1、考纲要求展示知识内容要求植物的组织培养知识网络构建一、植物组织培养的基本过程离体的植物器官、组织或细胞经过_形成愈伤组织,愈伤组织经过_形成试管苗,试管苗经过移栽形成植物体。二、菊花的组织培养1.影响因素(1)选材:一般选择未开花植株的茎上部_。(2)营养:常用的培养基是_,一般需要添加_两种植物激素。2.操作过程(1)制备MS固体培养基:配制好的培养基进行_灭菌。(2)外植体消毒:70%的_消毒、0.1%的_溶液消毒、无菌水清洗。(3)接种:始终在_旁进行,对接种工具要用_灭菌。(4)培养与移栽:在_的无菌箱中培养,得到_后进行移栽。三、月季的花药培养1.被子植物花粉的发育过程:花粉母细胞(
2、_细胞)、四分体时期、单核期、_期、精子。2.产生花粉植株的两种途径(1)花粉通过_阶段分化发育为植株。(2)花粉在诱导培养基上先形成_,再将其诱导分化成植株。3.影响花药培养的因素:主要因素是_的选择和培养基的组成。一般月季的花药培养选在五月初到五月中旬,即月季的_期。4.操作的关键(1)材料的选取:挑选完全_的花蕾,确定花粉发育时期最常用方法是_法。(2)接种:灭菌后的花蕾,在_条件下除去萼片和花瓣,并立即将花药接种到培养基上。(3)培养:温度控制在_左右,幼小植株形成后才需要_。如果花药开裂释放出胚状体,就要在花药开裂后尽快将幼小植株分开。植物组织培养一、植物组织培养的原理及过程1.原理
3、:植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。2.培养过程(1)菊花组织培养菊花组织脱分化 形成愈伤组织再分化 长出丛芽生根移栽 菊花植株(2)月季的花药培养二、影响植物组织培养的因素1.材料因素的影响不同的植物组织,培养的难易程度差别很大,容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短也有影响。幼龄、保存时间短的植物材料容易培养成功。2.营养因素的影响需要配制适宜的培养基,常用的一种培养基是MS培养基,其主要成分包括:大量元素、微量元素、有机物以及蔗糖等。3.激素的影响植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。植物激素的浓度、使用的
4、先后顺序以及用量的比例等,都会影响实验结果。(1)按照不同的顺序使用这两种激素,会得到不同的实验结果使用顺序实验结果先使用生长素,后使用细胞分裂素有利于细胞分裂,但细胞不分化先使用细胞分裂素,后使用生长素细胞既分裂又分化同时使用分化频率提高(2)两种用量的比例影响植物细胞的发育方向生长素/细胞分裂素植物细胞的发育方向比值高时有利于根的分化,抑制芽的形成比值低时有利于芽的分化,抑制根的形成比值适中时促进愈伤组织的生长 4.pH、温度、光照等条件的影响不同的植物对各种条件的要求往往不同。实验操作中应注意的几个问题(1)材料的选取:菊花的组织培养实验中,应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝;月季花药
5、的培养实验中,应 选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。(2)外植体消毒:所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液是无菌水。(3)培养过程:在初期,菊花的组织培养需光照,月季花药的培养不需光照;而在后期均需光照。(4)一旦发现培养物被污染,特别是真菌性污染,一定不要打开培养瓶。应先将被污染的培养瓶统一放在高压 蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌,然后再打开培养瓶进行清理。【例1】(2010浙江高考T6)将无根的非洲菊幼苗转入无植物激素的培养基中,在适宜的温度和光照等条件下培养一段时间后,应出现的现象是()【解析】培养基中无植物激素,但是植物幼苗叶片本身可
6、以产生生长素,而细胞分裂素的产生部位在根尖,所以无根的幼苗不能产生细胞分裂素,在培养的过程中,可以长出少量的根而没有产生芽。【答案】B植物组织培养过程总结如下:过程名称过程形成体特点条件脱分化由外植体成为愈伤组织排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞团1.离体 2.提供营养物质(有机物、无机物)3.提供激素4.提供其他适宜条件再分化由愈伤组织成为幼苗或胚状结构有根、芽或有生根发芽的能力营养生长生殖生长发育成完整的植物体由根、茎、叶、花、果实、种子组成栽培1.植物组织培养是指()A.离体的植物器官、组织或细胞培育成愈伤组织B.愈伤组织培育成植株C.离体的植物器官、组织或细胞培育成完整植物体D.愈伤组织形
7、成并液泡化【解析】植物组织培养是指在一定的条件下,将离体的植物器官、组织或细胞经脱分化形成愈伤组织,然后再分化形成具有根、芽的幼苗,进而发育成为一株完整的植物体。【答案】C植物组织培养与花药培养技术的异同高等动物的精子也是由减数分裂形成的,但是和被子植物不同。高等动物的精子形成是精原细胞经过减数分裂生成精细胞,然后精细胞再变形形成精子。二、植物组织培养与花药培养技术的异同1.相同之处:培养基配制方法、无菌技术及接种操作基本相同,原理相同,即由离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽,诱导生根,然后进行移栽。2.不同之处:生殖方式不同,植物组织培养属于无性生殖,而花药培养属于有性生殖。植
8、物组织培养取得的外植体为体细胞,染色体数无需加倍,花药培养取材为花药,培养成的为单倍体幼苗,植株弱小,高度不育,必须用秋水仙素处理,使染色体数目加倍,重新恢复正常植株的染色体数,后代才能恢复可育性。在花药开裂释放出许多胚状体时,需尽快将幼小植株分开,并移植,培养成的植株要进一步鉴定筛选。【例2】下列说法错误的是()A.被子植物的花粉发育过程依次经历了小孢子四分体时期、单核期、双核期B.被子植物的花粉是由花粉母细胞经有丝分裂而来的,因而含有与体细胞数目相同的染色体C.花粉是单倍体的生殖细胞D.花粉粒内有两个精子【解析】被子植物的花粉是由花粉母细胞经减数分裂而形成的,因而花粉是单倍体的生殖细胞。【
9、答案】B2.下列哪项不是影响诱导花粉植株能否成功及诱导成功率高低的因素()A.不同的植物B.同一种植物的不同生理状况C.花期的早晚D.花粉的数量【解析】不同的植物、同一种植物的不同生理状况、花期的早晚、花粉发育的不同时期等因素都会影响诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低,而花粉的数量不是影响因素。【答案】D组织培养花药培养理念依据细胞的全能性细胞的全能性基本过程脱分化、再分化脱分化、再分化影响因素选材、营养、激素、pH、温度、光照等选材、营养、激素、pH、温度、光照等操作过程制备培养基、外植体消毒、接种、培养、移栽、栽培选材、材料消毒、接种和培养、筛选和诱导、移栽、栽培选育生殖方式无性生殖有性生殖可育性可育高度不育,秋水仙素处理加倍后可育