1、生物试题一、单项选择题： 1.近年来基因工程的发展非常迅猛，下列不属于基因工程应用的是（ ）A. 培育青霉菌并从中提取青霉素B. 利用乳腺生物反应器生产药物C. 制造一种能分解石油的“超级细菌”D. 制造一种能产生干扰素的工程菌【答案】A【解析】【分析】1、植物基因工程的应用：（1）抗虫转基因植物；（2）抗病转基因植物；（3）抗逆转基因植物；（4）转基因改良植物品质。总之基因工程在农业上用于生产高产、稳产和具有优良品质的品种，能产生抗逆性品种。2、动物基因工程的成果：（1）提高动物的生长速度：外源生长激素基因；（2）改善畜产品的品质；（3）转基因动物生产药物；（4）转基因动物作器官移植的供体。
2、3、医药卫生方面的成果：主要是生产基因工程药物，如人胰岛素、细胞因子、抗体、疫苗、干扰素等。4、环境保护方面：环境监测和对污染环境的净化。【详解】A、培育青霉菌并从中提取青霉素，这没有采用基因工程技术，不属于基因工程的应用，A正确；B、利用乳腺生物反应器生产药物，这属于动物基因工程的应用，B错误；C、制造一种能分解石油的“超级细菌，这属于基因工程的应用，C错误；D、制造一种能产生干扰素的工程菌，这属于基因工程的应用，D错误。故选A。2.将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新导入大肠杆菌的细胞内，再通过发酵工程就能大量生产人生长激素，下列叙述错误的是（ ）A. 转录生长激素基因需要RNA
3、聚合酶B. 大肠杆菌内为生长激素合成提供能量的是线粒体C. 大肠杆菌能产生人生长激素的变异属于基因重组D. 大肠杆菌质粒的标记基因中腺嘌呤和胸腺嘧啶含量相等【答案】B【解析】【分析】1、基因工程的原理是基因重组。2、质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。3、原核细胞中只有核糖体一种细胞器。【详解】A、转录生长激素基因需要RNA聚合酶，A正确；B、大肠杆菌属于原核生物，其细胞中不含线粒体，B错误；C、大肠杆菌能产生人生长激素是采用基因工程技术实现的，该技术的原理是基因重组，C正确；D、大肠杆菌质粒为双链环状DNA分子，遵循碱基互补配对原则，因
4、此其标记基因中腺嘌呤和胸腺嘧啶含量相等，D正确。故选B。3.将某病毒的外壳蛋白（L1）基因与绿色荧光蛋白（GFP）基因连接，构建L-GFP融合基因，再将融合基因与质粒连接构建下图所示表达载体。图中限制酶E1E4处理产生的黏性末端均不相同。下列叙述不正确的是（ ）A. 构建L1-GFP融合基因需要用到E1、E2、E4三种酶B. E1、E4双酶切确保L1-GFP融合基因与载体的正确连接C. GFP可用于检测受体细胞中目的基因是否表达D. 将表达载体转入乳腺细胞培育乳汁中含L1蛋白的转基因羊【答案】D【解析】【分析】基因表达载体的构建是基因工程的核心内容，一个表达载体的组成，除了目的基因外，还有启动
5、子、终止子和标记基因等。根据题意，将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因与绿色荧光蛋白（GFP）基因连接，构建L-GFP融合基因，其中绿色荧光蛋白（GFP）基因属于标记基因，用于筛选和鉴定。【详解】A. 构建L1-GFP融合基因需要先用内切酶处理获得L1基因和GFP基因，并将二者连接，故需要用到E1、E2、E4三种酶，A正确；B. 图中限制酶E1E4处理产生的黏性末端均不相同，E1、E4双酶切可以有效减少载体自身连接和融合基因自身连接，保证L1-GFP融合基因与载体准确连接，B正确；C. 绿色荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达，C正确；D.
6、为了获得L1蛋白，可将表达载体转入受精卵中而不是乳腺细胞，用于培育乳汁中含有L1蛋白的转基因羊，D错误。故选D。4.用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示，下列叙述错误的是（ ）A. 过程指 mRNA 的反转录过程，需解旋酶和 DNA 聚合酶B. 过程从 cDNA 中获得的CarE基因无启动子和内含子C. 过程须用Ca2+处理大肠杆菌，使其处于感受态状态D. 过程得到的工程菌是指能使 CarE 基因高效表达的菌类细胞株系【答案】A【解析】【分析】分析题图：图示是用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程图，其中为逆转录过程，表示获取目的基因，表示将目的基因导入受体细胞，
7、表示筛选获取工程菌。【详解】A、过程指mRNA的反转录过程，需逆转录酶，A错误；B、cDNA是以mRNA为模板逆转录形成的，其中不含启动子和内含子，因此过程从cDNA中获得的CarE基因无启动子和内含子，B正确；C、过程将目的基因导入微生物细胞常用感受态转化法，即用Ca2+处理大肠杆菌，使其处于感受态状态，C正确；D、过程得到的工程菌是指能使CarE基因高效表达的菌类细胞株系，D正确。故选A。5.下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（）A. PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养能得到优良动物个体B. 使用冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型C. 在高倍
8、显微镜下观察发生基因突变的细胞比例可推知某化学药品的毒性D. 用胰蛋白酶处理动物组织后，可用无菌水稀释制成细胞悬浮液【答案】B【解析】【分析】本题主要动物细胞的组织培养及细胞融合。细胞全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成个体的潜能。动物细胞的培育过程是用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织细胞一段时间，使组织分散成单个细胞，再用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液进行培养，由于动物细胞结构和功能复杂，目前仅证实动物细胞核具有全能性，动物体细胞的全能性还有待技术发展。【详解】目前为止，人们还没有成功将单个分化的动物体细胞培养成个体，动物细胞的全能性受到限制，动物细胞融合形成的杂种细胞不能培育成动物，A
9、错误；目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型，B正确；基因突变是碱基对增添、缺失或替换，碱基对的改变在光学显微镜下无法观察到，C错误；用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织会使组织就会分散成单个细胞，再用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液，而不是无菌水，D错误。故选B。【点睛】注意在光学显微镜，能看到染色体变异，不能看到基因突变；动物细胞培养应用培养稀释单个细胞。熟记相关知识点，注意动物细胞全能性等是解决本题的关键。6.下列关于细胞工程中所用技术与原理不相符的是（ ）A. 纤维素酶处理植物细胞酶的专一性B. 植物组织培养细胞的脱分化和再分化C. 动物细胞核移植细
10、胞的全能性D. 杂交瘤细胞培养细胞分裂【答案】C【解析】【分析】用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体和用胰蛋白酶处理动物组织得到单个细胞都采用了酶的专一性原理。诱导原生质体融合和动物细胞融合都采用了生物膜的流动性原理。植物组织培养的原理是细胞的全能性。动物细胞培养的原理是细胞增殖。【详解】A、细胞工程中，利用酶的专一性原理，用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体，A正确；B、植物组织培养利用了细胞的脱分化和再分化，B正确。C、动物细胞核移植体现了动物细胞核的全能性，C错误；D、培养杂交瘤细胞利用了细胞增殖的原理，D正确；故选C。7.明党参是我国珍稀药用植物，对其进行合理开发利用的方法不包
11、括（ ）A. 设计细胞培养反应器，实现药用成分的工厂化生产B. 大量培养愈伤组织，直接提取药用成分C. 不限量挖掘明党参，从其细胞内提取药用成分D. 利用组织培养获得胚状体，制成人工种子【答案】C【解析】【分析】植物组织培养技术已经得到广泛应用，包括：植物繁殖的新途径（如微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（如单倍体育种、突变体的应用）、细胞产物的工厂化生产（如从培养的红豆杉细胞中提取抗肿瘤药物紫杉醇）。【详解】ABD、对明党参进行保护性开发可采用设计细胞培养反应器的方法，也可通过大量培养愈伤组织，直接提取，还可通过大量培育培养苗而获取药用成份，还可获取人工种子进行大面积种植，AB
12、D错误；C、大量进行野外采集，获取药用成分不属于对明党参保护性开发利用的方法，C正确。故选C。8.下列过程中，一般无需采用植物组织培养技术的是（ ）A. 利用月季花药离体培养得到单倍体植株B. 利用秋水仙素处理单倍体幼苗获得正常纯合植株C. 利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株D. 利用细胞工程培育“白菜-甘蓝”杂种植株【答案】B【解析】【分析】植物组织培养技术的主要用途：植物体快速繁殖。培养无病毒植株（植株脱病毒）。花药离体培养（单倍体育种）。制作“人工种子。利用愈伤组织生产植物细胞产品。【详解】A、利用月季花药离体培养得到单倍体植株，需要采用植物组织培养技术，A错误；B、用秋水仙素处理单倍体
13、幼苗获得正常纯合植株，不需要采用植物组织培养技术，B正确；C、培育转基因植物的过程中需要利用植物组织培养技术将植物受体细胞培养成植株，C错误；D、植物体细胞杂交过程中，需要利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，D错误。故选B。9.胚胎工程技术在生产中的应用不包括A. 在小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体B. 进行胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能C. 采用机械方法将早期胚胎分割可产生同卵双胎D. 移植胚胎干细胞可使退化的组织修复并恢复正常功能【答案】A【解析】【分析】胚胎工程包括胚胎干细胞培养、优良家畜的繁育、胚胎分割移植、体外受精、早期胚胎培养等。【详解】在小鼠腹腔中培养
14、杂交瘤细胞生产单克隆抗体属于动物细胞融合工程中单克隆抗体，不属于胚胎工程技术，A符合题意；进行胚胎移植充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能，属于胚胎工程技术，B不符合题意；采用机械方法将早期胚胎分割产生同卵双胎，属于胚胎工程技术，C不符合题意；移植胚胎干细胞使退化的组织修复并恢复正常功能，属于胚胎工程技术，D不符合题意；故选A。【点睛】本题主要考查学生对知识的记忆和理解能力，胚胎干细胞克隆出的组织或器官，使得血细胞、脑细胞、骨骼和内脏器官都可以更换，这将给白皿病、心脏病和癌在患者带来新的希望。治疗性克隆和克隆人是有严格区别的，若把胚胎干细胞形成的胚胎移植至人的子宫内继续发育，那就是克隆人。中国政府对
15、生殖性克隆人研究所持态度的“四不原则”是：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。10.中国科学家将大熊猫的细胞核植入去核的兔子卵细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究走在世界前列。下列有关克隆大熊猫胚胎的叙述中，错误的是（ ）A. 兔子卵细胞质的作用是能激发大熊猫细胞核的全能性B. 克隆的早期胚胎中，各细胞间具有相同的遗传信息C. 在形成早期胚胎的过程中，尚未出现细胞的分化D. 早期胚胎的发育依次经历了卵裂、桑椹胚、囊胚、原肠胚等几个阶段【答案】C【解析】【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组
16、并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。哺乳动物早期胚胎发育过程为：卵裂、桑椹胚、胚、原肠胚，从囊胚期开始出现细胞分化。【详解】A、兔子卵细胞质的作用是能激发大熊猫细胞核的全能性，A正确；B、克隆的早期胚胎中，各细胞间具有相同的遗传信息，B正确；C、胚胎发育过程中，到囊胚期就出现细胞分化，C错误；D、早期胚胎的发育依次经历了卵裂、桑椹胚、囊胚、原肠胚等几个阶段，D正确。故选C。11.下列关于一些传统发酵食品制作的叙述，错误的是（ ）A. 传统发酵食品的制作常利用天然菌B. 腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸发酵C. 制作腐乳利用了毛霉等产生的蛋白酶D. 制作果醋利用了醋酸菌的无氧发酵【答
17、案】D【解析】【分析】1、泡菜制作中起作用的乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型。乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。2、腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些小分子物质有利于人体的消化和吸收。3、果醋制作过程中的菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，在氧气、糖源充足时，醋酸菌能将糖分解成醋酸，糖原不足时可以将乙醇转化成乙醛再转化成醋酸，最适宜醋酸菌生长繁殖的温度是3035。【详解】A、传统发酵食品的制作常利用天然菌种，A正确；B、腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸发酵，B正确；C、制作腐乳利用了毛霉等产生的蛋白酶
18、，C正确；D、醋酸菌是好氧菌，制作果醋利用了醋酸菌的有氧发酵，D错误。故选D。12.在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。下列说法错误的是（ ）A. 牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法B. 密闭空间内的空气常采用紫外线照射消毒C. 玻璃实验器具可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌D. 水厂供应的自来水通常是经过高锰酸钾消毒的【答案】D【解析】【分析】无菌技术的主要内容对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；实验操作时应避免已经灭菌处理的材料
19、用具与周围的物品相接触。【详解】A、巴氏消毒法或高温瞬时消毒法在较低温度下，既可以杀死病菌，又能保持牛奶中营养物质风味不变，A正确；B、紫外线能破坏DNA结构，密闭空间内的空气常采用紫外线照射消毒，B正确；C、玻璃实验器具可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌，C正确；D、水厂供应的自来水通常是经过氯气消毒的，D错误。故选D。13.用无菌棉棒擦拭手心，在固体培养基上轻轻涂抹，这个操作相当于实验室中（ ）A. 化学消毒B. 接种C. 灭菌D. 培养和计数【答案】B【解析】【分析】消毒和灭菌的目的都是防止外来杂菌的入侵，以获得纯净培养物。接种为按无菌操作技术要求，将目的微生物移接到培养基质中的过程，微生
20、物接种的方法有平板划线法、稀释涂布平板法、斜面接种、穿刺接种等。【详解】人体皮肤表面一般含有多种细菌，用无菌棉棒擦拭手心，手心的细菌等被黏附在棉棒上，相当于取菌种，在固体培养基上轻轻涂抹，菌种就转移到培养基上，因此这个操作相当于微生物的培养中的接种过程，B正确。故选B。14.下表是土壤中分解尿素的细菌培养基的营养构成，下列分析错误的是（ ）组分含量KH2PO414gNa2HPO421gMgSO47H2O02g葡萄糖100g尿素10g琼脂150g水定容至 1000mLA. 从物理性质上看它是固体培养基B. 从功能上看它是一种选择培养基C. 它是利用培养条件缺陷原理设计的D. 它是利用营养物质缺陷
21、原理设计的【答案】C【解析】【分析】1、培养基的成分包括水、无机盐、碳源、氮源等。2、分析表格：表格中含有琼脂，从物理性质来说，属于固体培养基；从培养基的功能上看，该培养基以尿素为唯一氮源，属于选择培养基，用于筛选尿素分解菌。【详解】A、从物理性质上看它是固体培养基，A正确；B、从培养基的功能上看，该培养基以尿素为唯一氨源，属于选择培养基，B正确；CD、该培养基以尿素为唯一氮源，是利用营养物质缺陷原理设计的，只有能分解尿素的微生物才能获取氮源而生存，C错误；D正确。故选C。二、多项选择题： 15.复合型免疫缺陷症（SCID）患者缺失腺苷酸脱氨酶（ADA）基因，科学家将 ADA 基因通过 X 病
22、毒转入患者的 T 细胞中，再将携带 ADA 基因的 T 细胞注入患者体内，可改善患者的免疫功能。下列叙述正确的是（ ）A. 可直接利用 PCR 技术选择性地将 ADA 基因扩增出来B. X 属于动物病毒，是将ADA 基因导入T细胞载体C. T 细胞需在体外培养至一定数量后再注入患者体内D. 将正常 ADA 基因替换缺陷基因进行治疗的方法属于基因治疗【答案】ABC【解析】【分析】基因治疗（治疗遗传病最有效的手段）1.概念：把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。例：将腺苷酸脱氨酶（ADA）基因导入患者的淋巴细胞，治疗复合型免疫缺陷症。2、种类：体
23、外基因治疗和体内基因治疗（注意两者的区别），其中效果比较可靠的是体外基因治疗。体外基因治疗：先从病人体内获得某种细胞进行培养，然后再体外完成转移，再筛选成功转移的细胞增殖培养，最后重新输入患者体内，如腺苷酸脱氨酶基因的转移。体内基因治疗：用基因工程的方法直接向人体组织细胞中转移基因的方法。【详解】A、可直接利用PCR技术选择性地将ADA基因扩增出来，A正确；B、科学家将ADA基因通过X病毒转入患者的T细胞中，说明X属于动物病毒，是将ADA基因导入T细胞的载体，B正确；C、T细胞需在体外培养至一定数量后再注入患者体内，C正确；D、基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产
24、物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，而不是用正常基因替换缺陷基因，D错误。故选ABC。16.下图表示通过基因工程培育抗虫棉的过程。以下说法正确的是（ ）A. 该技术核心是过程，该过程存在碱基互补配对B. 过程若将导入棉花细胞的叶绿体 DNA 中可有效减少“基因污染”C. 转基因抗虫棉属于可遗传的变异，自交子代都可以抗害虫D. 删除抗虫棉体内的四环素抗性基因后会影响抗虫基因的表达【答案】AB【解析】【分析】分析题图：图示表示通过基因工程培育抗虫棉的过程，其中表示基因表达载体的构建，表示将目的基因导入受体细胞，表示采用植物组织培养技术将转基因细胞培育成转基因植株。【详解】A、该技术的核心是过程，即
25、构建基因表达载体，该过程存在碱基互补配对，A正确；B、由于受精时，精子几乎不提供细胞质，因此过程若将导入棉花细胞的叶绿体DNA中可有效减少“基因污染”，B正确；C、转基因抗虫棉的培育采用了基因工程技术，其原理是基因重组，属于可遗传的变异，但转基因植株相当于杂合子，其自交子代会发生性状分离，不都可以抗害虫，C错误；D、删除抗虫棉体内的四环素抗性基因后不会影响抗虫基因的表达，D错误。故选AB。17.“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述中正确的是（ ）A. 基因工程中通过标记基因筛选出的细胞一定都含有重组质粒B. 杂交育种过程需要通过筛选获取满足条件的优良品种C. 植物体细胞杂交后
26、要对两两融合的细胞进行筛选D. 无子西瓜快速繁殖中，需筛选出特定染色体组数的体细胞进行组织培养【答案】BC【解析】【分析】杂交育种原理：基因重组（通过基因分离、自由组合或连锁交换，分离出优良性状或使各种优良性状集中在一起）。基因工程育种原理：重组技术（属于基因重组范畴）方法：按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。操作步骤包括：提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达等举例：能分泌人类胰岛素的大肠杆菌菌株的获得，抗虫棉，转基因动物等。【详解】A、标记基因位于运载体上，因此基因工程中通过
27、标记基因筛选出的细胞不一定都含有重组质粒，也可能含有普通质粒，A错误；B、杂交育种可以将不同亲本的优良性状重组到一个个体上，因此可通过杂交育种过程需要不断筛选、自交，直到不发生性状分离为止，B正确；C、植物体细胞杂交过程中，诱导原生质体融合后，可获得多种融合细胞，因此需要对获得的细胞进行筛选，C正确；D、为了快速繁殖无子西瓜，可筛选出分化程度低的体细胞进行组织培养，D错误。故选BC。18.生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列相关叙述错误的是（ ）A. 要严格挑选转基因植物的目的基因，以避免基因产物对人类有害B. 人们普遍认同禁止生殖性克隆人，但不反对治疗性克隆C. 生物武器是用微生物
28、、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力D. 反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿【答案】C【解析】【分析】1、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。2、克隆技术：（1）治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。（2）生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的，即用于产生人类个体。中国政府的态度：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。3、生物武器的传播是把这些病原体直接或者通过
29、食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。【详解】A、应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质，A正确；B、当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆，B正确；C、生物武器是指有意识的利用微生物、毒素、昆虫侵袭敌人的军队、人口、农作物或者牲畜等目标，以达到战争目的一类武器，干扰素为淋巴因子，并非生物武器，C错误；D、反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿，D正确。故选C。19.某小组同学为调查湖水中细菌的污染情况而进行细菌培养实验，有关实验操作判断错误的是（ ）A. 培养基中加入蛋白胨的目的是为细菌提供氮源B. 对培养基进
30、行干热灭菌操作是避免杂菌污染C. 上述操作获得细菌菌落过程就是纯培养D. 菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越大【答案】BC【解析】【分析】1、微生物的培养基一般都要含有水、碳源、氮源、无机盐，如蛋白胨在培养基中主要作为氮源，淀粉在培养基中主要作为碳源。2、实验室的灭菌方法一般有灼烧灭菌（适合于接种工具的灭菌）、干热灭菌（适合于耐高温的、需要保持干燥的物品的灭菌）、高压蒸汽灭菌（适合于培养基等物体的灭菌）。【详解】A、蛋白胨主要为细菌的生长提供氮源，A正确；B、对培养基应进行高压蒸汽灭菌，B错误；C、上述操作获得细菌种类多样，不属于纯化培养，C错误；D、一般情况下，菌落总数越多，湖水遭受细菌
31、污染的程度越大，D正确。故选BC。20.发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。下列关于发酵工程的认识不科学的是（ ）A. 发酵工程具有条件温和、产物单一、污染小的特点B. 发酵工程的产品包括微生物的代谢产物、酶和菌体本身C. 通常所指的发酵条件包括温度、溶氧、pH 和酶的控制D. 发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以用微生物进行发酵【答案】CD【解析】【分析】1、发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身。2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；如果产
32、品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。【详解】A、发酵工程具有条件温和、产物单一、污染小的特点，A正确；B、发酵工程的产品包括微生物的代谢产物、酶和菌体本身，B正确；C、通常所指的发酵条件包括温度控制、溶氧控制、pH控制，C错误；D、传统发酵技术和现代发酵工程都是利用各种微生物的代谢来实现相关产品的生产，D错误。故选CD。三、非选择题： 21.基因敲除是应用 DNA 重组原理发展起来的一门新兴技术。以小鼠为实验动物构建“基因敲除细胞”的过程如下：第一步：从囊胚中分离出胚胎干细胞（ES），在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”。第二步：构建基因表达载体。取与靶基因
33、序列同源的目的基因（同源臂），在同源臂上接入新霉素抗性基因等。由于同源臂与靶基因的 DNA 正好配对，所以能像“准星”一样， 将表达载体准确地带到靶基因的位置。第三步：将表达载体导入胚胎干细胞，并与其内靶基因同源重组，完成胚胎干细胞的基因改造。第四步：基因改造后的胚胎干细胞增殖、筛选。基本原理如下图所示。请根据上述资料，回答下列问题：（1）第一步分离出的 ES 细胞具体是由囊胚的_分离培养获得，上述资料中的靶基因与目的基因的本质区别是_。（2）在把目的基因导入胚胎干细胞前，应首先完成_，该过程中所需要的工具酶是_，接入新霉素抗性基因的作用是_。（3）通过该技术获得一只含目的基因的小鼠，通过有性
34、生殖产生的后代_（“是” 或“否”）都含该目的基因，原因是_。【答案】 (1). 内细胞团细胞 (2). 脱氧核苷酸的排列顺序不同 (3). 基因表达载体的构建 (4). 限制酶和 DNA 连接酶 (5). 作为标记基因，鉴别受体细胞中是否含有目的基因 (6). 否 (7). 在形成生殖细胞时，目的基因和靶基因作为等位基因会发生分离【解析】【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，
35、导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）ES细胞来自早期胚胎（如襄胚的内细胞团）和原始性腺，因此第一步分离出的ES细胞具体是由囊胚的内细胞团分离培养获得。上述资料中的靶基因与目的基因的
36、本质区别是脱氧核苷酸的排列顺序不同。（2）来自基因工程的操作步骤：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与表达。因此，将目的基因导入受体细胞前应先完成基因表达载体的构建，该过程中所需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶；接入新霉素抗性基因的作用是作为标记基因，便于筛选。（3）在形成生殖细胞时等位基因（目的基因和靶基因）会发生分离，因此获得的转基因小鼠通过有性生殖产生的后代不都含该目的基因。【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，同时了解基因工程技术的相关应用，能结合所学的知识准确答题。22.人血
37、清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值，在临床上需求量很大，下图是通过基因工程技术获取 HSA 的两条途径，图中报告基因表达的产物能催化无色物质 K 呈现蓝色。据图回答下列问题：（1）若要体外获得大量的 HSA 基因，可采用 PCR 技术。该技术的原料是_， 扩增的前提是要根据_设计引物，而后经过变性、复性和延伸循环对目的基因进行扩增。若该目的基因循环扩增 5 次，理论上需要消耗_个引物。（2）过程需将植物细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让_进入植物细胞；去除掉所有农杆菌后，过程还须转接到含_的培养基上筛选出转化的植物细胞。（3）要想通过转基因绵羊分泌的乳汁来生产 HSA，需将 HSA 基因与_
38、等调控组件重组到一起，过程再通过_方法将其导入绵羊受体细胞。（4）检测转基因绵羊的乳汁中出现 HSA 的方法是_，若_表明转基因绵羊体内出现了 HSA。【答案】 (1). 四种脱氧核苷酸 (2). 一段已知目的基因的核苷酸序列 (3). 62 (4). 目的基因 (5). 无色物质K (6). 乳腺蛋白基因的启动子 (7). 显微注射技术 (8). 抗原抗体杂交 (9). 有杂交带出现【解析】【分析】分析题图：图中表示将目的基因导入受体细胞，表示采用植物组织培养技术将转基因细胞培育转基因植株，表示将目的基因导入受体细胞，表示转基因动物细胞培育成转基因动物。【详解】（1）PCR技术的原理是DNA
39、复制，因此该技术需要的原料是脱氧核苷酸；利用PCR扩增的前提是要根据一段已知目的基因的核苷酸序设计引物；PCR技术大量扩增目的基因时，缓冲液中需要加入的引物个数计算公式为2n+1-2，因此若该目的基因循环扩增5次，理论上需要消耗62个引物。（2）过程需将植物细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让T-DNA进入植物细胞；根据题干信息“图中报告基因表达的产物能催化无色物质K呈现蓝色”可知，去除掉所有农杆菌后，过程还须转接到含无色物质K的培养基上筛选出转化的植物细胞。（3）要想通过转基因绵羊分泌的乳汁来生产HSA，需将HSA基因与乳腺组织特异性表达的启动子等调控组件重组到一起，过程再通过显微注射法方法将
40、其导入绵羊受体细胞。（4）检测转基因绵羊的乳汁中出现HSA的方法是抗原-抗体杂交法，若出现杂交带表明转基因绵羊体内出现了HSA。【点睛】本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题。23.絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀，起到净化污水的作用。为进一步提高对石油污水的净化效果， 科研人员将絮凝性细菌和石油降解菌融合，以构建目的菌株。其流程如下。据图回答：（1）溶菌酶的作用是_。PEG 的作用是_。（2）再生培养基从功能上来看是一种_培养
41、基：在该培养基上，未融合的A、B 菌（经过相关处理）难以生长，AB 融合菌却能生长和繁殖的原因是_。（3）为探究目的菌株不同发酵时间对石油污水的絮凝效果，需_提取发酵液， 检测发酵液中污染物的剩余量；该探究操作中对照装置内含有的是_。（4）目的菌株净化污水的大致过程是_。从生态系统的成分来看，该菌株属于_。【答案】 (1). 溶解细胞壁 (2). 诱导不同的原生质体融合 (3). 选择 (4). 经处理后，与 AB 菌生存相关的部分结构失活；融合后活性部位互补， 活性恢复 (5). 定时（间隔一定时间） (6). 不含目的菌株的石油污水（或只有石油污水） (7). 先将石油中的污染物絮凝沉淀，
42、然后再进行降解 (8). 分解者【解析】【分析】分析题图：A菌细胞质失去活性，B菌DNA失去活性，所以融合后，在选择培养基上单纯的A、B菌都不能存活，而融合的AB菌能进行生长并繁殖。【详解】（1）细菌有细胞壁，这将妨碍细菌的融合，所以用溶菌酶将其细胞壁进行分解，以实现两者的融合。PEG是促进细胞融合的促融剂，作用是诱导不同的原生质体融合。（2）在再生培养基上只有AB融合菌能生存，因此从功能上来说是一种选择培养基；由图示显示A菌细胞质失去活性，B菌DNA失去活性，融合后失活部位互补，活性恢复，所以在选择培养基上单纯的A、B菌都不能存活，而融合的AB菌能进行生长并繁殖。（3）为探究目的菌株不同发酵
43、时间对石油污水的絮凝效果，需定时提取发酵液，检测发酵液中污染物的剩余量；该探究操作中对照装置内含有的是不加目的菌株的石油污水。（4）目的菌株净化污水的大致过程是先将石油中的污染物絮凝沉淀，然后再进行降解。该菌株能分解石油，属于分解者。【点睛】本题结合图解，考查微生物分离和培养，要求考生识记培养基的种类及功能；识记探究石油的原则，能根据题中和图中信息准确答题。24.型糖尿病病因复杂，多数是胰岛素拮抗引起机体对胰岛素的敏感性降低。胰岛素单克隆抗体可用于快速检测血清胰岛素的含量。请回答下列有关胰岛素单克隆抗体制备的问题：（1）首先需要将人胰岛素注射到健康成年小鼠体内，其目的是获取_细胞；再将该细胞与
44、_相融合，以制取杂交瘤细胞。（2）细胞融合过程体现了细胞膜的特性是具有_。融合完成后，融合体系中除含有未融合的细胞外，理论上含有_种两两融合的细胞。（3）为检验得到的杂交瘤细胞能否分泌胰岛素抗体，可用_与从杂交瘤细胞培养液中提取的抗体杂交。在体外条件下，当培养的小鼠杂交瘤细胞达到一定密度时，需进行_培养以得到更多数量的细胞。（4）细胞融合技术的优点是_。【答案】 (1). 能分泌抗人胰岛素抗体的 B (2). 小鼠骨髓瘤细胞 (3). 流动性 (4). 3 (5). 人胰岛素 (6). 传代 (7). 突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能【解析】【分析】单克隆抗体的制备（1）制备产生特异性
45、抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。【详解】（1）胰岛素单克隆抗体制备，首先需要将人胰岛素注射到健康成熟小鼠体内，其目的是获取能分泌抗人胰岛素抗体的B细胞；再将该细胞与小鼠骨髓瘤细胞相融合，以制取杂交瘤细胞。（2）细胞融合过程体现了细胞膜具有流动性的特性。细胞融合实验完成后，融合
46、体系中除含有未融合的细胞外，可能还有杂交瘤细胞、B细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞共3种两两融合的细胞。（3）为检验得到的杂交瘤细胞能否分泌胰岛素抗体，可用人胰岛素与从杂交瘤细胞培养液中提取的抗体杂交。在体外条件下，当培养的小鼠杂交瘤细胞达到一定密度时，需进行传代培养以得到更多数量的细胞。（4）细胞融合技术的优点是突破了有性杂交的局限，是远缘杂交成为可能。【点睛】本题着重考查了单克隆抗体的制备过程，意在考查考查了识记能力和理解能力，难度不大。考生要能够识记制备的过程，明确图中数字编号表示的细胞或过程；明确细胞融合的结果可能有三种，并且只有杂交瘤细胞具有无限增殖和产生特异性抗
47、体的特点。25.如今，人们已经普遍接受了勤洗手的卫生习惯。19 世纪匈牙利的医生伊格纳兹塞梅尔维斯第一个发现了洗手的科学价值。他发现洗手之后进行的手术，死亡率从1827%骤然下降到了 127%。某同学对此作出的假设是：洗手前手上的细菌比洗手后的多， 并设计实验进行了验证。（1）该同学在配制培养基时，除含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质外，还要加入_，并将 pH 调至_。（2）请简要写出这一实验的设计思路，并对实验结果进行预期_。（3）试验操作应在酒精灯火焰附近进行，原因是_。24 小时后，该同学需要用放大镜观察培养皿中_。（4）为进一步检测手上的细菌对某肥皂新品的敏感性，常用_法取单菌落，接
48、种于含有该肥皂成分的固体培养基表面进行研究。【答案】 (1). 琼脂 (2). 中性或弱碱性 (3). 在培养皿上分别对洗手前后手上的细菌进行接种，在适宜条件下培养一段时间后， 对比分析洗手前后的菌落数量；洗手前培养皿中的细菌菌落更多 (4). 避免周围环境中微生物的污染 (5). 菌落数 (6). 稀释涂布【解析】【分析】微生物常见的接种方法（稀释涂布平板法可用于微生物的计数）：平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均
49、匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】（1）固体培养基常用于微生物的分离及鉴定，该同学在配制培养基时，除含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质外，还要加入琼脂，培养细菌，应将pH调至中性或弱碱性。（2）要验证洗手前手上的细菌比洗手后的多，可在培养皿上分别对洗手前后手上的细菌进行接种，在相同适宜条件下培养一段时间后，对比分析洗手前后的菌落数量，若洗手前培养皿中细菌菌落数多，则说明假设正确。（3）为避免周围环境中微生物的污染，试验操作应在酒精灯火焰附近进行，24小时后，用放大镜观察培养皿中菌落数。（4）为进一步检测手上的细菌对某肥皂新品的敏感性，常用稀释涂布法取单菌落，接种于含有该肥皂成分的固体培养基表面进行研究。【点睛】本题的知识点是微生物的培养与分离，要求考生识记培养基的种类和应用、识记无菌操作技术，强化学生对微生物培养过程的理解与运用，难度中等。
