1、专题一基因工程 1.1.2基因工程的基本操作程序导学案 【学习目标】 简述基因工程原理及基本操作程序 【学习重点】基因工程基本操作程序的四个步骤【学习难点】（1）从基因文库中获取目的基因（2）利用PCR技术扩增目的基因【自主学习】一、目的基因的获取：1目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的。2获取目的基因的方法 (1)从基因文库中获取目的基因基因文库：将含有某种生物不同基因的许多，导人受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。基因组文库：含有一种生物的 基因种类cDNA文库：含有一种生物的基因目的基因的获取根据基因的有关信息：基因的序列、基因在上的位置、基因的产物mR
2、NA、基因的产物蛋白质等特性获取目的基因。(2)利用PCR技术扩增目的基因。PCR：是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。条件：已知目的基因的序列。过程：目的基因DNA受热形成，与结合，然后在_的作用下进行延伸形成DNA。方式：指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)(3)人工合成法：基因较小，核苷酸序列已知，可以人工合成。二、基因表达载体的构建1表达载体的组成：目的基因+标记基因等。2启动子：位于基因的，它是结合的部位，驱动基因转录产生mRNA。3终止子：位于基因的，终止。4表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且给下一代；使目的基因_和发挥作用。5标记基因：受体细胞是否含有
3、目的基因。6不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建上也会有所差别。三、将目的基因导入受体细胞(一)转化：目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和的过程。(二)方法1将目的基因导入植物细胞(1)农杆菌转化法农杆菌特点：易感染植物和裸子植物，对_植物没有感染力；Ti质粒的可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。转化：目的基因插人农杆菌导入植物细胞目的基因整合到植物细胞染色体上目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(2)基因枪法 基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。(3)花粉管通道法 花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一
4、种十分简便经济的方法。（我的的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的）2将目的基因导入动物细胞(1)方法：注射技术。(2)操作程序：目的基因表达载体取卵(受精卵) 显微注射注射了目的基因的受精卵移植到_性动物的_内发育新性状动物。3将目的基因导人微生物细胞(1)原核生物特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。(2)转化：处理细胞细胞表达载体与感受态细胞混合 _细胞吸收DNA分子。四、目的基因的检测与鉴定1检测 (1)方法：标记了的、抗原抗体杂交。 (2)内容 检测转基因生物染色体的DNA是否插入。 检测目的基因是否转录。 检测目的基因是否翻译成。2鉴定：鉴定、抗病鉴定等。【自主小结】：一、目的
5、基因的获取 二、基因表达载体的构建 三、将目的基因导入受体细胞 四、目的基因的检测与鉴定【学法指导】例1下列有关基因工程技术的正确叙述是A重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达例2应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到探测疾病的目的。基因探针是指A用于检测疾病的医疗器械 B用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C合成球蛋白的DNA D合成苯丙羟化酶DNA片段【基础训练】1、构建基因组DNA文库时，首先雷分离细胞的A、染色体D
6、NA B、线粒体DNA C、总mRNA D、tRNA2在基因工程中，科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是（ ） A.结构简单，操作方便 B.遗传物质含量少 C. 繁殖速度快 D.性状稳定，变异少3因工程的操作步骤：使目的基因与运载体相结合，将目的基因导入受体细胞，检测目的基因的表达是否符合特定性状要求，提取目的基因，正确的操作顺序是（）A B. C D4工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （）A人工合成基因 B目的基因与运载体结合C将目的基因导入受体细胞 D目的基因的检测和表达5就分于结构而论，质粒是A、环状双链DNA分子B
7、、环状单链DNA分于C、环状单链RNA分子D、线状双链DNA分子6聚合酶链反应可表示为A、PEC B、PER C、PDR D、PCR7在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是A、化学合成法 B、基因组文库法 C、CDNA文库法 D、聚合酶链反应8有关基因工程的叙述正确的是 （ ）A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成在细胞内完成C.质粒都可作运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料9不属于目的基因与运载体结合过程的是 （ ）A用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端B用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端C. 将重组DNA导入受体细胞中进行扩增D将切下的目的基因插入
8、到质粒切口处10科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白。以下有关该基因工程的叙述错误的是A采用反转录的方法得到的目的基因B基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的C马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞D用不同种限制酶处理质粒和含有目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA分子11基因工程常用的受体细胞有大肠杆菌 枯草杆菌 支原体 动植物细胞AB CD12用DNA探针检测饮用水中病毒的具体方法是A与被检测病毒的DNA碱基序列进行比较B与被检测病毒的DNA碱基序列进行组合C与被检测病毒的DNA碱基序列进行杂交DA、B、C三种方法均可131976年，美国的H.Boyer教授首
9、次将人的生长抑制素释放因子的基因转移到大肠杆菌，并获得表达，此文中的“表达”是指该基因在大肠杆菌( ) A能进行DNA复制 B.能传递给细菌后代C. 能合成生长抑制素释放因子 D.能合成人的生长素14在遗传工程技术中，限制性内切酶主要用于 （ ）A目的基因的提取和导入B目的基因的导入和检测C目的基因与运载体结合和导入D目的基因的提取和与运载体结合15、（05广东）以下有关基因工程的叙述，正确的是 A. 基因工程是细胞水平上的生物工程 B基因工程的产物对人类全部是有益的C基因工程产生的变异属于人工诱变 D基因工程育种的优点之一是目的性强16、在药品生产中，有些药品如干扰素，白细胞介素，凝血因子等
10、，以前主要是从生物体的组织、细胞或血液中提取的，由于受原料来源限制，价价十分昂贵，而且产量低，临床供应明显不足。自70年代遗传工程发展起来以后，人们逐步地在人体内发现了相应的目的基因，使之与质粒形成重组DNA，并以重组DNA引入大肠杆菌，最后利用这些工程菌，可以高效率地生产出上述各种高质量低成本的药品，请分析回答：（1）在基因工程中，质粒是一种最常用的 ，它广泛地存在于细菌细胞中，是一种很小的环状 分子。（2）在用目的基因与质粒形成重组DNA过程中，一般要用到的工具酶是 和 。（3）将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后，能在细菌细胞内直接合成“某激素”，则该激素在细菌体内的合成包括 和 两
11、个阶段。（4）在将质粒导入细菌时，一般要用 处理细菌，以增大 。【学后反思】 专题一基因工程 1.1.2基因工程的基本程序导学案基础试题训练答案例1C 例2B1、A 2、C 3、C 4、C 5、A 6、D 7、D 8、D 9、C 10、D11、【解析】 基因工程常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞。答案：D12、【解析】 用DNA探针检测饮水中病毒的具体方法是使用一个特定的DNA片段制成探针，与被检测的病毒DNA杂交，从而检测出饮用水中病毒来。答案：C13、C 14、 15、（1）基因的运载体 DNA （2）限制性内切酶 DNA连接酶 （3） 转录 翻译 （4） 氯化钙 细菌细胞壁的通透性
