1、高考资源网() 您身边的高考专家基础全练1在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是()A限制酶和DNA连接酶B限制酶和水解酶C限制酶和载体DDNA连接酶和载体解析:基因工程中的操作工具有3种,即“分子手术刀”“分子缝合针”“分子运输车”。限制酶的作用是通过识别和切割从DNA分子上获取目的基因,而DNA连接酶是将目的基因连接到载体上,载体起运输工具的作用,携带着目的基因进入受体细胞。显然,对基因起修饰改造作用的是限制酶和DNA连接酶。答案:A2下列关于限制酶的说法正确的是()A限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNAB限制酶是一种酶,只识别碱基序列GAATTCC不同的限制酶切割DNA后
2、都会形成黏性末端D限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键解析:细胞内含有的限制酶一般不对自身DNA进行剪切,只切割外源DNA,这是在长期的进化过程中形成的一种保护,A正确;限制酶有多种,不同限制酶可识别双链DNA分子中的不同核苷酸序列,B错误;DNA分子经限制酶切割会形成黏性末端或平末端,C错误;限制酶的作用部位是双链DNA分子特定核苷酸之间的磷酸二酯键,D错误。答案:A3下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述,错误的是()A一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核糖核苷酸序列B限制性核酸内切酶的活性受温度、pH的影响,总有一个最合适的条件C限制性核酸内切酶能破坏相邻脱氧核苷酸之间的化学键D
3、限制性核酸内切酶不只存在于原核生物中,其合成场所是核糖体解析:限制酶只能够识别双链DNA分子的某种特定的脱氧核苷酸序列,不能识别RNA分子的核糖核苷酸序列,A项错误;同其他的酶一样,限制酶同样受温度和pH的影响,而且具有发挥最大催化效率的最适温度和最适pH,B项正确;限制酶催化的是特定部位磷酸二酯键的断裂,属于水解反应,C项正确;限制酶主要从原核生物中分离纯化,也有来自真核细胞的,其本质是蛋白质,在核糖体上合成,D项正确。答案:A4下列有关质粒的说法正确的是()A在进行基因工程操作中,被用作载体的质粒都是天然质粒B质粒上碱基之间数量存在AGUCC质粒是一种独立于细菌拟核DNA之外的链状DNA分
4、子D质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因解析:在进行基因工程操作中,真正被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上进行人工改造的,A错误;质粒是一种双链环状DNA分子,不存在U,B、C错误;质粒DNA分子上有限制酶切割位点和标记基因。答案:D5下列有关如图所示的黏性末端的说法,错误的是()A甲、乙、丙黏性末端分别是由不同的限制酶切割产生的B甲、乙的黏性末端可形成重组DNA分子,但甲、丙之间不能CDNA连接酶的作用位点是b处D切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段解析:据图可知,切割形成甲、乙、丙黏性末端的限制酶识别序列与切割位点分别是GAATTC(在
5、G与A之间切割)、CAATTG(在C与A之间切割)、 CTTAAG(在C与T之间切割),即甲、乙、丙是由不同的限制酶切割产生的,A正确。甲、乙的黏性末端互补,所以甲、乙可以形成重组DNA分子;甲、丙的黏性末端不互补,所以甲、丙无法形成重组DNA分子,B正确。DNA连接酶可以恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,而b处是氢键,C错误。甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段为,其中没有切割产生甲的限制酶的识别序列及酶切位点,所以切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段,D正确。答案:C6据图分析,下列有关酶的功能的叙述不正确的是()A限制酶可以切断a处BDNA聚合
6、酶可以连接a处C解旋酶可以切断b处DDNA连接酶可以连接c处解析:限制酶和DNA连接酶都作用于磷酸二酯键(a处),其中限制酶可以切断a处,DNA连接酶可以连接a处,A正确、D错误;DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸连接到DNA片段上,形成磷酸二酯键(a处),B正确;解旋酶作用于氢键(b处),C正确。答案:D7下列关于载体的叙述中,错误的是()A载体与目的基因结合后,实质上就是一个重组DNA分子B对某种限制酶而言,载体最好只有一个切点,但还要有其他多种酶的切点C目前常用的载体有质粒、噬菌体的衍生物和动植物病毒D载体具有某些标记基因,便于对其进行切割解析:载体必须具备的条件有:对受体细胞无害,不影响受
7、体细胞正常的生命活动;具有自我复制能力,或能整合到受体细胞的染色体DNA上,随染色体DNA的复制而同步复制;具有一个至多个限制酶切点,以便目的基因可以插入到载体中;带有特殊的标记基因,如抗生素抗性基因,以便于对外源基因是否导入进行检测;载体DNA分子大小适合,以便于提取和进行体外操作。答案:D8下面是3种限制性核酸内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图(箭头表示切点,切出的断面为黏性末端)。相关叙述错误的是()A不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点,体现了酶的专一性B限制酶2和3识别的序列都包含6个碱基对C限制酶1和3剪出的黏性末端相同D能够识别和切割RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只有限
8、制酶2解析:不同限制酶有不同的识别序列和切割位点,体现了酶的专一性;限制酶2和3识别序列分别是CCGCGG和GGATCC,均为6个碱基对;限制酶1和3剪出的黏性末端相同;三种限制酶均不能识别和切割RNA中的核糖核苷酸序列。答案:D9根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)限制酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有_和_。(2)质粒载体用限制酶X(识别的序列由6个核苷酸组成)切割后产生的片段如下:该酶识别的序列为_,切割的部位是_。(3)为使切割后的载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用限制酶X切割外,还可用限制酶Y切割,两种酶共同的特点是_。(4)按其来源不同,基因工程中所使用
9、的DNA连接酶有两类,即_DNA连接酶和_DNA连接酶,其中后者只能连接一种末端。(5)基因工程中除质粒外,_和_也可作为载体。解析:(1)限制酶切割DNA分子后可产生两种类型的末端,即平末端和黏性末端。(2)将图中片段两端的黏性末端对接后可以看出限制酶X识别的序列为6个核苷酸组成的GAATTC,互补链是CTTAAG,切割的位点为G和A之间的磷酸二酯键。(3)质粒载体可以用限制酶X切割,也可以用另一种限制酶切割,说明该酶与限制酶X切割产生的黏性末端相同或者是互补。(4)基因工程使用的DNA连接酶,按来源可分为Ecoli DNA连接酶和T4DNA连接酶,其中只能连接黏性末端的是Ecoli DNA
10、连接酶。(5)基因工程的载体有质粒、噬菌体的衍生物和动植物病毒。答案:(1)黏性末端平末端(2)GAATTC或CTTAAGG和A之间的磷酸二酯键(3)两种限制酶切割后形成的黏性末端相同或互补(4)T4Ecoli(5)噬菌体的衍生物动植物病毒10下图表示两种限制酶识别DNA分子的特定序列,并在特定位点对DNA分子进行切割的示意图,请回答以下问题:(1)图中甲和乙代表_。(2)EcoR、Hpa代表_。(3)图中甲和乙经过相应操作均形成两个片段,切口的类型分别为_、_。甲中限制酶的切点是_之间,乙中限制酶的切点是_之间。(4)由图解可以看出,限制酶的作用特点是_。(5)如果甲中G碱基发生基因突变,可
11、能发生的情况是_。解析:(1)由图示看出,甲和乙代表由脱氧核苷酸构成的不同的DNA片段。(2)EcoR和Hpa能切割DNA分子,说明它们是限制酶。(3)甲中切点在G、A之间,切口在识别序列中轴线两侧,形成黏性末端;乙中切点在A、T之间,切口在识别序列中轴线处,形成平末端。(4)(5)限制酶能识别DNA分子的特定核苷酸序列,并从特定位点切割DNA分子。当特定核苷酸序列变化后,就不能被相应限制酶识别。答案:(1)有特定脱氧核苷酸序列的DNA片段(2)两种不同的限制酶(3)黏性末端平末端G、AA、T(4)能识别双链DNA分子的特定脱氧核苷酸序列,并从特定的位点将DNA分子切开(5)限制酶不能识别切割
12、位点素养提升11基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制酶的识别序列和切点是,限制酶的识别序列和切点是。根据下图判断下列操作正确的是()A目的基因和质粒均用限制酶切割B目的基因和质粒均用限制酶切割C质粒用限制酶切割,目的基因用限制酶切割D质粒用限制酶切割,目的基因用限制酶切割解析:目的基因若用限制酶切割时,只能在目的基因的一侧切开,而不能将其切下,质粒若用限制酶切割,两种标记基因均将被破坏,所以只能用限制酶切割。答案:D12某线性DNA分子含有3 000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的
13、识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法正确的是()a酶切割产物(bp)b酶再次切割产物(bp)1 600;1 100;300800;300A在该DNA分子中,a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个Ba酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接Ca酶与b酶切断的化学键不同D用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作,若干循环后,序列会明显增多解析:根据图表分析可知在该DNA分子中,a酶与b酶的识别序列都是2个,A错误。图中显示两个酶的识别序列不同,但是切割后露出的黏性末端相同,a酶与b酶切出的黏性末端可以相互连接,B错误。a酶与b酶切断的化学键都是磷酸二酯键,C错误。a酶和b酶切割后形
14、成的黏性末端相同,在DNA连接酶的作用下可连接形成。所以用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作,若干循环后,所得DNA分子中序列会明显增多,D正确。答案:D13如图为某种质粒的简图,小箭头所指分别为限制酶EcoR、BamH的酶切位点,P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcoR、BamH的酶切位点,受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列叙述正确的是()A将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoR酶切,在DNA连接酶的作用下,由两个DNA片段之间连接形成的产物有两种BDNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来,形成一个重组质粒时形成两个磷酸二酯键C为了防止目的基
15、因反向粘连和质粒自行环化,酶切时可选用的酶是EcoR和BamHD能在含青霉素的培养基中生长的受体细胞表明该目的基因已成功导入该细胞解析:如果将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoR酶切,那么酶切后二者的黏性末端相同,在DNA连接酶的作用下,由两个DNA片段之间连接形成的产物有三种,只有一种符合基因工程的需求;DNA连接酶的作用是将酶切后的目的基因和质粒的黏性末端连接起来形成重组质粒,该过程形成4个磷酸二酯键;为了防止目的基因和质粒自行环化,酶切时可选用的酶是EcoR和BamH,这样切割后得到的DNA片段两侧的黏性末端不同;由于受体细胞为无任何抗药性的原核细胞,因此能在含青霉素的培养基中生长,
16、可能是受体细胞成功导入了目的基因,也可能是只导入了不含目的基因的载体。答案:C14用限制酶EcoR、Kpn和二者的混合物分别作用于一个1 000 bp(1 bp即1个碱基对)的DNA分子,同时对酶切产物分别进行凝胶电泳,在电场的作用下,酶切产物分开,凝胶电泳结果如图所示。该DNA分子的酶切图谱(单位:bp)正确的是()解析:A选项中的DNA用Kpn单独酶切会得到600 bp和200 bp两种长度的DNA分子,与题意不符,A错误;B选项中的DNA用Kpn单独酶切会得到600 bp和400 bp两种长度的DNA分子,与题意不符,B错误;C选项中的DNA用Kpn单独酶切后得到的DNA分子长度是1 0
17、00 bp,用EcoR单独酶切会得到200 bp和800 bp两种长度的DNA分子,用EcoR、Kpn同时酶切后会得到200 bp和400 bp两种长度的DNA分子,与题意相符,C正确;D选项中的DNA用Kpn单独酶切后得到400 bp和600 bp两种长度的DNA分子,与题意不符,D错误。答案:C15如表所示为几种限制酶的识别序列及其切割位点,请回答下列问题:限制酶BamHHindEcoRSma识别序列及切割位点(1)从表中四种酶的切割位点看,可以切出平末端的酶是_。(2)将目的基因与质粒DNA缝合依靠的是_酶,它的作用是形成磷酸二酯键;两条链间的碱基对通过_连接起来。(3)图1中的质粒分子
18、可被表中限制酶_切割,切割后的质粒含有_个游离的磷酸基团。(4)在相关酶的作用下,图1中的甲与图2中的乙_(填“能”或“不能”)拼接起来。请说明理由:_。解析:(1)由表中四种限制酶的切割位点可知,Sma可切出平末端。(2)目的基因与质粒缝合时用DNA连接酶进行连接,形成磷酸二酯键;两条链之间的碱基依据碱基互补配对原则形成氢键。(3)根据质粒的碱基序列可知,质粒分子可被限制酶EcoR切割,切割后形成链状DNA,有2个游离的磷酸基团。(4)由图可知,甲和乙的黏性末端相同,在DNA连接酶的作用下可以拼接起来。答案:(1)Sma(2)DNA连接氢键(3)EcoR2(4)能二者具有相同的黏性末端- 10 - 版权所有高考资源网