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B划线操作应在酒精灯火焰上进行C在5区域中才可以得到菌落D在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌解析：接种环要在火焰上灼烧灭菌
8、，A错误；划线操作应在酒精灯火焰旁进行，B错误；在5区域可能获得所需的菌落，4区域也有可能获得，C错误。每次划线前都要灼烧灭菌，防止杂菌污染，D正确。答案：DB级能力训练7下表为牛肉膏、蛋白胨培养基的成分列表，据此回答：成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5 g1.0 g0.5 g100 mL(1)蛋白胨在培养基中的作用是_。(2)要用此材料配制观察细菌菌落状况的培养基，还需添加的成分是_。(3)表中各成分含量确定的原则是_。(4)培养基配制好后，灭菌前应进行的工作是_。(5)从配制培养基到培养完成，所采用的防止杂菌污染的具体操作事项有_(答出两点即可)。(6)如果是用试管培养微生物，在培养
9、基凝固前要搁置斜面，其目的是_。将其放入_冰箱里保藏，但这种方法的保存时间不长，菌种容易被污染或产生变异。对于需要长期保存的菌种，需要放在_的冷冻箱中保存。答案：(1)提供碳源和氮源(2)琼脂(凝固剂)(3)所培养微生物对各营养成分的需要量(4)调整pH(5)高压蒸汽灭菌、灼烧接种环、酒精棉擦手、棉塞塞试管口、在火焰旁接种(6)扩大接种面积4208科学家发现，在微生物M(单细胞)产生的脂肪酶作用下，从地沟油中提取的植物油与甲醇反应能够合成生物柴油。(1)用培养基培养微生物时，培养基中应有_、_、_和_等营养，同时还必须满足微生物生长对_、_、_的要求。在筛选产脂肪酶的微生物M时，应用_培养基，
10、可以在培养基中添加_作为唯一碳源。(2)培养基灭菌采用的最适方法是_法。(3)图示是采用纯化微生物M培养的两种接种方法接种后培养的效果图，过程一的接种方法是_，过程二的接种方法是_，此方法计数的微生物M的数目_(填“”“”“”)实际活菌数，接种后应注意培养皿要_放置。解析：(1)用培养基培养微生物时，培养基中应有碳源、氮源、水、无机盐等营养，同时还必须满足微生物生长对特殊营养物质、环境条件等的要求。在筛选微生物M时，应用选择培养基，在培养基中添加植物油作为唯一碳源。(2)培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法。(3)过程一的接种方法是平板划线法，过程二的接种方法是稀释涂布平板法，此方法计数的
11、微生物M的数目要小于实际活菌数，接种后应注意培养皿要倒置放置，防止水珠落下，污染培养基。答案：(1)碳源氮源水无机盐特殊营养物质pH氧气选择植物油(2)高压蒸汽灭菌(3)平板划线法稀释涂布平板法倒置9为了获得纯度高的大肠杆菌，需要对大肠杆菌进行培养和分离。培养大肠杆菌一般用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。(1)培养大肠杆菌，配制固体培养基的基本步骤：计算称量_倒平板。(2)称量时，由于牛肉膏比较黏稠，可以用_挑取，放在_上称量。由于牛肉膏和蛋白胨_，称量时动作要迅速，称量后要及时盖上瓶盖。(3)在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上的大肠杆菌能生长，说明培养基含有_等大肠杆菌生长所需的营养要素。(4)微生物纯化培
12、养可以通过多种接种方法如_和_等，使大肠杆菌在固体培养基上形成单个_，从而获得纯菌株。解析：配制牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的基本步骤：计算称量溶化灭菌倒平板。称量时，可用玻璃棒挑取，放在称量纸上称量，称量时动作要迅速。牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中含有大肠杆菌所需要的碳源、氮源、无机盐、水等营养要素，所以常用来培养大肠杆菌。微生物纯化培养的接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，可使大肠杆菌在固体培养基上形成单个菌落，从而获得纯菌株。答案：(1)溶化灭菌(2)玻璃棒称量纸容易吸潮(3)碳源、氮源、无机盐、水(4)平板划线法稀释涂布平板法菌落10炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两
13、端截平，呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。(1)细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。(2)细菌鉴定：实验流程如下图所示。对配制的液体培养基等需采用_法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为_(填“无机碳”或“有机碳”)。挑选可疑菌落制片后，用_观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。接种可疑菌后，在温度为35 的环境中培养24 h，液体培养基变浑浊，原因是_。对照组试管中应加入_，与实验组同时培养6 h后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_(填“高”或“低”)，则可确定疑似患者被炭疽杆菌感染；反之，则排除。对排除的疑似患者及易感人群，可
14、接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有_。解析：(2)培养微生物的培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌；由于炭疽杆菌是异养型微生物，培养基中应加有机碳作碳源。炭疽杆菌呈竹节状排列，需借助显微镜观察。接种培养后，液体培养基由澄清变浑浊是细菌大量繁殖所致。实验应遵循单一变量原则和等量原则，实验组加入生理盐水配制的澄清噬菌体液，对照组应加入等量的生理盐水；若疑似患者被炭疽杆菌感染，则培养6 h后，实验组中的炭疽杆菌由于噬菌体侵染而大量裂解死亡，浑浊度会明显低于对照组。接种疫苗后，机体通过体液免疫产生抗体，与此相关的细胞有吞噬细胞、T细胞、B细胞和浆细胞。答案：(
15、2)高压蒸汽灭菌有机碳显微镜细菌大量繁殖等量的生理盐水低吞噬细胞、浆细胞11空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：配置培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；制作无菌平板； 设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作； 将各组平板置于37恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题：(1)该培养基中微生物所需的氮来源于_。若要完成步骤，该培养基中的成分X通常是_。(2)步骤中，实验组的操作是_。(3)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了_现象。答案：(1)牛肉膏、蛋白胨琼脂(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间(3)污染
