1、选修1专题2课题1微生物的实验室培养（测）（满分60分，40分钟完成） 班级 姓名 总分 一、单选题（30分，每题3分）1.下列对灭菌和消毒的理解不正确的是（ ）A灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B消毒和灭菌实质上是完全相同的C接种环用灼烧法灭菌D常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法【答案】B【解析】灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程，A错误；消毒仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程，灭菌则是杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子灭菌”一定可以达到消毒的目的，但消毒不一定能达到灭菌的效果，B错误；接种环是金属工具，可以
2、用灼烧灭菌或干热灭菌，C错误；常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法，D正确。2.关于微生物的营养，说法正确的是（ ）A同一种物质不可能既作碳源又作氮源B凡是碳源都能提供能量C除水以外的无机物仅提供无机盐D无机氮源也可能提供能量【答案】D【解析】对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源，如牛肉膏，A错误；CO2和N2是无机物，也是某些微生物的碳源和氮源，B错误；有机碳源能提供能量，无机碳源不能提供能量，C错误；自然界中一些微生物如硝化细菌，可以以无机氮源合成细胞物质，同时通过氧化外界无机物获得生长所需能量，叫做化能合成作用，D正确。3.下列有关平板划线接种法的
3、操作错误的是 （ ）A将接种环放在火焰上灼烧B将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液C蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连【答案】D【解析】要将接种环在火焰上灼烧灭菌，A正确；应将冷却的接种环伸入菌液蘸取，温度高会杀死菌种，B正确；蘸取菌液和划线都要在火焰旁进行，防止杂菌的污染，C正确；划线时最后一区的划线与第一区划线不能相连，D错误；答案是D。4.稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是（ ）A操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面C不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D
4、操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理【答案】C【解析】稀释涂布平板法，包括系列稀释和涂布平板两个过程，涂布平板之前需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释，A正确涂布平板时，需要将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面，B正确；只有稀释度足够大的菌液才能在培养基表面形成单个的菌落，C错误；操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理，以防止杂菌污染，D正确；答案是C。5.用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时（ ）都需要用固体培养基都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种都可以用菌落数来计数活菌A B C D【答案】B【解析】正确，固体培养基上面可以获得大肠杆菌的单菌落；
5、错误，分离纯化大肠杆菌可使用接种环或涂布器进行划线法或涂布平板法接种；正确，在火焰旁会形成一个相对无菌区来进行接种，可以避免杂菌感染；错误，平板划线法只能用来分离纯化获得单菌落，而不能用来计数。故答案选B。6.微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作中错误的是（ ）煮沸消毒可以杀死微生物的细胞和部分芽孢 接种操作要在酒精灯火焰附近进行 无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒 家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 培养基要进行高压蒸汽灭菌 加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A BC D【答案】D【解析】100煮沸56mi
6、n可以杀死微生物的细胞和一部分芽孢，正确；酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为了无菌操作，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，正确；无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒，正确；家庭制作葡萄酒时，是利用附着于葡萄皮表面的野生酵母菌进行酒精发酵，所以制作葡萄酒时葡萄不需要将容器和葡萄进行灭菌，以免杀死酵母菌，错误；微生物培养过程中，培养基要进行高压蒸汽灭菌，正确；指示剂和染料中可能混有微生物，故加入培养基前需灭菌，错误。综上所述，D正确。7.平板划线操作时划出了五个区域，适宜培养后，观察结果是（ ）A从第一区域到第五区域菌落数逐渐增加B从第一区域到第五区域菌落数逐渐减少C五个区域内的菌落数差不多D中间
7、区域较多，两端区域较少【答案】B【解析】平板划线法通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面；在数次划线后培养，可以分离出由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的子细胞群即菌落。因此，除了第一次划线样品中获取菌种，以后的每次划线都是从上一次划线获取菌种，从而达到稀释分离的目的，最终得到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的子细胞群为菌落，故从第一区域到第五区域菌落数逐渐减少，B项正确，A、C、D项错误。8.下列关于微生物的实验室培养过程中的操作属于灭菌的是（ ）A接种前用酒精棉球擦拭双手和工作台面B牛奶在80下煮15min以杀死其中的微生物C接种前灼烧接种环D通过紫外光或者
8、喷洒石炭酸溶液处理实验室【答案】C【解析】接种前用酒精棉球擦拭双手和工作台面属于消毒，故A错误。牛奶在80下煮15min以杀死其中的微生物属于消毒，故B错误。灼烧接种环属于灭菌，故C正确。用紫外光或者喷洒石炭酸溶液处理实验室属于消毒，故D错误。9.下列在微生物的实验室培养过程中，关于平板划线操作的叙述正确的是（ ）A使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞好棉塞C将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D最后应将平板倒置，放入培养箱中培养【答案】D【解析】使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中还需灭菌，因为接种环会感染细
9、菌，A错误；打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后还需通过火焰灭菌，再塞上棉塞，B错误；将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线，还需盖上培养皿盖，防止空气中杂菌混入， C错误；最后将平板倒置，防止盖子中水滴落引起污染，有利培养基水蒸发， D正确。10.下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是（ ）A步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行B步骤中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖C步骤中，每次划线前后都需对接种环进行灭菌处理D划线接种结束后，将图平板倒置后放入培养箱中培养【答案】B【解析】由图可知，是倒平板，是用接种环沾取菌液，是进行平板划线，是培养。步骤
10、操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，A正确；倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，B错误；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落，C正确；划线接种结束后，将平板倒置后放入培养箱中培养，有利于表面的水分更好的挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，D正确。二、非选择题（30分，每格2分）11.（14分）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：（1）该小组采用
11、稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入01mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为 。（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过 灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是 。（3）示意图A和B中， 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细
12、菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的 的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高 的利用率。【答案】（1）检测培养基平板灭菌是否合格 38107（2）灼烧； 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落（3）B 溶解氧 营养物质【解析】（1）微生物培养过程应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底；由由题意知1ml水样中的菌落数是（39+38+37）301100=38104个，每升水样中的活菌数为38104103=38107。（2）对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末
13、端开始划线的目的是；将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。（3）分析题图可知，A培养皿采用的接种方法是平板划线法，B培养皿采用的接种方法是稀释涂布平板法。（4）由题意可知，振荡培养比静置培养的细菌生长速度快，由此可以说明该细菌是需要菌，由于振荡培养提高l培养液中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率，细菌生长速度加快。12.（16分）炭疽杆菌是一类需氧芽胞杆菌，其代谢过程会将大量的代谢产物排出胞外。由炭疽杆菌引起的炭疽病是一种人畜共患、死亡率较高的急性传染病。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过下图所示的实验确诊。请据图回答下列问题：（
14、1）噬菌体的主要化学成分是_ ，上述实验中噬菌体与炭疽杆菌的种间关系属于_ 。（2）微生物接种的方法很多，最常用的是_ _，经上述方法获得的纯种微生物如需长期保存，可采用 _ 的方法。（3）是将分离培养获得的可疑菌挑选出来进行接种，此过程中对配制的液体培养基等需采取的灭菌方法是_ ，该培养基所用的碳源为_ （无机碳有机碳）。（4）在过程中细菌大量繁殖，并因为_ 的积累而使液体培养基变浑浊。取培养后的等量菌液加入A、B试管，再将如图处理后的两试管放在35环境下培养6小时后观察，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组 （高或低），则证明疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。【答案】（1）DNA和蛋白质
15、寄生（2）稀释涂布平板法和平板划线法 甘油管藏（3）高压灭菌 有机碳（4）代谢产物 低【解析】（1）噬菌体是病毒，主要化学成分是DNA和蛋白质，如图所示，上述实验中噬菌体与炭疽杆菌的种间关系属于寄生。（2）微生物接种的方法很多，最常用的是稀释涂布平板法和平板划线法，经上述方法获得的纯种微生物如需长期保存，可采用甘油管藏的方法。（3）是将分离培养获得的可疑菌挑选出来进行接种，此过程中对配制的液体培养基等需采取的灭菌方法是高压灭菌，该培养对象为异养型微生物，则培养基所用的碳源为有机碳。（4）炭疽杆菌是一类需氧芽胞杆菌，其代谢过程会将大量的代谢产物排出胞外。则在过程中细菌大量繁殖，并因为代谢产物的积累而使液体培养基变浑浊。取培养后的等量菌液加入A、B试管，再将如图处理后的两试管放在35环境下培养6小时后观察，由于噬菌体的宿主专一性，加入了噬菌体的试管中若有炭疽杆菌就会被侵染直至裂解，代谢产物减少，则若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，则证明疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。
