1、单元素养评价(二) (专题2)(60分钟100分)一、选择题(共12小题,每小题2分,共24分)1.以下关于无菌技术的叙述,错误的是()A.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌B.将用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基等进行灭菌C.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行D.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触【解题关键】区别消毒和灭菌:消毒杀死部分微生物;灭菌杀死所有微生物。二者的适用范围不同。【解析】选A。对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒处理,A项错误;用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基都应进行灭菌操作,B项正确;实验过程中为
2、了避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行,C项正确;实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触,D项正确。2.高中生物学实验中,在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是()A.将少许干酵母加入新鲜的葡萄汁中B.将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上C.将转基因植物叶片接种到无菌培养基上D.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上【解析】选C。本题主要考查几种常见生物学实验对无菌操作的要求。生产果酒和腐乳时对无菌的要求不是很高,接种不需要进行严格的无菌操作;土壤浸出液中含有多种杂菌,所以利用选择培养基筛选土壤浸出液中特定微生物时,不进行严格无菌操作也不会影响实
3、验结果;植物组织培养技术成功的关键是无菌条件,若接种时不进行严格无菌操作将可能导致实验失败,故C项符合题意。3.含氨苄青霉素的LB培养基在基因工程中有很重要的应用。该培养基能杀死一切不抗氨苄青霉素的细菌,只有对氨苄青霉素具有抗性的细菌才能正常生长繁殖。由其作用可知,该培养基是一种()A.固体培养基B.合成培养基C.天然培养基D.选择培养基【解析】选D。该培养基由于含有氨苄青霉素,能杀死一切不抗氨苄青霉素的细菌。只有对氨苄青霉素具有抗性的细菌才能正常生长繁殖。因此氨苄青霉素起到了选择作用。4.关于牛肉膏蛋白胨培养基的配制需要在火焰旁操作的是()A.称量B.灭菌C.溶化D.倒平板【解析】选D。称量
4、和溶化是在灭菌前,不需要在火焰旁操作;灭菌是用高压蒸汽灭菌法;倒平板需要在酒精灯火焰旁操作,故选D。5.(2019江苏高考)下列关于微生物实验操作的叙述,错误的是()A.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌B.接种前后,接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧C.接种后的培养皿要倒置,以防培养污染D.菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基【解析】选A。接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理,接种环等常用灼烧灭菌法处理,吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理,培养基及器具用高压蒸汽灭菌法处理,而试剂不用灭菌,A项错误;为了防止杂菌污染,每次接种前后,接种环都要进行灼烧灭菌,B项正确;接种后,培养皿需要倒置
5、,以防皿盖上水珠落入培养基造成污染,C项正确;分离菌种可以用平板划线法和稀释涂布平板法,后者还可以用于微生物的计数,所用培养基为固体培养基,D项正确。6.下列关于微生物的培养和应用的叙述中,正确的是()A.通过消毒可以杀死物体内所有的微生物B.利用平板划线法可以统计样品中活菌的数目C.平板划线法和稀释涂布法常用于微生物的接种D.使用过的培养基及培养物可以直接丢弃【解析】选C。通过消毒只能杀死部分微生物,A项错误;平板划线法可以分离微生物但不能统计样品中微生物的数目,B项错误;微生物接种的方法很多,最常用的是平板划线法和稀释涂布法,C项正确;使用过的培养基及培养物必须经过灭菌后才能丢弃,D项错误
6、。7.下列关于倒平板、平板划线法和稀释涂布平板法的叙述中,正确的是()A.倒平板时将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌子上B.平板划线培养后,可观察到从第一区域到第五区域菌落数逐渐减少C.稀释涂布平板的结果是都可在培养基表面形成单个的菌落D.倒平板、平板划线法和稀释涂布平板法都是纯化菌种的主要方法【解析】选B。倒平板时要用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,A项错误;划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落,B项正确;稀
7、释涂布平板的结果可得到由单个细菌繁殖而来的菌落,而不是得到单个菌落,C项错误;倒平板是制作固体培养基的方法,不是纯化菌种的方法,D项错误。8.在做分离分解尿素的细菌实验时,A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有()土样不同培养基污染操作失误没有设置对照A.B.C.D.【解析】选A。A同学比其他同学的实验结果数据大许多,可能是由于选取的土样不同、培养基灭菌不彻底或操作过程中被杂菌污染,也可能操作失误,如配制培养基时混入其他含氮物质、稀释度不够准确等。9.在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是()A.用液体培养基可
8、获得大量菌体B.纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长C.用液体培养基可以充分利用培养基中的营养物质D.用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌【解析】选A。在选择培养纤维素分解菌时,要将土样加入装有30 mL选择培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下振荡培养12 d,直至培养液变混浊。这是由于固体培养基的容量有限,而使用液体培养基可以获得大量菌体,故A正确。10.如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤,下列相关叙述中正确的是()A.步骤倒平板操作时,倒好后应立即将其倒过来放置B.步骤将接种环在火焰上灼烧后迅速沾取菌液后进行平板划线C.步骤应按一定的方向顺序划线,使接种物逐渐稀释,培养
9、后出现单个菌落D.步骤培养箱培养后可用来对X细菌进行计数【解析】选C。步骤倒平板操作时,倒好后适当冷却,然后将其倒过来放置,A项错误;步骤将接种环在火焰上灼烧冷却后沾取菌液后进行平板划线,B项错误;步骤应按一定的方向顺序划线,使接种物逐渐稀释,培养后出现单个菌落,C项正确;步骤培养箱培养后可用来对X细菌进行分离纯化,得到单个菌落,不能对其进行计数,D项错误。11.测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养,而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释液,其原因是()A.细菌个体小,真菌个体大B.细菌易稀释,真菌不易稀释C.细菌在土壤中数量比真菌多D.细菌是原
10、核生物,真菌是真核生物【解析】选C。土壤中的微生物大约70%90%是细菌,真菌的数量要比细菌少。样品的稀释度越高,在平板上生长的菌落数目就越少。在实际操作中,通常选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落数在30300,适于平板计数,所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。12.为了保持菌种的纯净,需要进行菌种的保藏,下列有关叙述错误的是()A.对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法B.临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C.临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D.对于需要长期保存的菌种,可以采用低温-4 保藏的方法【解析】选D。对于需要长期保存的菌种,可采用甘油管藏的方法,即
11、在3 mL甘油瓶中加入1 mL甘油后灭菌,将1 mL培养的菌液转移到甘油瓶中,与甘油充分混匀后,放在-20 的冷冻箱中保存。二、非选择题(共8小题,共76分)13 .(8分)某种细菌体内某氨基酸(X)的生物合成途径如图:废物中间产物1中间产物2X这种细菌的野生型能在基本培养基(满足野生型细菌生长的简单培养基)上生长,而由该种细菌野生型得到的两种突变型(甲、乙)都不能在基本培养基上生长;在基本培养基上若添加中间产物2,则甲、乙都能生长;若添加中间产物1,则乙能生长而甲不能生长。在基本培养基上添加少量的X,甲能积累中间产物1,而乙不能积累。请回答:(1)根据上述资料可推论:甲中酶_的功能丧失;乙中
12、酶_的功能丧失,甲和乙中酶_的功能都正常。由野生型产生甲、乙这两种突变型的原因是野生型的_(填“同一”或“不同”)菌体中的不同_发生了突变,从而导致不同酶的功能丧失。如果想在基本培养基上添加少量的X来生产中间产物1,则应选用_(填“野生型”“甲”或“乙”)。(2)将甲、乙混合接种于基本培养基上能长出少量菌落,再将这些菌落单个挑出分别接种在基本培养基上都不能生长。上述混合培养时乙首先形成菌落,其原因是_。【解析】(1)根据题意,在基本培养基上若添加中间产物2,则甲、乙都能生长,说明甲、乙的突变都不会导致酶c的缺失;若添加中间产物1,则乙能生长而甲不能生长,说明乙突变导致酶a缺失,甲的突变导致酶b
13、缺失;在基本培养基上添加少量的X,甲能积累中间产物1,而乙不能积累,更加证明乙突变导致酶a缺失而甲突变导致酶b缺失。产生甲、乙两种突变型的原因是野生型的不同菌体产生突变,导致不同酶的功能丧失;根据题意可知,如果想在基本培养基上添加少量的X来生产中间产物1,则应选用甲类型的突变菌。(2)由于乙的突变是导致酶a缺失,而甲的突变是导致酶b缺失,所以二者混合培养,乙首先利用中间产物1,而形成菌落,而甲需等到中间产物2形成后才可完成新陈代谢,所以乙先形成菌落。答案:(1)bac不同基因甲(2)甲产生的中间产物1供给乙,使乙能够合成X,保证自身生长产生菌落14.(8分)(2016全国卷)某同学用新鲜的泡菜
14、滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题:(1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用_对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是_。(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_和_。分离纯化时应挑选出_的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在-20 长期保存时,菌液中常需要加入一定量的_(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。【解析】本题主要考查乳酸菌的分离纯化和保存。(1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用无菌水梯度稀释泡菜滤液,这样既可避免杂菌污染,又可保证将乳酸菌分散成单个细胞,以便在培养基表面形成单个菌落。(2
15、)乳酸的积累会使培养液pH降低,影响乳酸菌的增殖,加入碳酸钙可以中和乳酸菌代谢(无氧呼吸)过程中产生的乳酸,使碳酸钙分解形成透明圈,有利于乳酸菌的识别和分离。(3)加入甘油可降低培养液的凝固点,使培养基在低温下保持液体状态。答案:(1)无菌水泡菜滤液中菌的浓度高,直接培养很难分离得到单菌落(2)鉴别乳酸菌中和产生的乳酸(或酸)具有透明圈(3)甘油15.(12分)临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:(1)取该单菌落适当稀释,用_法接种于固体培养基表面,在37 培养箱中培养24
16、 h,使其均匀生长,布满平板。(2)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A_;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B_;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明_;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的_。(3)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素_。【解析】(1)为了使微生物在培养基上能够均匀分布,一般用涂布法将微生物接种在培养基上。(2)在抗药性检验过程中
17、,如果在抗生素周围出现透明的圆圈,说明此种抗生素可抑制该细菌生长;透明圈的大小表示此种抗生素抗菌能力的强弱,据此可判断A、B、C抗菌能力强弱依次是A、C、B;D的透明圈中出现了一个菌落,说明该菌落对此种抗生素具有耐药性。(3)实验结果表明抗生素A对该致病菌的抗菌效果最好。答案:(1)涂布(2)敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A的弱耐药菌(3)A16.(10分)某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株,请回答: (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于_培养基。 (2)为避免培养皿污染,需将培养皿呈_状态放置。为避免培养
18、液中菌体浓度过高,需将培养液进行_处理。为了排除培养基被污染,需设置接种_的培养基作为空白对照。 (3)为了筛选出菌株,可将适量的_试剂滴加在平板中的菌落周围,洗去浮色后,如果菌落周围出现透明圈,则说明此种菌能够分泌脂肪酶。纯化菌种时,为了对活菌进行计数,可采用_法接种于新的培养基平板上。 (4)实验操作应在酒精灯火焰附近进行的原因是_。【解析】(1)依题意,欲筛选出能降解脂肪的菌株,培养基中应只含有豆油而无其他碳源。从功能上讲,这类培养基属于选择培养基。(2)为避免培养皿污染,需将培养皿呈倒置状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行梯度稀释处理。为了排除实验组中非测试因素对实验结
19、果的影响,需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。(3)由于脂肪遇苏丹试剂会出现红色,所以为了筛选出菌株,可将适量的苏丹试剂滴加在平板中的菌落周围,洗去浮色后,如果菌落周围的现象是出现透明圈、不出现红色圈,则说明此种菌能够分泌脂肪酶。分离纯化菌种时,为了对活菌进行计数,可采用稀释涂布平板法接种于新的培养基平板上,使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,以便纯化菌种。(4)实验操作应在酒精灯火焰附近进行,从而避免周围环境中微生物的污染。答案:(1)豆油选择(2)倒置梯度稀释等量无菌水(3)苏丹稀释涂布平板(4)避免周围环境中微生物的污染 17.(8分)某小组同学
20、为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种、培养及菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是_和_。(2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是_。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于_中培养,培养的温度设定在37 。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。(4)培养20小时后,观察到平板上有各种形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有_种细菌。一般来说,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越_。(5)如果提高
21、培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐_细菌,这种培养基为_。【解题关键】关键知识:(1)微生物的培养基一般都要含有水、碳源、氮源、无机盐,如蛋白胨在培养基中主要作为氮源,淀粉在培养基中主要作为碳源。(2)实验室的灭菌方法一般有灼烧灭菌(适合于接种工具的灭菌)、干热灭菌(适合于耐高温的、需要保持干燥的物品的灭菌)、高压蒸汽灭菌(适合于培养基等物体的灭菌)。【解析】(1)不同的培养基一般都含有水、无机盐、碳源、氮源等基本成分。所以培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源、碳源,除此之外,培养基还必须含有的基本成分是水和无机盐。(2)对培养基灭菌常采用的方法是高压蒸汽灭菌,对培养皿进行灭
22、菌采用的方法是干热灭菌法。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱中培养,培养的温度设定在37 。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照。(4)培养20小时后,观察到平板上有各种形态和颜色不同的菌落,如果菌落总数越多,则说明湖水样品中有多种细菌,污染程度越高。(5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐盐细菌,这种培养基为选择培养基。答案:(1)氮源(碳源不作要求)碳源无机盐水(2)高压蒸汽灭菌(3)恒温培养箱无菌水(4)多高(5)盐(或NaCl)选择培养基18.(12分)急性肠胃炎是由细菌通过消化道进入人体导致的。因此检
23、验饮用水的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水有关的微生物问题:(1)接种微生物的方法有很多,图1中所示为_。图2所示的四种菌落分布图中,不是由该方法得到的是_。 (2)不论何种培养基,在各成分溶化后灭菌前,要进行的是_。 (3)用该方法统计样本菌落数时,同时需要做A、B、C三个培养皿,原因是_。(4)从结构上看,与大肠杆菌属于同一类生物的是_(多选)。 A.金黄色葡萄球菌B.酵母菌C.乳酸菌D.霍乱弧菌E.霉菌 (5)为了检测大肠杆菌对抗生素的敏感性,在37 培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。将分别含有A、B、C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置
24、,培养一段时间后,结果见图:根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好选择的抗生素是_。若透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是该抗生素的_。【解析】(1)图示的接种方法是稀释涂布平板法。图示中的D是平板划线法的接种结果,不符合图示接种方法。(2)配制培养基的基本程序是计算、称量、溶化、调pH、灭菌。(3)由于定量实验存在误差,所以需要计数多次计算平均值,减小误差,使实验结果更加准确可靠。(4)大肠杆菌属于原核生物。选项中A、C、D也均属于原核生物,B、E是真菌,属于真核生物。(5)图中含青霉素的滤纸片透明圈最大,说明抗菌效果最好。若透明圈中出现一个菌落,可能突变产生了抗性
25、基因。答案:(1)稀释涂布平板法D(2)调pH(3)分别计数3次,取平均值,使实验结果更加准确可靠(4)A、C、D(5)青霉素抗性突变菌株19.(10分)研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答下列问题:(1)纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即_。(2)接种过程所用的接种工具是接种环,操作时采用_灭菌的方法。(3)刚果红可以与纤维素等多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的_和葡萄糖发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种:第一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应;第二种是在_时就加入刚果红,_(填“第一种”或“第二种”)方
26、法会使菌落之间发生混杂。(4)如果观察到产生_的菌落,说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验。(5)如图为实验室培养和纯化菌种过程中的部分操作步骤,下列说法错误的是_。A.步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行B.步骤中,每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理C.步骤中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖D.划线接种结束后,将图平板倒置后放入培养箱中培养 【解析】(1)纤维素酶是一种复合酶,包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。(2)分离和纯化微生物常用的接种方法是平板划线法,常用的接种工具是接种环,操作时采用灼烧的方法灭菌。(3)刚果红不与纤维二糖和葡萄糖发生反
27、应,第一种方法加入刚果红后会使菌落之间发生混杂,第二种方法在倒平板时加入刚果红。(4)刚果红与纤维素反应呈现红色,纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液反应呈红色,在菌落周围会出现透明圈。为了确定是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验。(5)步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行,防止被杂菌污染,A正确;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落,B正确;倒平板完成后立即盖上培养皿,冷却后将平板倒过来放置,C错误;划线接种结束
28、后,将平板倒置后放入培养箱中培养,有利于表面的水分更好地挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染,D正确。答案:(1)C1酶、CX酶、 葡萄糖苷酶(2)灼烧(3)纤维二糖倒平板 第一种(4)透明圈(5)C20.(8分)在现代农业中,常在饲料中加入一定量的尿素饲养牛等牲畜,因其有特殊的器官瘤胃,在瘤胃中生活着多种微生物,其中许多微生物以尿素作为唯一氮源。某同学设计了如下实验,对能分解尿素的细菌进行分离和计数。取样:到屠宰场从刚宰杀的牛的瘤胃中取样,将样品装入事先准备好的信封中密封。制备培养基:制备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基。(将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数应明显多于
29、选择培养基上的数目。)由于初次实验,选择了一个较宽的稀释范围,并且每个稀释度下需要3个选择培养基,1个牛肉膏蛋白胨培养基。微生物的培养与观察:按稀释度的顺序分别吸取0.1 mL菌液进行平板涂布操作。将涂布好的培养皿放在30 下培养,并且需要无氧条件。比较两种培养基中菌落的数量、形态等,并做好记录。挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚红指示剂的培养基中,观察是否产生颜色反应。细菌的计数:当菌落数目稳定时,选取平板计数。请回答下列问题:(1)制备牛肉膏蛋白胨培养基的目的是_。(2)每个稀释度下需要3个选择培养基,原因是_。(3)应用含酚红的培养基的目的是_,结果会呈现_色,原理是_。(4)计数时
30、应选_平板进行计数,写出计算样品中细菌数目的方法_。【解析】(1)制备牛肉膏蛋白胨培养基的目的是比较其中的菌落数目和选择培养基的菌落数目,看选择培养基是否起到了选择作用。(2)设立3个培养基的目的是作为重复组,取平均值,以减小误差。(3)分解尿素的细菌在脲酶的作用下反应:CO(NH2)2+H2OCO2+2NH3,其产物中的NH3可使培养基碱性增强,pH升高,酚红指示剂呈现红色。(4)菌落数在30300的平板计数,结果最准确。答案:(1)作为对照,用来判断选择培养基是否起到了选择作用(2)涂布3个平板作为重复组,以增强实验结果的说服力与准确性(3)作为鉴别培养基,看是否有分解尿素的细菌存在红分解尿素的细菌产生脲酶,催化尿素分解并产生NH3,使培养基的pH升高,酚红指示剂呈红色(4)菌落数在30300的根据平板所对应的稀释度,对3个平板进行重复计数,然后求出平均值,以此估算样品中细菌的数目
