1、生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定【学习目标】1了解生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的存在。2初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。【学习障碍】1理解障碍(1)如何理解三种有机物鉴定的原理？(2)如何理解实验材料选择的要求？(3)如何理解实验中的注意事项？2解题障碍实验学习与实际应用方面的问题。【学习策略】1理解障碍的突破(1)用“成因法”和“迁移法”正确理解实验原理。“成因法”是指从某种现象、概念或原理形成的原因来认识、理解这种现象、概念或原理的一种思维方法，也可称为“因果分析法”。可溶性还原糖鉴定原理迁移应用化学知识可知：斐林试剂为一定浓度的氢氧化钠和硫酸
2、铜配制而成的淡蓝色Cu(OH)2沉淀的悬浊液，葡萄糖溶液在加入斐林试剂后，在加热条件下还原为砖红色的沉淀。而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。其反应式为: CH2OH(CHOH)4CHO2Cu(OH)2 Cu2O2H2OCH2OH(CHOH)4COOH用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为：浅蓝色棕色砖红色沉淀生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖等。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。就是因为还原糖可以和斐林试剂发生上述反应，所以可以用斐林试
3、剂来鉴定可溶性还原糖的存在。脂肪鉴定原理苏丹、苏丹为一种橙黄色脂肪染色剂，这两种染液都可溶于脂肪而使脂肪被染上色。苏丹染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹染液遇脂肪的颜色反应为红色。蛋白质鉴定原理将尿素加热，两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。双缩脲在碱性环境中能和硫酸铜结合成红紫色的络合物。蛋白质分子中含有的肽键与双缩脲结构中的化学键相似，因此，蛋白质与双缩脲试剂也能发生颜色反应。(2)结合实验原理，运用“联想对照法”正确理解实验材料选择的要求。本实验成功的关键在于实验材料的选择，为提高实验效果，应根据当地实际情况，精心选择含糖量较高，富含脂肪、蛋白质的生物组织或器官作为实验材料。选好实验材
4、料，实验成功了一半。比如材料中含有的必须是可溶性还原糖，蔗糖不是还原糖不能用，一般淀粉又是不溶性糖且无还原性也不能用。因此，要充分理解教材中选用特定材料的意图。(3)用“观察归纳法”结合实验原理正确理解实验中的注意事项。本实验的三类有机物的鉴定，均依据特定的颜色反应。所以在实验中应特别注意观察鉴定试剂加入前后的颜色变化，加深印象并做好记录。在对可溶性还原糖的鉴定的过程中，使用的斐林试剂要现配现用，混合均匀后一次加入。在水浴加热时，试管底部不要触及烧杯底部，以防止试管受热不均匀而爆裂；加热时，试管口也不要朝向自己或他人，防止沸腾的溶液冲出试管造成烫伤。(其要求和化学实验是一致的)在对脂肪进行鉴定
5、时，切出符合要求的薄切片是实验结果能否成功的关键。要多按教材要求练习徒手切片技术。该实验是把化学反应和显微镜观察结合起来的实验，所以又叫显微化学鉴定法。在对蛋白质进行鉴定时，若使用蛋清，必须按要求稀释。实验样液要留出一份作为对照，以便最后进行比较。实验中各试剂的使用不可弄混，要牢记不同试剂的鉴定对象。尤其是对斐林试剂和双缩脲试剂的配制和使用，结合实验原理，就能理解：鉴定还原性糖的反应实质是CHO(醛基)和Cu(OH)2发生的氧化还原反应，生成CuO2砖红色沉淀。而鉴定蛋白质是NaOH溶液加入后创造的碱性溶液环境下，CuSO4和肽键形成红紫色络合物。虽然两种试剂都用到了NaOH和CuSO4，但反
6、应实质是完全不同的。2解题障碍的突破用“联想对照法”来解实验理论与实际应用的问题。例题班氏试剂是一种能与可溶性还原糖发生颜色反应的试剂，在医院常用。现有一瓶配制好的班氏试剂，你认为可能用它鉴定哪一种疾病A白血病B感冒发烧C糖尿病D甲亢解析：用“联想对照法”解。看到题干信息以及选择项，迅速联想到病人的实际状况，白血病是一种血细胞癌变的血液病，跟还原糖的检测没有直接关系；感冒发烧测量体温即可；糖尿病人的尿液中通常存在较大量的葡萄糖，而葡萄糖是一种可溶性还原糖，应能与班氏试剂发生颜色反应；甲亢是甲状腺机能亢进的简称，病人通常是因为甲状腺激素分泌过量引起的一系列病症，一般不会检测其还原性糖的变化。答案
7、：C点评：由此题可知，教材实验学习一定要作到知其然并知其所以然，掌握原理是关键，在理解原理的基础上，才可能去理解实验的设计步骤以及为什么要这么设计和操作，然后才能谈得上学以致用。【同步达纲练习】1做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题：各种可供实验的材料梨黄桃胡萝卜黄豆花生种子小麦种子(1)其中适合于鉴定糖的是_，理由是_，鉴定试剂用_。(2)小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是因为_，你怎样进行鉴定？_。(3)适合于鉴定蛋白质的是_，理由是_，鉴定所用的试剂是_。2某同学在显微镜下观察被苏丹染色后的花生子
8、叶切片，当转动细准焦螺旋调整焦距时，有一部分细胞看得很清楚，另一部分细胞较模糊，这是由于A反光镜没调好 B标本切得厚薄不均匀 C显微镜物镜损坏D细准焦螺旋未调节好3利用所掌握的实验原理，鉴定血液中葡萄糖的存在。提供药品材料：硫酸铜、NaOH、柠檬酸钠、新鲜的兔血。请设计操作方案并说明结果。参考答案【同步达纲练习】1解析：用“联想对照法”来解。答案：(1)梨 梨的组织细胞颜色为白色，并且糖含量较高 斐林试剂 (2)小麦种子的脂肪含量不如花生种子高，也不容易做切片 用苏丹试剂鉴定 (3)黄豆和花生 蛋白质含量高 双缩脲试剂2解析：用“推理法”来解。反光镜没调好主要影响视野中光线的亮度，通常不会发生一部分能看清楚另一部分看不清的现象；物镜损坏应该都看不见才是；如果切片厚薄均匀，只是细准焦螺旋没调节好，则整个切片细胞都应该看上去模糊。答案：B3解析：用“联想对照法”来解。在新鲜兔血中加入柠檬酸钠(抗凝剂)，离心提取血浆(上清液)，配制斐林试剂，兔血中加入斐林试剂，在沸水中加热，出现砖红色沉淀。结论：证明兔血中有葡萄糖存在。答案：操作方案：在新鲜兔血中加入柠檬酸钠(抗凝剂)，离心提取血浆(上清液)，配制斐林试剂，兔血中加入斐林试剂，在沸水中加热，出现砖红色沉淀。结论：证明兔血中有葡萄糖存在。点评：实验学习的关键是最终能够借鉴和应用于实际
