1、第41课时动物细胞工程及克隆技术引起的伦理问题1如图是动物细胞培养的基本过程示意图，请据图回答。(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自_。(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是_，然后用_酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是_。(3)培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有_等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这时培养到第_代，到这时的培养称为_。(4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用_处理，然后配制成_，再分装。(5)在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡，原因是_。2人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的
2、病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和单克隆抗体制备的流程之一如下图：请回答：(1)过程代表的是_。(2)过程构建A基因表达载体时，必须使用_和_两种工具酶。(3)过程采用的实验技术是_，获得的X是_。(4)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的_所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行_比较；或用图中的_进行特异性结合检测。3.科学家从某些能无限增殖的细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发许多动物细胞的分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答以下相关问题：(1)利用细胞融合技
3、术制备单克隆抗体的过程中，B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合需要_作介导。(2)有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。那么：酶A、酶B分别是指_；图中表示的细胞具有的特点是_。.研究和利用胚胎干细胞是当前动物生物工程的重要领域之一。请回答下列问题：(1)早期胚胎(囊胚)中_的细胞是胚胎干细胞。在适当条件下，胚胎干细胞可以分化为多种细胞、组织，具有重要的生产和临床医学价值。(2)培养胚胎干细胞时，首先需要在培养皿底部制备一层饲养层细胞。用于饲养层的细胞一般是_细胞，因为这种细胞能够分泌_的物质。如果不加饲养层细胞进行胚胎干细胞培养，结果是_。4下列各图表示单克隆抗
4、体制备过程的各阶段图解，请据图回答下列问题：(1)请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。(2)在单克隆抗体制备过程中，之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有_、_的特性。(3)由图示可看出，单克隆抗体的制备过程运用了_和_等动物细胞工程技术手段。5现有甲、乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，利用动物细胞培养的方法能够鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请完成下列实验报告。.实验材料：小白鼠胚胎。.药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学
5、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。.实验原理：_，根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。.实验步骤：(1)制备细胞悬液：把小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬液。(2)进行细胞培养取A、B、C三个洁净的培养瓶，_。_。_。(3)制作临时装片：当细胞繁殖到大约第8代左右时，同时从细胞培养箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液迅速杀死细胞，并将细胞固定在不同的分裂时期。静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞
6、悬液。滴在与培养瓶有相同编号的载玻片中央，加12滴适宜浓度的_染色，35 min后，盖上盖玻片，制成临时装片。(4)镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，按照_的顺序观察，寻找处于_期的细胞，并与_对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占细胞总数的百分数(Q值)。.实验结果：培养瓶ABCQ值1.3%12.5%0.1%.实验结论：_。6.2008年2月26日，广西水牛研究所科研人员利用克隆胚胎冷冻技术，使一头杂交母水牛顺利产下一头冷冻胚胎移植的体细胞克隆雌性水牛犊，取名“盼盼”。它的出生经历了一个严密复杂的科学操作过程：(1)当克隆牛“盼盼”性成熟后进行减数分裂时，其初级卵母细胞内可
7、以形成_个四分体。(2)、过程主要采取_技术才能获得细胞群或囊胚，此时在培养液中常加入的物质有葡萄糖、氨基酸、维生素、_和_等。(3)过程中，诱导形成重组细胞常见的方法，除电激融合外，常见的还有_。(4)科研人员获得的耳纤维细胞取自于1日龄的河流型摩拉水牛，原因是此时获取的细胞_、_。(5)根据项目专家介绍，水牛克隆胚胎冷冻技术的研究成功，有利于水牛克隆技术的推广及应用，其重要意义在于_。7供体器官的短缺和排斥反应是制约器官移植的两个重要问题。而治疗性克隆能最终解决这些问题。下图是治疗性克隆的过程图解：(1)正常情况下，去核的卵细胞取自于女性卵巢排卵后在输卵管中的_期的卵母细胞。(2)重组细胞
8、发育的过程中，细胞开始分化发生在_期。(3)治疗性克隆所用到的技术名称是_，要想获得基因型完全相同的两个胚胎，可采用_技术。(4)请你运用上述知识举一例说明干细胞在临床治疗上的应用_。8如图为制备单克隆抗体的流程图，据图回答：(1)制备单克隆抗体的原理是，克隆_细胞形成的细胞群，并产生_的抗体。(2)已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断，一般情况下，细胞中有D或S途径即能分裂繁殖。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请设计一方法(不考虑机械方法)，从
9、培养液中分离出杂种细胞，并说明原理。方法：_。原理：_。(3)杂交瘤细胞具备_的特点。(4)在单克隆抗体制备过程中，还应用了细胞工程中的_和_两大技术。答案 1. (1)动物胚胎或幼龄动物的器官、组织(2)剪碎组织胰蛋白使细胞与培养液充分接触(3)葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清10原代培养(4)胰蛋白酶细胞悬浮液(5)细胞没有发生癌变2(1)逆(反)转录(2)限制性核酸内切酶(限制酶)DNA连接酶(两空可以互换)(3)细胞融合杂交瘤细胞(4) A蛋白核酸(基因)序列抗A蛋白的单克隆抗体3.(1)灭活的病毒或聚乙二醇(2)限制性核酸内切酶、DNA连接酶既能无限增殖又能产生特定抗体.(1
10、)内细胞团(2)胚胎成纤维抑制细胞分化胚胎干细胞分化4(1) (2)无限增殖产生特异性抗体(3)动物细胞融合动物细胞培养5.将有毒物质加入细胞培养液后，培养的动物细胞会发生染色体数量和结构变异(答出有毒物质使细胞发生变异).(2)分别加入等量的细胞悬液向A、B两个培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，并将培养瓶摇匀；C瓶不作处理，作为对照把3个培养瓶放在37(或适宜温度)的细胞培养箱中培养(3)龙胆紫溶液(4)先用低倍镜后用高倍镜有丝分裂中小白鼠正常体细胞有丝分裂中期的高倍显微镜照片.甲、乙两种化学物质均有毒性，且乙的毒性比甲的毒性大6(1)25(2)动物细胞培养无机盐动物血清(3)用灭活病毒(或聚乙二醇)处理(4)分化程度低分裂能力强(5)便于胚胎的异地运输，可以长时间保存优良种水牛的遗传资源(答案合理即可)7(1)减数第二次分裂(2)囊胚(3)核移植技术、动物细胞培养胚胎分割(4)利用胚胎干细胞治疗白血病8(1)杂交瘤大量、单一(2)方法：在上述试管中加入氨基嘌呤后，收集能分裂增殖的细胞原理：淋巴细胞不能分裂，鼠骨髓瘤细胞的D途径被阻断，也不能分裂，而杂种细胞中有S途径，可分裂增殖(3)大量繁殖(或无限繁殖)、产生特定抗体(4)细胞融合动物细胞培养
