1、选修一 专题一 微生物的利用1. (2009宁夏卷，40)(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_、_和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行_(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和_；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_。(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等
2、菌落特征对细菌进行初步的_。(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。_,(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。解析：解答本题需要识记微生物的培养条件、代谢特点，实验室微生物培养规范和主要步骤。微生物的培养条件有适宜的营养物质(碳源、氮源、无机盐等)、温度、pH、渗透压(控制培养液的浓度)等。细菌具有个体微小、结构简单、生长周期短、繁殖快、代谢旺盛、变异类型简单(主要是基因突变)等特点。在微生物实验操作中，防止杂菌污染是贯穿实验整个过程中的内容，因此，对环境、生物材料、操作者双手等进行消
3、毒，对培养基、接种环和培养仪器进行灭菌等是微生物实验中的常见操作。紫外线灭菌的原理是紫外线的高能量使蛋白质和DNA等生物分子变性，即空间结构改变。稀释涂布平板法是细菌分离纯化的常用方法，合适的稀释倍数是实验的关键。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落，依据菌落大小、形态、色泽等可以对细菌进行鉴定或分类。答案：(1)温度酸碱度易培养生活周期短(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3)比例合适(4)鉴定(或分类)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(6)灭菌,2. (2009上海卷，39)氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某
4、研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表。图1表培养基的组成(1)配制号固体培养基时，除添加号液体培养基成分外，还应添加1%的_。(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是_。(3)从用途上来说，号培养基和号培养基分别属于_培养基和_培养基。在号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是_。(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为_。图2(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的号培养液中培养，得到生长曲线(如图2)。从图2可知，SP1菌在_培养条件下最早停止生长，其原因是_。解析：固体培养基中除添加营养成分外，还需要
5、加入一定量的凝固剂，如琼脂；细菌培养的基本过程：配制培养基（称量溶化调pH分装加棉塞包扎）灭菌搁置斜面接种培养(25下57 d或37下24 h)。根据培养基的用途可分为基本培养基、选择培养基和鉴别培养基等，题中号培养基属于基本培养基，由于号培养基中的碳源仅是氯苯，因此，培养基属于选择培养基。号培养基中仅硝酸铵含有氮元素，因此，它是该培养基中的氮源。细菌的休眠体是芽孢。根据曲线图可知，氯苯浓度为20 mg/L时，菌体数量最先减少，最可能是由于氯苯被耗尽。答案：(1)琼脂(2)先调pH，后灭菌(3)通用(基本)选择硝酸铵(4)芽孢(5)20 mg/L氯苯碳源最早耗尽,3. 尿素是一种重要的农业肥料
6、，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示。请分析回答问题：KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖10 g尿素1 g琼脂1.5 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100 mL(1)此培养基能否用于植物组织培养？_，理由是_。(2)培养基中加入尿素的目的是筛选_，这种培养基属于_培养基。(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的_和_，实验需要振荡培养，原因是
7、_。(4)转为固体培养时，常采用_的方法接种，获得单菌落后继续筛选。(5)下列材料或用具中：培养细菌用的培养基与培养皿；玻棒、试管、锥形瓶和吸管；实验操作者的双手。需要灭菌的是：_；需要消毒的是：_。(填序号)(6)在进行分离分解尿素的细菌的实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有_(填序号)。由于土样不同由于培养基污染由于操作失误没有设置对照(7)简述土壤中可分解尿素细菌的鉴定方法及原理：_,_。解析：(1)考查微生物培养与植物组织培养的培养基的区别。配制培养基需要根据培养的生物营养需求情况，确定其成分及比例。植物组织
8、培养需要有满足植物细胞生长所必需的营养和植物激素等条件。(2)培养基中加入尿素能够筛选出能分解尿素的细菌，属于选择培养基。(3)尿素为该细菌提供氮源，葡萄糖为该细菌提供碳源。振荡培养基可溶入氧气，供培养的目的菌提供必需的氧气。,(6)培养基上筛选出的细菌数量与是否设置对照无关。答案：(1)不能缺少多种必需的矿质元素 (2)目的菌选择(3)尿素葡萄糖为目的菌提供氧气(4)涂布平板(划线)(5)和(6)(7)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH增高，使酚红指示剂变红高考资源网()来源：高考资源网版权所有：高考资源网(www.k s 5 )版权所有：高考资源网()版权所有：高考资源网()
