1、第2讲微生物的培养及应用1(2015四川省攀枝花市统一检测)下列有关微生物的培养或纯化的叙述，错误的是()A在培养微生物前要先对培养基进行灭菌处理再接种B培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径C分离自养型微生物的方法是用以纤维素作为唯一碳源的培养基D分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法解析：选C。在培养微生物前要先对培养基进行灭菌处理再接种，防止其他微生物混入，A正确；酵母菌是兼性厌氧型微生物，因此培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径，B正确；用纤维素作为惟一碳源的培养基是用来分离纤维素分解菌的，分离自养型微生物要用不含有机碳源的培养基，C错；分离纯化微生
2、物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法，D正确。2(2015山东滨州期末)下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是()A微生物培养前，需对培养基进行消毒B测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析：选A。理解微生物分离、培养的原理和计数方法是解题关键。微生物培养前，需对培养基进行灭菌处理，要将所有的微生物杀死；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌；土壤中各类微生物的数量是不同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对
3、性地提供选择培养的条件。3(2015广东深圳模拟)某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌的数量，并从中筛选出能分解石油的细菌，下列操作错误的是()A利用平板划线法对细菌进行计数B以石油为唯一碳源的培养基筛选C采用稀释涂布平板法分离菌种D称取和稀释土壤时应在火焰旁解析：选A。理解微生物培养的过程和计数方法是解题的关键。平板划线法能对细菌进行分离纯化，但不能对细菌进行计数，A错误。4下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：成分NaNO3K2HPO4KClMgSO47H2OFeSO4(CH2O)H2O青霉素含量3 g1 g0.5 g0.5 g0.01 g30 g1 000 mL0.1万单位(1)依物理
4、性质分，该培养基属于_培养基。依用途划分，则属于_培养基。(2)根据培养基原料分析，所培养微生物的同化作用的类型是_。(3)该培养基中的碳源是_。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是_和_，倒平板时，一般需要将培养基冷却至_左右，在_附近操作。(4)若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是_，应加入的物质是_；为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入_，若产生_，则证明有纤维素分解菌存在。解析：(1)从培养基的成分上看，没有琼脂等凝固剂，该培养基属于液体培养基；从用途上分析，加入青霉素可以杀死细菌、放线菌，选择出霉菌、酵母菌等，该培养基属于选择培养基。(2)培养基上的微生物以(
5、CH2O)为碳源，为异养型微生物。(3)考查微生物培养的基本操作。(4)纤维素分解菌以纤维素为碳源，故应去除(CH2O)；同时培养细菌应去除能杀灭细菌的青霉素。刚果红可与纤维素形成红色复合物，用于检测纤维素分解菌是否存在，若存在，菌落周围会形成透明圈。答案：(1)液体选择(2)异养型(3)(CH2O)调pH灭菌50 酒精灯火焰(4)青霉素和(CH2O)纤维素粉刚果红透明圈5据报道，从部分企业生产的速冻食品中检出葡萄球菌超标，“细菌门”事件引起公众的普遍关注。葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。请回答下列问题。(1)某兴趣小组欲检测某果汁
6、类食品中是否含有葡萄球菌，请帮他们完善下列实验步骤。配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节pH，分装到锥形瓶后进行_，在无菌状态下加入卵黄液(100 mL 10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀)摇匀后立即倒平板。接种：取待检果汁2.5 mL加入22.5 mL灭菌生理盐水中，制成接种样液。实验组：将接种样液用_法接种在含卵黄的固体培养基上。对照组：将_接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作为空白对照。将上述接种后的培养皿同时放在36 的恒温箱中培养48 h。观察：观察培养基表面_。(2)培养基中的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁殖提供
7、_。葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl溶液，所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl溶液可以将它分离出来，此培养基属于_培养基。(3)若要统计某土壤样品中该活菌数目，宜采用_法。解析：(1)由于葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环，所以该实验的观察指标为培养基表面是否出现周围有乳浊环的菌落。(2)选择培养基可以使所需要的细菌生长，抑制其他细菌生长。(3)统计某土壤样品中活菌数目可采用稀释涂布平板法。答案：(1)灭菌平板划线无菌生理盐水是否出现周围有乳浊环的菌落(2)碳源和氮源选择(3)稀释涂布平板6自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微
8、生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。(1)实验步骤：制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。为了得到更加准确的结果，应选用_法接种样品。适宜温度下培养。(2)结果分析：测定大肠杆菌数时，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是_，理由是_。A一个平板，统计的菌落数是230B两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240C三个平板，统计的菌落数分别是210、50和520，取平均值260D四个平板，统计的菌落数分别是210、300、240和250，取平均值250一同学在稀释
9、倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是_个(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)。用这种方法测定的大肠杆菌菌落数比实际活菌数量_，因为_。解析：为了得到更加准确的结果，应用稀释涂布平板法接种样品。在统计结果时应选取多个菌落数在30300的平板计数，取其平均值。每毫升样品中的菌落数为2340.11052.34108(个)。因为一个菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多。答案：(1)稀释涂布平板(2)D在设计实验时，一定要涂布至少三个平板，才能增强实验的说服力与准确性；一般选择菌落数在30300的平板进行计数2.
10、34108少当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落7甲、乙两同学学习完微生物的实验室培养后，要利用所学知识研究水中微生物的情况。.甲同学为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制如下培养基进行培养：蛋白胨10 g乳糖5 g蔗糖5 gK2HPO42 g蒸馏水1 000 mL将pH调到7.2(1)该培养基所含有的碳源有_，其功能是_。(2)该培养基所含有的氮源有_，其功能是_。(3)该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的其他营养物质是_。(4)用该培养基培养微生物时，还需要控制哪些理化条件？_。.乙同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌
11、落观察。请回答与此实验相关的问题。(1)乙同学培养基为_(物理性质)培养基，其中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌提供了_和_。(2)对培养基进行灭菌时，应该采用的方法是_。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于_中培养，培养的温度设定在37 。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。解析：.对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源，因此蛋白胨既可作为碳源，又可作为氮源。培养微生物需要控制的理化条件有温度、氧气浓度和pH等。.调查湖水中细菌的污染情况，就要计数，用液体培养基；蛋白胨来源于动物原料，含有维生素、糖和有机氮等营养物质，在培养基中主要是作为氮源。实验室的灭菌方法一般有：灼烧灭菌法(适合于接种工具的灭菌)、干热灭菌法(适合于耐高温的、需要保持干燥的物品的灭菌)、高压蒸汽灭菌法(适合于培养基等物体的灭菌)。要想使微生物快速地繁殖，就要将培养基置于适宜的条件下，特别是温度，所以要置于恒温培养箱中，对照实验就是要设置一个接种了无菌水的培养基进行比较。答案：.(1)蔗糖、乳糖、蛋白胨主要用于构成微生物的细胞物质和代谢产物(2)蛋白胨主要用于合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物(3)水、无机盐(4)温度、氧气浓度等.(1)液体氮源(碳源不作要求)碳源(2)高压蒸汽灭菌(3)恒温培养箱无菌水
