1、专题质量评估检测卷(二)(时间:60分钟满分:100分)一、选择题(共15小题,每小题3分,共45分)1(2019城中区期中)下列关于微生物营养的说法,正确的是()A牛肉膏不可能既作碳源又作氮源B凡是碳源都能提供能量C就是指碳源、氮源、水、无机盐D无机氮源也能提供能量解析:选D对异养微生物来说,牛肉膏含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源,A错误;无机物碳源不提供能量,B错误;微生物的营养主要包括碳源、氮源、水、无机盐等物质,C错误;自然界中一些微生物如硝化细菌,可以以无机氮源合成细胞物质,同时通过氧化外界无机物获得生长所需能量,叫做化能合成作用,D正确。2(2019长沙模拟)右图是微生物
2、平板划线示意图。划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是()A将接种环放在酒精灯火焰边灼烧灭菌B划线操作要在酒精灯火焰上进行C只有在5区域中才可以得到所需菌落D在2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灼烧灭菌解析:选D操作时要把接种环放在酒精灯火焰上而不是火焰边灼烧灭菌,A错误;划线操作要在酒精灯火焰旁而不是火焰上进行,B错误;5区域是最后一个区域,既可能在5区域中得到所需菌落,也可能在其他区域中得到所需菌落,C错误;在2、3、4、5区域划线前后都要对接种环灼烧灭菌,D正确。3用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时,通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。原因是()A平板上的一个
3、菌落就是一个细菌B菌落中的细菌数是固定的C此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数目相同解析:选C用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时,平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。通过该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。4做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是()A高压灭菌加热结束时,打开排气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖B倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C为了防止污染,接种环经火焰
4、灭菌后应趁热快速挑取菌落D用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上解析:选D在高压灭菌的操作过程中,加热结束后应让灭菌锅内温度自然下降,待压力表的压力降到零时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子,A错误;倒平板时,用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不是完全取下放到一边,B错误;接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后再挑取菌落,C错误;在微生物的培养中,一般将培养皿倒置,在皿底上用记号笔做标记,D正确。5(2019扬州中学期末)下列有关微生物的分离与培养的叙述中,不正确的是()A获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染B倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴落造成污染C倒平板时将培养皿的盖拿开,以便
5、于将锥形瓶中的培养基倒入培养皿D检验培养基是否被杂菌污染的最有效方法是将未接种的培养基放在恒温箱中培养解析:选C为避免杂菌污染培养基,倒平板时用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约1020 mL)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖。6下图表示从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。下列与该实验相关内容的叙述中不正确的是()A实验中所用的培养基均属于选择培养基B图中、过程实现了对目标微生物的稀释C统计处培养基中的菌落数并不一定代表接种到上的活菌数D在处培养基上形成菌落的微生物同化作用类型为异养型解析:选B该实验的目的是从土壤中分离能分解对羟基苯甲
6、酸的微生物,所以使用的培养基为选择培养基,A正确;图中、过程为选择培养,目的是增大所分离的微生物的浓度,B错误;从中可以看出,接种微生物的方法是平板划线法,但有些划线中的微生物并不一定是单个存在的,所以上的菌落数并不一定代表接种到上的活菌数,C正确;所分离的微生物利用现成的有机物生长繁殖,所以该微生物的同化作用类型为异养型,D正确。7下列有关生物学实验原理和技术操作的叙述,正确的是()A从有机废水中分离分解有机物的微生物时,接种后的培养皿须在光照培养箱中培养B在葡萄酒发酵过程中,每隔12 h左右打开瓶盖一次,放出CO2C用显微镜观察细胞时,若细胞为无色透明,可调节通光孔使视野暗一些D若用稀释涂
7、布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的稀释度解析:选D有机废水中的微生物是分解者,不能进行光合作用,培养不需要光照,A错误;在葡萄酒发酵过程中,为了防止杂菌污染,应每隔12 h左右拧松瓶盖一次,B错误;用显微镜观察细胞时,若细胞为无色透明,可调节光圈或反光镜使视野暗一些,而通光孔是不可变的,C错误。8(2019长郡中学期中)在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前一般先进行选择培养,其主要目的是()A分离纤维素分解菌B加快纤维素分解菌的生长速度C使纤维素分解菌均匀地分布在稀释液中D增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样
8、品中分离得到所需要的微生物解析:选D纤维素分解菌的选择培养基中富含纤维素粉,主要适合于能产生纤维素酶的纤维素分解菌的生长,所以选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样品中分离得到所需要的微生物。9下列关于微生物培养的叙述,错误的是()A因为土壤中各类微生物的数量不同,所以,为获得不同类型的微生物一般要按不同的稀释倍数进行分离B测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围不同C利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数D接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落解析:选C土壤中各种微生物数量不同,大约70%90%为细菌,放线菌和真菌较少
9、,故为获得不同类型的微生物,一般要按不同稀释倍数进行分离,A正确;测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围不同,B正确;稀释涂布平板法能用于微生物的计数,C错误;接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落,D正确。10(2019荆州期中)下列关于微生物的培养和应用的叙述,错误的是()A测定培养液中微生物数量,可选用显微镜直接计数法B若要测定活菌数量,可选用稀释涂布平板法进行计数C一般用液体培养基来分离和鉴定纤维素分解菌D在筛选能分解纤维素的细菌的实验中,选择培养的目的是增大样品中菌株的浓度解析:选C显微镜直接计数法是测定培养液中微生物数量的方法之一,A正
10、确;若要测定活菌数量,可选用稀释涂布平板法进行计数,B正确;在纤维素分解菌分离与鉴定实验中,用到的培养基按照物理状态为固体培养基,C错误;在筛选能分解纤维素的细菌的实验中,选择培养的目的是增大样品中菌株的浓度,D正确。11下列有关“微生物的分离与培养”实验的叙述中,正确的是()A利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化、分离和计数B对培养皿进行编号或对菌种进行标注时,应使用记号笔在皿底标记C倒平板时,应将打开的培养皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上D将好氧型菌株接种到培养液中需静置培养,防止培养液沾染试管壁引发污染解析:选B利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化、分离,但是不能对微生物进行计数,
11、计数一般采用稀释涂布平板法,A错误;对培养皿进行编号或对菌种进行标注时,应使用记号笔在皿底标记,B正确; 倒平板时,不能将打开的培养皿盖放到一边,以免微生物污染,C错误;将好氧型菌株接种到培养液中需振荡培养,D错误。12下列关于统计菌落数目方法的叙述,错误的是()A采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的菌落数B当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落C为了保证结果准确,一般采用密度较大的平板进行计数D在某一浓度下涂布三个平板,若三个平板统计的菌落数差别不大,则应以它们的平均值作为统计结果解析:选C当两个或多个活菌连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,因此统计的菌落数往往比活菌的实际数
12、目少。一般选择菌落数在30300的平板计数,密度过大会使计数结果偏小,影响结果的准确性。至少涂布3个平板,作为重复组,取其平均值计数能增强实验的说服力和准确性。13在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验,在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素(浓度相同)的无菌滤纸片,d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如图所示。以下判断错误的是()Aa处抑菌效果小于b处Bb处的滤纸片没有沥干Cc处抗生素无效Dd为对照解析:选A培养皿中不同滤纸片四周透明圈的大小不同,透明圈越大,说明浸有的抗生素抑菌效果越好。a处的透明圈大于b处;b处不是圆形的透明圈,可能是滤纸片没有沥干,抗生素流出滤纸片;c处无透明圈,说明c处抗生
13、素对大肠杆菌无效;d为空白对照。14(2019北京卷)筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后,若细菌能分解淀粉,培养平板经稀碘液处理,会出现以菌落为中心的透明圈(如图),实验结果见下表。菌种菌落直径:C(mm)透明圈直径:H(mm)H/C细菌5.111.22.2细菌8.113.01.6有关本实验的叙述,错误的是()A培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质B筛选分解淀粉的细菌时,菌液应稀释后涂布C以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外DH/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异解析:选C筛选淀粉分解菌的培养基中,除淀粉提供碳源外,还需要氮源、水、无机盐等营养物质,A正确;筛选分离
14、淀粉分解菌时需要将菌液进行一定程度的稀释才能涂布培养,B正确;据图分析可知,两个菌落均产生了透明圈,说明两种细菌均能将淀粉酶分泌至细胞外,C错误;据表分析可知,H/C值越大,分解淀粉能力越强,该值的大小反映了两种细菌分解淀粉能力的差异,D正确。15现有两种固体培养基,已知其配制时所加的成分和含量如下表,用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物,你认为它们适于分离()成分KH2PO4MgSO47H2ONaClCaSO42H2OCaCO3葡萄糖纯淀粉甲培养基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培养基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%A.甲培养基适于分离自养
15、型自生固氮菌;乙培养基适于分离异养型自生固氮菌B甲培养基适于分离异养型自生固氮菌;乙培养基适于分离自养型自生固氮菌C甲培养基适于分离酵母菌;乙培养基适于分离真菌D甲培养基适于分离自养型共生细菌;乙培养基适于分离异养型共生固氮菌解析:选B固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌,需和其他生物结合在一起才能生存的是共生固氮菌,甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物,由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌;乙培养基中不含有机碳源,所以可用来分离培养自养型的自生固氮菌。二、非选择题(共55分)16(10分)回答与微生物实验室培养有关的问题:(1)在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是_。若培养基需调节pH,
16、则应在灭菌之_(填“前”或“后”)调节。(2)为防止外来杂菌入侵,对_等可采用干热灭菌法进行灭菌。(3)如图为平板划线法接种后的示意图。在划线接种的整个操作过程中,对接种环至少需进行_次灼烧灭菌。接种后盖上皿盖,将平板_放入恒温箱中培养,这样放置的目的是_。(4)用稀释涂布平板法统计活菌数目时,每隔一个“时间间隔”统计一次菌落数目,最后选取_作为结果,这样可以防止因培养时间不足而遗漏菌落的数目。解析:(1)制备固体培养基通常加入的凝固剂是琼脂。培养基若在灭菌后调pH,可造成污染,故培养基调pH应在灭菌前进行。(2)灭菌的方法通常有高压蒸汽灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌三种。采用干热灭菌的通常有玻璃器
17、皿和金属用具。(3)平板划线接种过程中需在接种前、每次划线后对接种环进行灼烧灭菌。图中共接种5个区域,故接种环至少需要进行6次灼烧灭菌处理。微生物培养过程中,易产生冷凝水,为防止水珠滴在培养基表面造成污染,培养时需将平板倒置。(4)用稀释涂布平板法统计活菌数目时,要以菌落数目稳定时的记录为最终结果,这样可以防止因遗漏而导致统计结果偏小。答案:(1)琼脂前(2)玻璃器皿和金属用具(3)6倒置避免培养基被污染和防止培养基水分过快挥发(4)菌落数目稳定时的记录17(8分)(2019郴州质检)分解尿素的微生物广泛存在于农田等土壤中,某生物实验小组尝试对分解尿素的微生物进行分离与计数。请回答下列问题:(
18、1)分解尿素的微生物能产生_酶;配制培养基时应以_作为唯一氮源。(2)培养基中添加_作为指示剂,培养后,培养基pH会_(填“升高”或“降低”),可使指示剂变红色。(3)对尿素溶液进行灭菌的最适方法是_。(4)该小组在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,这样做的目的是_;然后将1 mL样液稀释10 000倍,在3个平板上用涂布法分别涂布0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板的菌落数分别为39、42和45。据此可得出每毫升样液中分解尿素的微生物活菌数为_个。解析:(1)分解尿素的微生物能产生脲酶;配制培养基时应以尿素作为唯一氮源。(2)在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶分
19、解尿素可产生氨,氨会使培养基的pH升高,进而使酚红指示剂变红。(3)对尿素溶液进行灭菌的最适方法是过滤法。(4)在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,其目的是检测培养基平板灭菌是否合格。每毫升样液中分解尿素的微生物活菌数(CV)M(394245)30.110 0004.2106(个)。答案:(1)脲尿素(2)酚红升高(3)过滤法(4)检测培养基平板灭菌是否合格4.210618(10分)有机磷农药是用于防治植物病虫害的含磷有机化合物,广泛应用于农业生产中,有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标,不少品种对人、畜的毒性很强,人误食后如不及时医治就会危及生命,某班同学欲从土壤中分离高效降
20、解有机磷农药的微生物。请回答下列问题:(1)为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种,可在被有机磷农药污染的土壤中取样,并在含有碳源、氮源及_等的选择培养基上添加_进行选择培养。(2)将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1 L含20 mg有机磷农药的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜),观察实验开始到微生物停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时,则应选择微生物_(填“甲”“乙”或“丙”)作为菌种进行后续培养,理由是_。(3)制备固体培养基的基本步骤是计算_溶化分装加棉塞包扎_倒平板。(4)若要测定培养液中选定菌种的菌体数,既可在显微镜下用_直接
21、计数,也可选用_法统计活菌数目。解析:(1)微生物生长所需要的营养一般包括水、无机盐、碳源和氮源。因筛选能降解有机磷农药的微生物,故培养基中需添加适量的有机磷农药。(2)从观察实验开始到微生物停止生长,丙所用时间最短,说明其对有机磷农药的降解能力较甲、乙强。(3)制备固体培养基的基本步骤是计算称量溶化分装加棉塞包扎高压蒸汽灭菌倒平板。(4)菌体数测定可通过显微镜利用血细胞计数板直接计数,也可以利用稀释涂布平板法统计活菌数量。答案:(1)水和无机盐有机磷农药(2)丙微生物丙分解有机磷农药的能力比甲、乙强(3)称量(高压蒸汽)灭菌(4)血细胞计数板稀释涂布平板19(8分)微生物强化采油(MEOR)
22、是利用某些微生物能降解石油,增大石油的乳化度,降低石油黏度的原理,通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题:(1)土壤是微生物的大本营,该类微生物应取自_的土壤。(2)为筛选和纯化该类微生物,从功能上分,应选用_培养基。常用的接种方法是_和_。(3)接种后,应密封培养的原因是_,培养一段时间后在培养基上形成降油圈,此时选取_就可获得高效菌株。(4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2 mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计三个平板,菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为_个/mL。该统计结
23、果_(填“低于”或“高于”)实际值。解析:(1)在长期被石油污染的土壤中生存下来的微生物,能降解石油,所以取样时应从含石油多的土壤中采集。(2)从功能上分,应选用特定的选择培养基进行筛选和纯化该类微生物;常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(3)该类微生物是厌氧微生物,接种后应密封培养;培养一段时间后在培养基上可形成降油圈,降油圈越大,说明该处的微生物降解石油的能力越强,所以应选择降油圈大的菌落进行培养以获得高效菌株。(4)计算微生物的数量应取三个平板的平均值,即(200180220)30.21 000(个/mL),该结果会低于实际值,因为当两个或多个菌体连在一起时,平板上观察到的只是
24、单个菌落数。答案:(1)长期被石油污染(含石油多)(2)选择平板划线法稀释涂布平板法(3)该类微生物是厌氧型的降油圈大的菌落(4)1 000低于20(8分)欲从腐乳中分离筛选出产蛋白酶活力高的毛霉菌株,设计了如下实验流程:回答下列问题:(1)毛霉属于_(填“真核”或“原核”)生物。在腐乳制作中,主要利用毛霉等微生物产生的_酶将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分子物质。(2)步骤进行涂布前,需将孢子悬浮液进行梯度稀释,进行梯度稀释的目的是_。若进行10倍稀释,一般吸取1 mL悬浮液注入_中,混匀。(3)孟加拉红培养基常用于分离霉菌及酵母菌,在孟加拉红培养基中加入氯霉素可以抑制细菌的生长。从功能上看,
25、孟加拉红培养基属于_培养基。(4)毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈,在酪蛋白培养基中筛选到三个单菌落甲、乙、丙,其菌落直径分别为3.2 cm、2.8 cm、2.9 cm,其菌落与透明圈一起的直径分别为3.7 cm、3.5 cm、3.3 cm。应选择菌落_作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。解析:(1)毛霉属于真核生物。在腐乳制作中,主要利用毛霉等微生物产生的蛋白酶和脂肪酶将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分子物质。(2)将孢子悬浮液进行梯度稀释的目的是增加悬浮液的稀释度,涂布培养能分离到单菌落。若进行10倍稀释,一般吸取1 mL悬浮液注入9 mL无菌水中,混匀。(3)孟加拉红培养基常用于分离霉菌
26、及酵母菌,据此可知:从功能上看,孟加拉红培养基属于选择培养基。(4)毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈,透明圈与菌落直径的比值反映了毛霉菌株产蛋白酶活力的能力,因此应挑选透明圈与菌落直径比值最大的菌体,即应选择菌落乙作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。答案:(1)真核蛋白酶和脂肪(2)增加悬浮液的稀释度,涂布培养能分离到单菌落9 mL无菌水(3)选择(4)乙21(11分)(2019长春二模)下面是筛选抗链霉素大肠杆菌的实验步骤及相关图解。实验步骤:把大量对链霉素敏感的大肠杆菌接种在不含链霉素的培养基1的表面,进行培养。待其长出密集的小菌落后,用影印法接种到不含链霉素的培养基2上,随即再影印到含
27、有链霉素的培养基3上,进行培养。在培养基3上出现了个别抗链霉素的菌落,将其挑选出。请回答:(1)配制培养基时除了满足基本的营养条件外,还需满足微生物生长对特殊营养物质、_、_的要求。(2)从功能上看,含有链霉素的培养基属于_培养基。若在培养基中加入伊红和美蓝,则培养皿中长出的菌落颜色为_。由图可知,1号培养基接种的方法为_。(3)对2和3进行比较,在2上找到与3上相应的菌落,挑取其中一个菌落接种到_(填“含链霉素”或“不含链霉素”)的培养基上,如果有较多的菌落出现,则说明该抗性基因突变发生在该菌接触链霉素之_(填“前”或“后”)。(4)3中的菌落比1、2中的菌落少很多,这说明了基因突变具有_的
28、特点。解析:(1)配制培养基时在提供几种基本营养条件的基础上,还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。(2)链霉素是抗生素,对大肠杆菌具有选择作用。在伊红和美蓝培养基上,大肠杆菌菌落颜色为黑色。由题图可知,1号培养基接种的方法为稀释涂布平板法。(3)培养基2和培养基3上相同的菌落,是具有相同性状的大肠杆菌形成的,在培养基2上找到与3上相应的菌落,挑取其中一个菌落接种到含链霉素的培养基上,若出现较多的菌落,则说明该抗性基因突变发生在该菌接触链霉素之前。(4)抗链霉素性状是大肠杆菌基因突变后获得的性状,3号培养皿中的菌落比1号、2号中的菌落少很多,说明了基因突变频率很低。答案:(1)pH氧气(2)选择黑色稀释涂布平板法(3)含链霉素前(4)频率低(低频性)