1、生物人教版选修1专题2微生物的培养与应用单元检测（时间：60分钟，满分：100分）一、选择题（共25小题，每小题2分，共50分）1将配制好的培养基进行灭菌，应用（）。A灼烧灭菌 B高压蒸汽灭菌C干热灭菌 D煮沸灭菌2高温灭菌的原理是（）。A每种微生物生长的最适温度是一定的B微生物对高温环境不适应C高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动D高温降低了环境中氧的浓度3下列有关微生物培养与应用的说法正确的是（）。A天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D分
2、离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源4下列叙述正确的是（）。A培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌5检验培养基是否有杂菌污染的最有效方法是（）。A将未接种的培养基放在实验桌上培养B将未接种的培养基放在窗台上培养C将未接种的培养基放在恒温箱中培养D将已接种的培养基放在恒温箱中培养6微生物与人类生产、生活密切相关，下列相关说法不合理的是（）。A土壤中的微生物能降解多种化合物，是大自然的清洁工B生活中许多发酵产品需要微生物，如酿醋需要的关键细菌是
3、酵母菌C可利用能分解纤维素的微生物分解秸秆，并将其产物转化为乙醇D许多微生物也可导致人类患病7下列关于平菇（所需碳源为纤维素）培养的操作程序，正确的是（）。A配制牛肉膏蛋白胨培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养B配制牛肉膏蛋白胨培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养C配制棉子壳培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养D配制棉子壳培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养8下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是（）。A利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数B接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落C以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化
4、是先减少后增加9梯度稀释过程中用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后，要用手指轻压移液管的橡皮头，吹吸三次，其目的是（）。A增加试管内的溶氧量B使菌液与水充分混匀C使试管中菌液的浓度降低D使细菌的形态结构发生改变10下列有关平板划线操作的叙述，不正确的是（）。A将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红B接种环在平板上划线位置是随机的C在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰D最后将平板倒置，放入恒温箱中培养11发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一菌种。消灭杂菌，获得菌种的方法不包括（）。A根据微生物对碳源需要的差别，使用不同碳源的培养基B根据微生物中缺乏生长因子的种类，在培养基中增减
5、不同的生长因子C根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸D根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素12在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用只含尿素作氮源的培养基，乙组实验用另加入硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作、培养与观察，则乙组实验属于（）。A空白对照 B标准对照C相互对照 D条件对照13在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是（）。加抗生素不加抗生素加氮素不加氮素加葡萄糖不加葡萄糖A BC D14以下关于倒平板的操作，错误的是（）。A在火焰
6、旁取下装有培养基的瓶塞B倒平板前，让锥形瓶的瓶口迅速通过火焰C倒平板时将培养皿的盖拿开，以方便于将锥形瓶中的培养基倒入培养皿D平板冷却凝固后要倒过来放置15以下关于菌落的叙述，正确的是（）。A一定是圆形的B一定是黄色的C大小一定是相同的D观察到的单个菌落也有可能来自2个菌体的增殖16以下关于菌种保藏的叙述，错误的是（）。A菌种保藏的目的是保持菌种的纯净B固体斜面培养基可用于菌种的临时保藏C菌种的长期保存一般采用甘油管藏D由于甘油管藏菌种在20 条件下进行，因此对甘油可不必灭菌17要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（）。A固体培养基B液体培养基C加入青霉素的培养基D加入高浓度食盐的培养基18
7、自养微生物所需碳源和能源为不同的物质，而可以作为异养微生物碳源和能源的是（）。ACO2 BNaHCO3C碳酸盐 D含碳有机物19下列对刚果红染色法的叙述，不正确的是（）。A可以先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应B可以在倒平板时就加入刚果红C既可以先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，也可以在倒平板时就加入刚果红D可以将刚果红与培养基中的其他物质混合后再灭菌倒平板20微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，错误的是（）。煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢接种操作要在酒精灯火焰附近进行无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植
8、体要进行消毒家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌培养基要进行高压蒸汽灭菌加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A BC D21用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时（）。可以用固体培养基都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种都可以用来计数活菌A BC D22在细菌的连续培养过程中，要以一定速度不断添加新的培养基，同时以同样速度放出老的培养基。右图表示培养基的稀释率（培养基的更新速率）与培养容器中营养物质浓度、细菌代时（细菌数目增加一倍所需的时间）、细菌密度的关系。下列相关叙述不正确的是（）。A在稀释率很低的情况下，稀释率的增加会导致细菌密度增加B稀释率从A到B的变化过程中，细菌生长
9、速率不断提高C稀释率超过B点后，营养物质浓度过高导致细菌死亡率增大，细菌密度降低D为持续高效地获得发酵产品，应将稀释率控制在B点附近23培养基配制需要运用灭菌和消毒技术，但两者消灭的微生物种类和数量是不同的。下列哪一项能正确表示消毒结果和灭菌结果之间的关系？（）24美国研究人员通过对大肠杆菌进行基因改造，可以使它将植物纤维逐渐转化为生物燃料。这种细菌不仅能以传统生物能源技术中使用的蔗糖为原料，还能将广泛存在于植物纤维中的半纤维素分解合成为燃料物质。若要将这种大肠杆菌分离出来，应将它们接种在（）。A不含氮源的培养基上B含有蛋白胨的固体培养基上C只含半纤维素而无其他碳源的选择培养基上D不含营养要素
10、的培养基上25下列对四种微生物的相关叙述，错误的是（）。ACO2和NH3分别是硝化细菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自NH3的氧化BCO2和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源，该生物所需的能源来自太阳能C糖类和N2是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自乳酸的氧化分解D葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，但CO2一定不是酵母菌的碳源二、非选择题（共5小题，共50分）26（14分）炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病，炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状，对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。（1）细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。（2）细菌鉴定
11、：实验流程如图所示对配制的液体培养基等需采取_灭菌；实验所用液体培养基的碳源为_（填“无机碳”或“有机碳”）。挑选可疑菌落制片后，用_观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。接种可疑菌后，35 培养24 h，液体培养基变浑浊，原因是_，对照组试管中应加入_，与实验组同时培养6 h后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_（填“高”或“低”），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有_。27（10分）发酵法生产酒精后的废液（pH4.3）含有大量有机物，可用于培养、获得白地霉菌体，生产高蛋白
12、饲料。培养、制取白地霉菌体的实验过程示意图如下：请据图分析回答问题。（1）实验过程中培养白地霉的培养基是_。培养基定量分装前，先调节_，分装后用棉塞封瓶口，最后_处理。（2）图中过程称为_，从甲到丁的培养过程是为了_。白地霉的代谢类型为_。（3）为确定菌体产量，图中操作之前，应先称量_的质量。过滤后需反复烘干称量，直至_。所得菌体干重等于_。28（8分）从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从_环境采集。（2）富集培养指创设仅适合待分
13、离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培养基，并在_条件下培养。（3）下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是_，获得图B效果的接种方法是_。（4）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_，接种前要进行_，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_条件下进行。29（10分）根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜检，以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金
14、黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛选的方法、步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容。首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行高温灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养。（1）用无氮培养基可筛选出_。（2）用不含有机碳源的选择培养基可筛选出_。（3）酵母菌的筛选需要在常规培养基中另外加入_。（4）用加了较高浓度NaCl的培养基可选择出_，或者根据菌落的颜色呈现_色，将其挑取单独培养。（5）利用伊红和美蓝培养基培养混合菌，菌落呈_色并带有金属光泽的是_，挑取该菌落单独培养。结合显微镜检和进一步用伊红和美蓝培养基鉴别培养来确定。（6）在无氧环境下培养混合菌，_可
15、以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制_的生长，利用菌落特征，结合显微镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出_。30（8分）莠去津是一种含氮的有机化合物，它是广泛使用的除草剂之一。莠去津在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，按下面程序选育能降解莠去津的细菌（目的菌）。已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明。请据图回答下面的问题。（1）由于莠去津的_作用，在长期使用莠去津的土壤中可能含有目的菌。（2）下图是AC瓶中三类细菌的最大密度柱形图，由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的目的是_；甲类细菌密度迅速降低的主要原因是_。（3）在固体培养基中，无透明带菌落利用的氮源
16、主要是_；有透明带菌落利用的氮源主要是_，据此可筛选出目的菌。参考答案1答案：B解析：为保证各种成分的比例不受影响，配制好的培养基应用高压蒸汽灭菌。2答案：C解析：相对于动植物来说，微生物的耐高温能力是很强的。灭菌即杀死各种微生物及其他生命形态（如芽孢），所以要采用更高温度以破坏微生物体内蛋白质、核酸的分子活性，以使其永远丧失生活能力。3答案：C解析：天然培养基是成分不明确的培养基，并不是不需加工配制的培养基；实验者的双手需进行消毒处理；分离分解尿素的细菌时，尿素是唯一氮源而不是唯一的碳源。4答案：A解析：按物理状态不同，培养基可分为液体培养基、半固体培养基、固体培养基；按用途不同，培养基又可
17、分为选择培养基和鉴别培养基。固体培养基由于添加了凝固剂琼脂，所以即使加入少量水也不可能制成液体培养基。单个细菌是肉眼看不见的，由同种细菌的众多菌体构成的菌落是肉眼可以看见的。5答案：C解析：检验培养基有没有被杂菌污染，可选取未接种的培养基与接种样品的培养基同时在恒温箱中培养。如果在培养过程中未接种的培养基没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染；若未接种的培养基有菌落生长，说明培养基被杂菌污染。6答案：B解析：酵母菌是一种真菌。酿醋首先使用酵母菌发酵得到酒精，然后在有氧条件下再用醋酸菌发酵得到食用醋。故选B。7答案：D解析：培养微生物的正确操作流程应该为：配制培养基灭菌接种培养，平菇的碳源为纤维
18、素，所以富含纤维素的棉子壳适于用作平菇的培养基。8答案：D解析：稀释涂布平板法可以用于分离微生物以及对微生物计数；接种时要连续划线，这样可以获得单个菌落；大白菜腌制过程中开始时细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，一般腌制10天后亚硝酸盐含量下降。9答案：B解析：用手指轻压移液管上的橡皮头，其目的是使菌液和水充分混匀，减小下次稀释时的误差。10答案：B解析：A、C、D均属于正确的无菌操作步骤。用接种环在培养基上划线时应把培养基划分成5个首尾相连的区域，划线位置不是随机的。11答案：C解析：由于不同的微生物对碳源、氮源、无机盐、生长因子的需求不同，可以根据微生物的生长需求来配制特殊的培养基以获得单一纯
19、种，也可以根据其对抗生素的敏感性不同，加入不同的抗生素来获得单一纯种。12答案：D解析：甲、乙组的自变量为是否仅以尿素作为培养基的氮源，因变量为是否特异性地分离出分解尿素的细菌，甲组为实验组，乙虽然对培养基作了特殊的处理（另加入硝酸盐），但这种处理起对照作用，叫条件对照。13答案：C解析：自生固氮菌是以N2为氮源、以土壤基质中的有机物为碳源和能源的细菌，所以要将其与其他细菌分开所用的特制培养基不需另加氮源。所有细菌对抗生素都敏感，所以为了使自生固氮菌正常生活，不得加入抗生素。14答案：C解析：为避免杂菌污染培养基，倒平板时用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝，右手将锥形瓶中的培养基（约1020
20、 mL）迅速倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。15答案：D解析：菌落的形状、大小、隆起程度和颜色是区分不同菌种的重要依据，因此不同菌种菌落的形状、颜色、大小往往是不同的。由于涂布操作接种液稀释度不高或划线操作划线次数较少可能使个别菌体没有分开而相连，增殖形成一个菌落。16答案：D解析：接种前培养基都需灭菌。17答案：A解析：固体培养基主要用于微生物分离、鉴定等。液体培养基用于工业生产。加入青霉素的选择培养基能抑制细菌、放线菌的生长，从而分离酵母菌和霉菌。加入高浓度食盐能抑制多种细菌的生长，可分离金黄色葡萄球菌。本题没有说明分离哪种细菌，故应用固体培养基，如在固体培养基上以划线方法接种，然后
21、再分离出菌落。18答案：D解析：碳源主要用于构成微生物细胞和一些代谢产物，有些碳源还是异养微生物的主要能源物质，异养微生物通常只能利用含碳有机物作为碳源。19答案：D解析：刚果红染色法一般有两种：一是先培养微生物长出菌落后，再加入刚果红进行颜色反应；一种是配制好培养基灭菌后，倒平板时加入灭菌处理的刚果红，再接种微生物培养，直至产生透明圈。20答案：D解析：无菌操作包括消毒和灭菌。需进行消毒处理的有植物的外植体及操作人员的双手等，需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂（指示剂或染色剂）等。煮沸可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢，属于消毒；为防止空气中杂菌污染，接种时要在酒精灯火焰附近进行；家庭制作
22、葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能灭菌；培养基常进行高压蒸汽灭菌。故操作错误。21答案：C解析：平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故错误。22答案：C解析：稀释率超过B点，细菌密度降低，并不是由于营养物质浓度过高而使细菌死亡，营养物质浓度增加不会造成细菌死亡。图中细菌密度减少是由稀释率过高造成的。23答案：B解析：消毒实际上是部分灭菌。24答案：C解析：微生物生长繁殖所需的营养
23、物质分为碳源、氮源、水和无机盐。要将能分解半纤维素的大肠杆菌分离出来应选用选择培养基。因此可以添加基因改造后大肠杆菌能利用而其他大肠杆菌不能利用的碳源来达到分离选择所需细菌的目的。25答案：C解析：乳酸菌不能固氮，因此N2不是其氮源，乳酸是乳酸菌的代谢产物。26解析：对微生物的培养基一般采用高压蒸汽灭菌，以维持各成分比例及pH的稳定性。液体培养基的浑浊度与微生物的密度呈正相关，由培养基的浑浊度可推断微生物的密度。答案：（每空2分）（2）高压蒸汽有机碳显微镜细菌大量繁殖等量生理盐水低吞噬细胞、浆细胞27答案：（每空2分）废液上清液pH灭菌答案：（每空2分）接种扩大培养异养需氧型答案：（每空2分）
24、滤纸恒重（质量基本不变）恒重时的质量与滤纸质量之差（答案合理即可）解析：从题干可知，该实验是用发酵法产生酒精后的废液来培养白地霉菌，再分析题中的流程图可知废液上清液就是白地霉菌的培养液。制备培养液的几个要点：营养要均衡，pH要适宜，无菌。所以在分装前首先要调节pH，然后进行灭菌，杀死所有的微生物，冷却后接种。接种完成后要进行扩大培养以便获得更多的微生物菌体。用发酵法产生酒精后的废液含有大量的有机物，并且培养菌体的锥形瓶是开放的，可推知白地霉菌的代谢类型是异养需氧型。经过一段时间的培养要获得菌体的重量，可采用差值法，即先称滤纸的重量，再用滤纸过滤培养液，将得到的过滤物连同滤纸一起进行烘干，直至烘
25、干物的重量不发生变化，此时的重量减去滤纸的重量即获得所培养微生物菌体的重量。28答案：（每空1分）海滩等高盐答案：（每空1分）以淀粉为唯一碳源高温答案：（每空1分）稀释涂布平板法平板划线法答案：（每空1分）pH调整高压蒸汽灭菌无菌解析：噬盐菌的菌样应从高盐环境采集。微生物产生淀粉酶说明其碳源是淀粉，应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养。图A菌落分布较均匀，接种方法是稀释涂布平板法，图B菌落集中呈线状，接种方法是平板划线法。配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，接种前要进行高压蒸汽灭菌，在实验中要注意在无菌条件下进行。29答案：（每空1分）圆褐固氮菌答案：（每空1分）
26、硝化细菌答案：（每空1分）某种抗生素，如青霉素答案：（每空1分）金黄色葡萄球菌橘红（金黄）答案：（每空1分）深紫大肠杆菌答案：（每空1分）大肠杆菌、乳酸菌、酵母菌大肠杆菌和酵母菌乳酸菌解析：圆褐固氮菌为固氮微生物，可以利用空气中的氮气，因而可以在不含氮源的培养基上生存。硝化细菌为自养型微生物，可在不含有机碳源的培养基上生长。在培养基上加入青霉素，可抑制细菌、放线菌生长，从而可分离出酵母菌和霉菌。高浓度的食盐可抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长。伊红和美蓝与大肠杆菌代谢产物结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽。乳酸菌产生的乳酸可抑制其他微生物的生长，但对自己的生长影响不大。30答案
27、：自然选择答案：初步选择能降解莠去津的细菌（目的菌）并提高其密度培养液中缺少甲类细菌可利用的氮源或（和）有氧条件抑制了甲类细菌的生长答案：氮气莠去津解析：由于长期使用莠去津，通过莠去津的选择作用，该地土壤中可能含有能分解莠去津的细菌。图中的培养流程一定要注意无氮培养基和过量莠去津及振荡培养，A、B、C三瓶中各类细菌密度不同，通过对比三者的生活条件，A瓶刚从土壤浸出液中分离出来，可能含有少量的氮源，随着培养的进行氮源逐渐减少，甲类细菌不能适应而迅速减少，也可能是振荡造成培养液中溶氧增加，使甲类细菌迅速减少。对培养结果进行分析可知，无透明带菌落利用的氮源可能是空气中的氮气，因培养基中的莠去津未被利用而未出现透明圈，出现透明带菌落说明莠去津被分解利用，据此可筛选出目的菌。
