1、生物试卷第I卷（选择题）一、单选题（每题2分，共36分）1下列有关基因工程的说法，不正确的是（）A遗传密码的成功破译为基因的分离和合成等提供了理论依据B核苷酸序列已知且比较小的基因可以通过PCR扩增仪直接人工合成C导入调节渗透压的基因能够提高农作物的抗盐碱、抗干旱的能力D我国转基因抗虫棉培育中目的基因的转化，采用的独创方法是花粉管通道法2下列叙述不正确的是（）A启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点B在基因工程的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是将目的基因导入受体细胞C细菌常常用作基因工程的受体细胞，主要原因是繁殖速度快D上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋白的转基因牛，可以想象这头牛发生
2、了基因突变3下列关于基因工程的叙述，错误的是（）A目的基因由载体导入受体细胞B限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达4实施基因工程的最终目的是（ ）A定向提取生物体的DNA分子B定向地对DNA分子进行人工剪切C在生物体外对DNA分子进行改造D定向地改造生物的遗传性状5下列各项中，不是用基因工程方法生产的药品是（ ）A干扰素B白细胞介素-2C青霉素D乙肝疫苗6如图为DNA分子的某一片段，其中分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（）A解旋酶、限制酶、DNA连接酶B限
3、制酶、解旋酶、DNA连接酶C限制酶、DNA连接酶、解旋酶DDNA连接酶、限制酶、解旋酶7转基因抗虫棉培育过程中，下列有关目的基因检测与鉴定方法的叙述，错误的是（ ）A检测抗虫基因是否导入农杆菌转化法B检测抗虫基因是否转录分子杂交技术C检测抗虫基因是否翻译抗原抗体杂交D检测抗虫蛋白生物功能抗虫接种实验8如图为转基因抗虫烟草的培育流程，则下列叙述正确的是（ ）A培育过程需要使用纤维素酶和果胶酶B过程将重组Ti质粒导入烟草细胞前需要使用CaCO3处理农杆菌C培育过程仅通过调节生长调节剂可诱导愈伤组织再生出新植株D可通过观察害虫吞食转基因烟草后的存活情况进行个体水平检测9下列过程不属于克隆的是（ ）A
4、单个大肠杆菌形成单菌落B壁虎断尾后长出新尾巴CPCR扩增抗除草剂基因D植物组织培养技术扩繁兰花10为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力，某研究小组的实验过程如图。下列叙述正确的是（ ）A过程获得的原生质体需悬浮在蒸馏水中B过程需提高生长素的比例以促进芽的分化C过程需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生D原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性11植物细胞工程包括植物组织培养、植物体细胞杂交等技术，具有广泛的应用前景和实用价值。下列对这些操作或应用的描述错误的是（）A可用PEG诱导植物原生质体融合，再生出细胞壁是融合成功的标志B植物体细胞杂交技术去壁前，需对两种植物细胞进行灭菌处理，以防止杂菌污染
5、C植物培养基中常用的植物生长调节剂，一般可以分为生长素类，细胞分裂素类和赤霉素类D获取植物原生质体时，需在与细胞液浓度相当的缓冲液中进行12中国科学院团队对雌性猕猴进行克隆，成功获得“中中”和“华华”两姐妹，突破了现有技术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界难题，为建立人类疾病的动物模型，研究疾病机理，研发诊治药物带来光明前景。如图为“中中”和“华华”培育的流程，相关叙述不正确的是（）A该过程属于无性繁殖，体现了动物细胞核具有全能性B图中的卵子实际上是次级卵母细胞C过程是动物胚胎的体外培养过程，需无菌、无毒环境D中中、华华的性别由纤维细胞的遗传物质决定13猕猴桃是原产我国的野生藤本果树，营养价值
6、较高，我国现有54个种，几十个变种，丰富的种质资源为猕猴桃遗传育种提供了方便。毛花猕猴桃为二倍体，果实大，维生素C含量高；软枣猕猴桃为四倍体，极耐寒，在-40下可安全越冬。某农科所利用这两种猕猴桃体细胞，通过细胞工程的方法培育出了猕猴桃新品种，培育过程如下图所示。下列说法错误的是（ ）A过程需将体细胞用含纤维素酶和果胶酶的等渗溶液处理B灭活的仙台病毒不能用于过程中a和b的诱导融合C愈伤组织形成试管苗须经脱分化和再分化两个过程D处于有丝分裂后期的杂种植株体细胞中有12个染色体组14下列有关培育体细胞克隆牛的叙述正确的是（ ）A用于核移植的供体细胞一般选传代10代以上的细胞B克隆牛的培育说明高度分
7、化的动物细胞具有全能性C克隆牛是对体细胞供体牛100%的复制D对受体卵母细胞去核是在MII期152017年我国科学家提取了一只雌性猕猴胎儿的体细胞，将其细胞核植入到去核的卵细胞中，培育出了世界上首批体细胞克隆猴，这推动中国率先建立起非人灵长类疾病动物模型。下列有关说法正确的是（）A该试验表明已分化的动物体细胞具有全能性B克隆成功的原因是体细胞核中具有该物种的全套基因C猕猴的受精卵是未分化细胞，所以不具有全能性D与植物细胞相比，动物细胞的全能性更容易体现16图示为哺乳动物细胞工程育种过程，下列叙述正确的是（）Aa是处于减数第二次分裂前期的卵母细胞B过程常用农杆菌转化法导入目的基因C过程前需要对代
8、孕母畜进行同期发情处理D过程获得的所有细胞都可用于胚胎干细胞研究17胚胎工程技术中的关键环节是对离体后的胚胎进行体外培养，在获得并培养绵羊胚胎时，下列叙述正确的是（ ）A获取绵羊的精子和卵子后，立即混合有助于提高受精的成功率B卵子外层透明带出现2个极体，说明受精完成且受精卵将开始发育C绵羊胚胎培养液必须包含有机盐、维生素、激素、抗生素等成分D胚胎至少需要发育至桑棋胚、原肠胚阶段才能用于移植到母体内18下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是（）A代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能B代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂，无细胞分化C代表胚胎分
9、割，需均等分割桑椹胚的内细胞团，以免影响胚胎发育D为选育出能泌乳的母奶牛，移植前需从胚胎的滋养层部位取样，做 DNA 分析鉴定性别二、多选题（每题3分，共9分）19下图是我国科学家制备小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞的相关研究流程，其中Oct4基因在维持胚胎干细胞全能性和自我更新中发挥极其重要作用。相关叙述正确的是（ ）A过程选取的卵子应该是处于减数第二次分裂中期的卵母细胞BOct4转基因小鼠可通过向小鼠受精卵中直接注入Oct4基因片段而获得C过程胚胎发育依次经历桑葚胚、原肠胚和囊胚等不同发育阶段D过程胚胎干细胞取自囊胚内细胞团这类细胞的细胞核大核仁发达20下图为利用胚胎干细胞培育转基因小鼠的基本流程
10、示意图。下列叙述正确的是（ ）A过程选择胚胎干细胞作受体细胞是因为其具有发育的全能性B过程中必须通过一定方法筛选含有目的基因的胚胎干细胞C过程是在母鼠的输卵管内完成的D过程中为提高成功率，需对代孕母鼠进行超数排卵处理21下图为某种cDNA基因的制作流程图，相关叙述错误的是（）A催化过程的酶都能促进双链间氢键的形成B核酸酶H能催化杂交双链上的磷酸二酯键断裂C该双链DNA上不含与RNA聚合酶结合的碱基序列D该双链DNA在PCR仪中扩增时需提供DNA连接酶第II卷（非选择题）三、非选择题（共55分）22北极比目鱼中有抗冻基因，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，请回答： （1）利用过程的方法构
11、建的基因文库是_。（2）过程中常需要使用限制酶和DNA连接酶，既能连接黏性末端又能连接平末端的DNA连接酶是_。（3）为使过程获取的目的基因在番茄细胞中能够表达，在构建表达载体时，需要将目的基因插入_中，并且需在目的基因的首端和尾端分别加入_。（4）要检测番茄的DNA上是否插入抗冻基因，应以_（2分）为探针，与番茄基因组DNA杂交；要确认抗冻基因是否在转基因番茄植株中正确表达，应通过_（2分）法检测转基因番茄植株中该基因的表达产物是否呈阳性。（5）如果目的基因进行PCR扩增，复制循环5次，理论上至少需要加入_（2分）个引物。23四尾栅藻生长周期短、适应性强，是一种高潜力生物柴油新型原料，但油脂
12、产量低。研究人员从含油量高的紫苏中提取DGAT1（催化油脂合成的关键酶）基因，并成功导入到四尾栅藻细胞内，获得转基因的产油四尾栅藻。其制备流程如下图，图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，LacZ基因可使细菌利用培养基中的物质X-gal进而使菌落呈现蓝色，无该基因或该基因被破坏，菌落呈白色。回答下列问题：（1）从高表达的紫苏组织细胞中提取总的RNA，经逆转录获得cDNA，用于PCR扩增。该过程获得cDNA的原理是_（2分）。（2）PCR扩增DGAT1基因时，使反应体系中的模板cDNA解旋为单链的条件是_。在DNA延伸的过程中，使用砌酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是_（2分）。（3）构建
13、的pMD19DGAT1导入到经CaC12溶液处理的感受态大肠杆菌细胞中，并通过_（方法）接种到含_的培养基中培养。一段时间后，挑选_色的菌落以提取质粒pMD19DGAT1。（4）用限制酶BamH I和Xba I切割pMD19DGAT1和pBI 121，将其连接成重组表达载体pBI121DGAT1，并将其导入四尾栅藻细胞中。与单酶切相比，双酶切的优点是_（2分）。24经过一个世纪的发展，植物细胞工程技术解决了人类生存的关键问题（如粮食问题、花卉苗木生产等），为人类创造了巨大的财富，回答相关问题：（1）植物细胞工程最基本的技术是_，它所依据的生物学原理是_。（2）兰花、香蕉等优良植物的生产都可通过
14、微型繁殖技术经过_和再分化来提供试管苗，其优点是不仅可以保持优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现无病毒种苗的大量繁殖，获得无病毒种苗的方法是_（2分）。（3）植物体细胞杂交技术的关键是获取有活力的原生质体以及诱导其融合，诱导融合的化学方法是用_做诱导剂，植物体细胞杂交技术的重大意义是_（2分）。（4）人工种子的主体是_。在制备人工种子时可根据需要添加防霉药物，它应加在哪一部分?_（填人工种皮或愈伤组织）。25番茄和马铃薯通过有性生殖不能实现杂交，科学家通过植物细胞工程实现了这个梦想。依据下图回答下列相关问题：（1）图甲中过程是用_酶处理细胞的细胞壁，去壁后得到的结构称为_。（2）是诱导融合
15、的过程，其原理是_（2分），最常用的化学诱导剂是_。（3）是_的过程，标志着融合结束。与此过程密切相关的细胞器主要是_。（4）融合形成的杂种细胞需要经过A_过程和B_过程形成杂种幼苗进而形成杂种植株。（5）整个培养过程要在_条件下进行，试管苗的根细胞没有叶绿素，而叶的叶肉细胞具有叶绿素，根本原因是_（2分）。26根据如下图所示的哺乳动物受精过程示意图，回答下面的问题：（1）图中字母表示的结构名称是：a_、b_、c_。（2）图中数字表示的过程是：_、_、_、_。（3）在精卵相遇之前，精子在雌性动物生殖道发生相应的生理变化，具有了受精能力，这个过程叫作_（2分）。卵子一般在排出后都要在_中进一步成
16、熟，当到_时，才具备与精子受精的能力。（4）动物胚胎是由合子经有丝分裂形成的，合子只由一个精子和卵子结合的生理基础是_（2分）。参考答案1B2D3D4D5C6A7A8D9B10D11B12C13C14D15B16C17C18D19AD20AB21ABD22部分基因文库（cDNA文库） T4DNA连接酶 Ti质粒的T-DNA 启动子和终止子 用放射性同位素标记的目的基因 抗原-抗体杂交 62 23在逆转录酶作用下，以mRNA为模板按照碱基互补配对原则合成cDNA 加热至9095 Taq酶热稳定性高而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下失活 稀释涂布平板法 X-gal和氨苄青霉素 白 使DGAT1基因能定向插入表达载体，减少自身环化 24植物组织培养 细胞的全能性 脱分化 用茎尖进行植物组织培养 聚乙二醇 克服远源杂交不亲和 胚状体等 人工种皮 25纤维素酶和果胶 原生质体 细胞膜具有一定的流动性 PEG（聚乙二醇） 再生细胞壁 高尔基体（高尔基体和线粒体） 脱分化 再分化 无菌无毒 细胞中含有叶绿素基因，且发生了选择性表达 26放射冠 雄原核 雌原核 精子穿越放射冠 精子穿过透明带 精子进入卵细胞 雌、雄原核融合 精子获能 输卵管 减数分裂中期 透明带反应和卵细胞膜反应这两道屏障
