1、课时训练34微生物的利用一、选择题(共10小题)1.在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出()A乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌B固氮细菌、大肠杆菌、放线菌C固氮细菌、霉菌、放线菌D固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌解析：在缺乏氮源的培养基上可以分离出固氮细菌；在培养基中加入青霉素可以分离出霉菌；在培养基中加入10%酚可以分离出放线菌。答案：C2无菌技术常围绕着如何避免杂菌的污染展开，下列常见的无菌技术中，属于灭菌处理的是()A操作者的双手用酒精擦拭B实验室用紫
2、外线照射C对接种环进行灼烧处理D水源用氯气处理解析：灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。答案：C3下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是()A微生物培养前，需对培养基进行消毒B测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析：微生物培养前，需对培养基进行灭菌处理，要将所有的微生物杀死。答案：A4.下列关于大肠杆菌的培养的叙述不正确的是()A在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件B在微生
3、物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行消毒C若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的稀释度合适D使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃解析：培养过程中，除营养条件要满足需要外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件是否适宜；灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，所以，应对培养基和培养皿进行灭菌而不是消毒；使用稀释涂布平板法时要保证样品稀释比例合适，这样才会有更科学的数据；有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，所以使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才
4、能丢弃，以防止培养物的扩散。答案：B5.下列有关培养基和菌种鉴定的叙述正确的是()A微生物培养所用的都是液体培养基B利用半固体培养基上的菌落特征来判断和鉴别细菌的类型C利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌D在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌解析：微生物培养还会用到固体培养基和半固体培养基；利用固体培养基上的菌落特征来判断和鉴别细菌类型；在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。答案：C6.平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是()A都要将菌液进行一系列的梯度稀释B平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续
5、划线的操作C稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养D都会在培养基表面形成单个的菌落解析：平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法需要将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。答案：D7.在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用以尿素为唯一氮源的培养基，乙组实验的培养基中的氮源除尿素外还含有硝酸盐，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养观察，则乙组实验属于()A空白对照 B标准对照C相互对照 D条件对照解析：乙组和甲组实验的培养条件不同，形成了条件对照。答案：D8苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中
6、存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，为土壤样品。下列相关叙述错误的是()A图中培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B如果要测定中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C若图中为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一碳源D使用平板划线法可以在上获得单菌落解析：若为对照实验，则中培养基应含除苯酚外的其他碳源，中以苯酚作为唯一碳源。答案：C9.欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是()A将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C可将未接
7、种的培养基在相同条件下培养作为对照D用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出能分解尿素的细菌解析：为了获得单个菌落，应将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确；为了使结果更加准确，同一稀释度下至少要涂布3个平板进行重复实验，B正确；加入刚果红的培养基用来筛选纤维素分解菌，D错误。答案：D10.(多选)下列有关微生物培养的说法正确的是()A乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是不相同的B培养基的pH因微生物的种类不同而不同C培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的增殖越有利D培养基中加入适量的杀菌剂有利于抑制杂菌的生长解析：乳酸菌的碳源是有机物，比如葡萄糖、乳糖等，硝化细菌是化能自养生物，能利用CO2和H
8、2O合成有机物；各种微生物生长所要求的最适pH不同，如培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性，培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性；营养液浓度过高，会使微生物处于较高的渗透压环境中，导致微生物会因失水过多而死亡；杀菌剂是用于防治由各种病原微生物引起的植物病害的一类农药，一般指杀真菌剂，如果培养的是真菌，杀菌剂会将所需真菌杀灭，如果培养的目的菌为细菌，可在培养基中加入几种合适的抗生素，用以抑制杂菌生长，使所需的微生物正常生长。答案：AB二、非选择题(共4小题)11.请回答下列与微生物培养有关的问题。(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、_和_等条件。(2)在微生物培养操作过
9、程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行_；操作者的双手需要进行清洗和_；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线既能使蛋白质变性，又能_。(3)若用稀释涂布平板法对大肠杆菌活菌进行计数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保持待测样品稀释的_。(4)通常对获得的纯菌种可以依据菌落的_等菌落特征进行初步的鉴定(或分类)。(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢弃，以防培养物扩散。答案：(1)酸碱度渗透压(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3
10、)比例合适(4)形状、大小、颜色(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(6)灭菌12.某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题：(1)牛肉膏蛋白胨固体培养基配方如下：牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂蒸馏水5.0 g10.0 g5.0 g20.0 g定容至1 000 mL其中提供氮源的是_；提供碳源的主要物质是_。(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，配制培养基时各成分要有合适的_。在烧杯中加入琼脂后要不停地_，防止
11、_。(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌，压力100 kPa，温度_，时间_。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应_。(4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意，先向锅内倒入_。把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。(5)从一支试管向另一支试管接种时注意，接种环要在酒精灯_(填“内”或“外”)焰灭菌，并且待接种环_后蘸取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近，将接种的试管在适温下培养，长成菌落后放入_冰箱中保藏。 解析：(1)凡能提供所需氮元素的物质均为氮源，牛肉膏、蛋白胨均含氮元素。(2
12、)在配制培养基时营养要协调，按所培养微生物对各种成分的需求确定；在加入琼脂后，要不断搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。(3)玻璃器皿的灭菌应用高压蒸汽灭菌锅，在压力为100 kPa、温度为121条件下，灭菌1530 min。(5)酒精灯外焰温度高，灭菌效果好。灼烧后待冷却再蘸取菌种，否则会烫死菌种，造成实验失败。答案：(1)牛肉膏、蛋白胨牛肉膏(2)比例用玻棒搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂(3)高压蒸汽灭菌锅1211530 min废弃(4)适量水(5)外冷却413下列是有关微生物的培养与应用的问题，请分析回答。(1)如图是利用_法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步_分散到培养基的表面。图中右侧手拿的器
13、具称为_。(2)分析下面培养基的配方：NaNO3，KH2PO4，NaH2PO4，MgSO47H2O，KCl，H2O。若用于培养纤维素分解菌，应加入_物质，为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入_染料。(3)获得的菌种如果需要长期保存，可以采用_的方法。答案：(1)平板划线稀释接种环(2)纤维素粉刚果红(3)甘油管藏14尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，某同学试图从土壤中筛选出能高效降解尿素的细菌(目的菌)，表中所示是该同学配制的培养基成分：KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖10
14、.0 g(NH4)2SO41.0 g琼脂15.0 g蒸馏水定容到1000 mL(1)该培养基中的主要营养物质包括_。从状态上看，该培养基属于_培养基。(2)在生物的培养中，一般要对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了_。(3)若培养从土壤中分离出来的目的菌，该培养基成分如何调整？_，依据是_。该目的菌同化作用类型是_。(4)该同学在纯化土壤中的目的菌时，最常用的接种方法是_。在纯化土壤中该目的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_。答案：(1)氮源、碳源、无机盐和水固体(2)杀死培养基中的细菌芽孢(3)将(NH4)2SO4换成尿素要筛选出降解尿素的细菌，只能以尿素作为唯一的氮源异养型(4)稀释涂布平板法和平板划线法菌液浓度过高(或培养过程中被杂菌污染，或用接种针划下一区域前接种针没有灭菌导致菌液没有稀释开，言之有理即可)
