1、专题2 微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养课时过关能力提升基础巩固1.在微生物培养过程中,需要对培养基等进行灭菌,其标准是()A.杀死所有的病原微生物B.杀死所有的微生物的细胞C.杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子D.使病原菌不生长解析:灭菌是指利用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。答案:C2.下列有关倒平板的叙述,错误的是()A.在酒精灯的火焰旁进行操作B.将打开的锥形瓶瓶口迅速通过酒精灯的火焰C.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌面上D.待平板冷却凝固后需要倒过来放置解析:整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵,因此,应在酒精灯的火焰旁进行操作,打开的锥形瓶瓶口应迅速通
2、过酒精灯的火焰。培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙进行操作,不能将培养皿盖完全打开。平板冷却凝固后需要倒过来放置。答案:C3.下列有关微生物培养的叙述,正确的是()A.培养基一般都含水、碳源、氮源和无机盐 B.涂布接种时,涂布器应在干热灭菌箱中灭菌冷却后再使用C.纯化培养时,培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养D.观察菌落时,应将培养皿盖拿掉后在显微镜下进行观察计数解析:涂布接种时,涂布器应在酒精灯火焰引燃灭菌,冷却后再使用;用液体培养基培养微生物时,应放在摇床上,培养皿中的是固体培养基,应倒置放在恒温培养箱内培养;菌落肉眼可见,不需要借助于显微镜。答案:A4.下列操作与消毒或灭菌无关的是()
3、A.接种前用酒精灯的火焰灼烧接种环B.接种前用酒精擦拭双手C.将平板倒置,放入培养箱中培养D.接种在酒精灯的火焰旁完成解析:接种用具、器皿上以及空气中都有微生物,都有导致污染的可能,必须严格消毒、灭菌。A、B、D三项都属于实验操作过程中的消毒或灭菌。将平板倒置,放入培养箱中培养是为了防止杂菌污染,不属于消毒或灭菌。答案:C5.微生物培养是微生物工程中的基础技术。下列相关叙述正确的是()A.病毒和细菌的培养基成分相同B.平板划线法中的划线是连续进行的C.微生物培养基中并不都必须添加碳源或氮源D.在培养的过程中,细胞种类、数目都不断地增加解析:病毒是寄生生物,在活细胞中才能进行生命活动;平板划线法
4、是为了稀释细菌,划线间断进行;微生物培养基根据需要添加相应的碳源和氮源;在培养的过程中,细胞的数目不断地增加,种类不增加。答案:C6.防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是()A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境解析:接种环等金属用具应放在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰处灼烧灭菌。答案:B7.下列关于菌种保藏的叙述,错误的是()A.菌种保藏的目的之一是保持菌种
5、的纯净B.固体斜面培养基可用于菌种的临时保藏C.菌种的长期保存一般采用甘油管藏法D.甘油管藏菌种在-20 条件下进行,因此对甘油可不必灭菌解析:采用甘油管藏法保存菌种时,需对甘油灭菌,以避免杂菌污染。答案:D8.下列是与微生物培养有关的问题,请回答下列问题。(1)某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水,其中凝固剂是,碳源是,氮源是。从同化作用类型看,用该培养基培养的细菌属于。(2)将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中,适宜条件下培养,定时取样测定菌体数目,以时间为横坐标,以菌体数目的对数为纵坐标,可以得到细菌的曲线。该曲线中以菌体数目
6、的对数作为纵坐标的原因是。解析:(1)在该细菌固体培养基组成成分中,凝固剂是琼脂,碳源是葡萄糖,氮源是尿素。由于该细菌以有机物(葡萄糖)作碳源,故从同化作用类型看,该细菌属于异养型。(2)细菌的增长曲线反映了细菌群体从开始生长到死亡的动态变化过程。答案:(1)琼脂葡萄糖尿素异养型(2)增长培养中的细菌数量以指数形式增长,取对数便于反映细菌群体的生长规律9.为了获得纯度高的大肠杆菌,需要对大肠杆菌进行培养和分离。培养大肠杆菌一般用牛肉膏蛋白胨固体培养基。(1)培养大肠杆菌时,配制固体培养基的基本步骤是计算称量倒平板。(2)称量时,牛肉膏由于比较黏稠,可以用挑取,放在上称量。由于牛肉膏和蛋白胨,称
7、量时动作要迅速,称后要及时盖上瓶盖。(3)在牛肉膏蛋白胨固体培养基上大肠杆菌能生长,说明培养基含有等大肠杆菌生长所需的营养要素。(4)微生物纯化培养可以通过多种接种方法,如和等,使大肠杆菌在固体培养基上形成单个,从而获得纯菌株。答案:(1)溶化灭菌(2)玻璃棒称量纸容易吸潮(3)碳源、氮源、无机盐、水(4)平板划线法稀释涂布平板法菌落能力提升1.下列有关微生物培养的叙述,错误的是()A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染B.单菌落的分离是消除杂菌污染的一种方法C.培养基都必须使用高压蒸汽灭菌法灭菌D.倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴落解析:防止杂菌污染是获得纯净培养物的关键,A项正确;单菌落
8、由一个微生物繁殖而来,因此分离单菌落可以消除杂菌,B项正确;培养基灭菌一般采用高压蒸汽灭菌法,但是对于含有高温易分解的营养物质的培养基,就不能采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌,C项错误;倒置平板可以防止培养皿盖上的冷凝水滴落到培养基表面污染培养基,D项正确。答案:C2.下列有关用平板划线法和稀释涂布平板法纯化大肠杆菌的叙述,正确的是()都需要用固体培养基都需要使用接种针进行接种都需要在酒精灯火焰旁进行接种都可以用菌落数来计数活菌A.B.C.D.解析:平板划线法和稀释涂布平板法都是为了在培养基表面形成单个菌落,所以都需要用固体培养基,正确;稀释涂布平板法不需要使用接种针进行接种,错误;为防止杂菌污染,
9、操作时都需要在酒精灯火焰旁进行接种,正确;平板划线法不能用于计数活菌,只能用于分离菌种,稀释涂布平板法可以用来计数活菌,错误。答案:B3.金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等,还可能引起食物中毒。下列筛选金黄色葡萄球菌实验结束后的做法,错误的是()A.对接种环进行灼烧处理B.带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌后才能倒掉C.带菌培养基必须经加热后才能倒掉D.接种后双手必须经肥皂洗净,再用体积分数为75%的酒精棉球擦拭解析:带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌后才能倒掉,不能经简单地加热后就倒掉。答案:C4.下图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是()A.操作前要将接
10、种环放在酒精灯的火焰边灼烧灭菌B.划线操作应在酒精灯的火焰上进行C.在5区域中才可以得到菌落D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌解析:操作前要将接种环放在酒精灯的火焰上灼烧灭菌;划线操作应在酒精灯的火焰旁进行,而不是火焰上;所有的划线区都有可能得到菌落,只是 5区域中菌落相对较纯。答案:D5.下列关于倒平板及对菌种纯化的说法,正确的是()A.倒平板时左手将灭过菌的培养皿盖完全打开,右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿(1020 mL),左手立即盖上培养皿盖B.接种时,应使用已灭菌的接种环,培养基不需要灭菌C.平板冷凝后要将平板倒置,以防皿盖上的冷却水倒流入培养基D.涂布器直接在酒精
11、灯的火焰上灼烧灭菌解析:倒平板时用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不是直接将盖完全打开;接种时,应使用已灭菌的接种环,培养基仍需进行灭菌处理;涂布器灭菌时需蘸少量酒精并引燃。答案:C6.下列关于微生物的实验室培养技术的表述,正确的是 ()A.溶化时将称好的牛肉膏从称量纸上直接倒入烧杯B.常见的消毒方法包括灼烧、煮沸、紫外线和喷洒化学试剂等C.配制固体培养基时加入琼脂,其目的是为微生物生长提供碳源D.用移液管稀释菌液时,吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀解析:称好的牛肉膏要连同称量纸一起放入烧杯,待牛肉膏与称量纸分离后,用玻璃棒取出称量纸;灼烧属于灭菌方法,不属于消毒方法;琼
12、脂可以作为固体培养基的凝固剂,而不能为微生物提供碳源;吹吸三次可以使菌液混合均匀,使实验结果更加准确。答案:D7.(2018全国高考理综)在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题。(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是 。(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒, 其原因是紫外线能。在照射前,适量喷洒,可强化消毒效果。(4)水厂供应的自来水通常是经过(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。(5)某同学在使用高压
13、蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是 。解析:实验室中能耐高温的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等,可用干热灭菌的方法灭菌。对于一些不耐高温的液体,如牛奶,需采用巴氏消毒法和高温瞬时消毒法消毒,这种消毒方法的优点是可以杀死牛奶中的微生物,并且牛奶中的营养成分基本不被破坏。自来水通常用氯气消毒,氯气与水反应生成次氯酸和氯化氢,次氯酸具有强氧化性,能杀死自来水中的微生物。用高压蒸汽灭菌法灭菌,必须把锅内的冷空气彻底排除后才能达到设定的压力和相应的温度。答案:(1)可以(2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5
14、)未将锅内冷空气排尽8.炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平,呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。(1)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。(2)细菌鉴定:实验流程如下图所示。对配制的液体培养基等需采用法灭菌;实验所用液体培养基的碳源为(填“无机碳”或“有机碳”)。挑选可疑菌落制片后,用观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。接种可疑菌后,在温度为35 的环境中培养24 h,液体培养基变浑浊,原因是。对照组试管中应加入,与实验组同时培养6 h后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组(填“高”或“低”),则可确定疑
15、似患者被炭疽杆菌感染;反之,则排除。对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有 。解析:(2)培养微生物的培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌;由于炭疽杆菌是异养型微生物,培养基中应加有机碳作碳源。炭疽杆菌呈竹节状排列,需借助显微镜观察。接种培养后,液体培养基由澄清变浑浊,应是细菌大量繁殖所致。实验应遵循单一变量原则和等量原则,实验组加入了生理盐水配制的澄清噬菌体液,对照组应加入等量的生理盐水;若疑似患者被炭疽杆菌感染,则培养6 h后,实验组中的炭疽杆菌由于噬菌体侵染而大量裂解死亡,浑浊度会明显低于对照组。接种疫苗后,机体通过体液免疫产生抗体,与此相关的细胞有吞噬细胞、T细胞、B细胞和浆细胞。答案:(2)高压蒸汽灭菌有机碳显微镜细菌大量繁殖等量的生理盐水低吞噬细胞、浆细胞
