1、第一章测评(时间:90分钟满分:100分)一、选择题(本大题共25小题,每小题2分,共50分。每小题列出的四个备选项中只有一项是符合题目要求的,不选、多选、错选均不得分)1.下列关于微生物培养及利用的叙述,错误的是()A.利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物,而保留利用尿素的微生物B.配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pHC.酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒D.适宜浓度的乙醇可使醋酸菌活化答案A解析利用尿素固体培养基筛选尿素分解菌时,尿素固体培养基并不直接杀死其他微生物,而是其他微生物不能以尿素为氮源,无法在尿素固体培养基中存活,A项错误;不同的微生物生长所需的最适pH不同,
2、如细菌适宜生活在中性偏碱环境,霉菌适宜生活在中性偏酸环境,因此配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pH,B项正确;酵母菌不能直接利用糯米淀粉进行发酵,需要利用淀粉酶将其水解为葡萄糖,利用葡萄糖发酵得到糯米酒,C项正确;醋酸菌的发酵底物可为乙醇,适宜浓度的乙醇可使醋酸菌活化,D项正确。2.下列有关微生物筛选的叙述,不正确的是()A.用全营养LB培养基筛选大肠杆菌B.用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌株C.用含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株D.利用高温条件筛选耐高温的细菌答案A解析大多数微生物在全营养的LB培养基上都可以生长,所以不能用全营养LB培养基筛选大肠杆菌,A项错误;可以在
3、高NaCl的培养基中生活的微生物能抗盐,因此可实现筛选抗盐突变菌株的目的,B项正确;分解尿素的菌株可将培养基中的尿素分解为氨,使培养基pH升高,使酚红变红,C项正确;利用高温条件可筛选出耐高温的细菌,D项正确。3.以下有关生物技术实践的叙述,错误的是()A.显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法B.平板划线法能用来测定土壤溶液中某活菌数目C.培养能合成脲酶的细菌时可在培养基中添加尿素作为唯一氮源D.挑选菌种时可在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌答案B解析在统计菌落数目时,常用来统计样品中活菌数目的方法是稀释涂布平板法,除此之外,显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法,A项正确,B项错
4、误;培养能合成脲酶的细菌时,可在培养基中添加尿素作为唯一氮源,只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长,C项正确;寻找并挑选菌种时,应在适宜其生长的一定环境中进行,如寻找纤维素分解菌应在富含纤维素的环境中进行,D项正确。4.下列有关微生物培养的叙述,正确的是()A.通常使用液体培养基分离获得细菌单菌落B.若培养基需要调节pH,应该在灭菌后进行C.用显微镜直接计数固体培养基中微生物数量D.倒置平板可防止培养基被滴落的冷凝水污染答案D解析常用固体培养基分离获得细菌单菌落,液体培养基无法分离,A项错误;若培养基需要调节pH,应该在灭菌前进行,B项错误;显微镜直接计数法是测定培养液中微生物数量的方法,
5、固体培养基上用稀释涂布平板法直接计数单个菌落,C项错误;平板倒置是为了避免冷凝的水滴落到培养基上,污染培养基,D项正确。5.为纯化菌种,在鉴别培养基(添加有能与纤维素形成红色复合物的刚果红染料)上划线接种纤维素降解细菌,培养结果如下图所示。下列叙述正确的是()A.倒平板后需间歇晃动,以保证表面平整B.图中、区的细菌数量均太多,应从区挑取单菌落C.该实验结果因单菌落太多,不能达到菌种纯化的目的D.菌落周围的纤维素被降解后,可被刚果红染成红色答案B解析倒平板后无须间歇晃动,A项错误;图中、区的细菌数量太多,区的细菌数量较少,可从区挑取单菌落,B项正确;区中存在单菌落,该实验结果能达到菌种纯化的目的
6、,C项错误;刚果红能与纤维素形成红色复合物,但不能和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖形成红色复合物,因此菌落周围的纤维素被降解后,不能被刚果红染成红色,D项错误。6.下列有关“能分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述,不正确的是()A.经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置B.同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数C.在稀释度足够高时,所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同D.在相同培养条件下,未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染答案C解析经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置,防止皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污
7、染,A项正确;同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数,并求其平均数,B项正确;细菌以二分裂的方式进行增殖,不能确保遗传物质平均分配,所以在稀释度足够高时,所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息不一定相同,C项错误;在相同培养条件下,未接种的培养基表面无菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染,D项正确。7.某生物兴趣小组欲配制培养基,从土壤中选择尿素分解菌。下列相关叙述正确的是()A.配制以尿素为唯一氮源的液体培养基可用于选择和观察尿素分解菌B.为获取102的稀释液,可将90 mL无菌水加入10 g土壤样品中C.实验中若需要统计尿素分解菌的菌落数目,接种时只能用平板划线法D.实验中
8、设置对照,同时培养一个空白培养基可检验培养基灭菌是否彻底答案D解析选择和观察尿素分解菌时需要配制以尿素为唯一氮源的固体培养基,A项错误;将10g土壤样品加入90mL无菌水中,振荡摇匀后可获得10倍的稀释液,B项错误;实验中若需要统计尿素分解菌的菌落数目,接种时只能用稀释涂布平板法,C项错误;实验中设置对照,同时培养一个空白培养基,可通过空白培养基上是否有菌落生长来判断培养基灭菌是否彻底,D项正确。8.在、三个培养皿中加入不同成分的培养基,分别接种等量的大肠杆菌,置于适宜条件下培养一段时间后,统计各培养皿中的菌落数(见下表)。培养皿培养基成分(其他成分均相同且适宜)培养皿中的菌落数琼脂、糖类35
9、琼脂、糖类和维生素250琼脂和维生素0实验结果能说明大肠杆菌生长需要碳源的是()A.培养皿和B.培养皿C.培养皿和D.培养皿和答案D解析分析表格数据可知,培养皿与对照,自变量是维生素的有无,说明大多数大肠杆菌生长需要外界提供维生素;培养皿和对照,自变量是糖类的有无,说明大肠杆菌的生长需要糖类(糖类主要提供碳源和能源)。9.右图所示为实验室使用某种接种方法在培养基上培养某种微生物的结果。下列相关说法正确的是()A.该图最可能是用稀释涂布平板法进行接种的B.在操作时,为防止杂菌污染,需进行严格的消毒和灭菌C.该种微生物有可能是H5N1病毒D.该培养基上的菌落分布不均匀,代表纯培养失败答案B解析题图
10、最可能是用平板划线法进行接种的,A项错误;在操作时,为防止杂菌污染,需进行严格的消毒和灭菌,B项正确;病毒不能在培养基上生存繁殖,C项错误;平板划线法随划线次数的增加,菌落密度逐渐减小,因此分布不均匀,D项错误。10.尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,就不能更好地被植物利用。下列有关土壤中尿素分解菌的分离和培养的叙述,正确的是()A.培养基中加入尿素作为唯一碳源,该培养基是鉴别培养基B.微生物培养常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法C.细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨,氨会使培养基的酸性增强,pH降低D.若上述培养基被杂菌污染,则培养基上会有多种杂菌菌落出现答案B解析培养基中加
11、入尿素作为唯一碳源,该培养基是选择培养基,A项错误;微生物培养常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,B项正确;细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,pH升高,C项错误;由于培养基中加入尿素作为唯一碳源,其他不分解尿素的微生物不能生长,故不会有多种杂菌长出来,D项错误。11.下图为纤维单胞菌(能产生纤维素酶)的获取过程。下列有关叙述不正确的是()A.培养基都应以纤维素为唯一碳源B.图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌C.所用的接种方法可对培养的微生物进行计数D.可用刚果红染料(可与纤维素形成红色复合物)鉴定,看菌落周围是否出现透明圈答案C解析培养基中以纤维素作为唯一
12、碳源时,只有能利用纤维素的微生物才能生长繁殖,从而筛选出纤维素分解菌,A项正确;对培养基灭菌采用高压蒸汽进行灭菌,B项正确;所用的接种方法是平板划线法,利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化、分离,但是不能对微生物进行计数,计数一般采用稀释涂布平板法,C项错误;刚果红可以与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形成,出现透明圈,因此可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌,D项正确。12.平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法,下列描述正确的是()A.采用平板计数法获得的菌落数往往多于实际的活菌数B.平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基
13、表面C.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养D.与平板划线法相比,稀释涂布平板法形成单菌落的效果更好答案D解析由于两个或多个活菌连在一起时,往往形成一个菌落,所以利用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数,A项错误;平板划线法不需要稀释菌液,是将菌液通过接种环连续划在固体培养基表面,B项错误;稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基中进行培养,C项错误;与平板划线法相比,稀释涂布平板法分离得到单菌落的效果更好,D项正确。13.下图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作,乙是平板划线法的操作结果。下列叙述错误的是()A.甲中涂布前要将涂布器灼烧,冷却后才能取菌液B.
14、对于浓度较高的菌液,如甲中的稀释倍数为102,则所得的菌落不一定是由单个细胞生长繁殖而成C.乙培养皿中所得的菌落都符合要求D.乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端答案C解析为防止杂菌污染,甲中涂布前要将涂布器灼烧,冷却后才能取菌液,若灼烧后立即取菌液,则会将菌种杀死,A项正确;对于浓度较高的菌液,如果稀释倍数太低,会导致多个菌体聚集在一起繁殖,因此所得的菌落不一定是由单个细胞生长繁殖而成,B项正确;平板划线的过程中,最后一次划线的末端处形成的菌落才是由单个细胞生长繁殖而成,这种菌落才符合要求,C项错误;连续划线中,除了第一次划线外,每一次划线的起点都是上一次划线的末端,其目的是使菌种的密度越
15、来越小,保证最后划线末端处的菌落是由单个细胞生长繁殖而成,D项正确。14.某同学设计了下图所示的发酵装置来制作果酒、果醋,下列有关叙述错误的是()A.甲用来制作果酒,乙用来制作果醋B.乙装置需要的温度条件高于甲C.该装置便于发酵中产生气体的排出D.甲、乙装置排液管排出液体的pH都下降答案C解析甲装置密封可用来制作果酒,乙装置通气可用来制作果醋,A项正确;乙装置需要的温度高于甲,B项正确;该装置便于发酵液的连续发酵,但不利于产生气体CO2的排出,C项错误;甲装置产生CO2、乙装置产生醋酸都会导致排液管排出液体的pH下降,D项正确。15.在适宜的温度条件,在下列装置中都放入干酵母(内有活酵母),如
16、下图所示的四个装置中,其中适于产生乙醇的装置是()答案A解析酵母菌在无氧情况下,能够将葡萄糖分解产生乙醇,A装置是密封的,放入干酵母可通过发酵产生乙醇,A项符合题意;B装置中的葡萄糖没有溶于水,在无水的情况下,不利于干酵母菌进行化学反应,因此,不能产生乙醇,B项不符合题意;C装置中含有水,且存在无氧条件,但是没有葡萄糖作为反应底物,不适合酵母菌发酵产生乙醇,C项不符合题意;D装置中加入葡萄糖和水,不断搅拌,且瓶口敞开,氧气进入发酵液中,酵母菌的厌氧呼吸受抑制,不适合酵母菌发酵产生乙醇,D项不符合题意。16.下面图1为谷氨酸发酵装置示意图,图2为谷氨酸产生机理图。据图分析,下列对谷氨酸发酵的叙述
17、,正确的是()图2A.菌体是异养厌氧型微生物B.培养基属于化学成分已知的液体培养基C.谷氨酸的形成与搅拌速度无关D.提高产物产量的关键是改变菌体膜的通透性答案D解析由发酵罐结构示意图可以看出,发酵过程需要搅拌,需要通入无菌空气,因此说明菌体是异养需氧型生物,搅拌速度影响溶氧量,进而影响谷氨酸的形成,A、C两项错误;该发酵过程用的是液体培养基,但化学成分不是全部知道,B项错误;由于谷氨酸在细胞内积累会抑制谷氨酸脱氢酶的活性,从而影响谷氨酸产量,因此改变菌体膜的通透性是提高产物产量的关键。17.若将某种细菌置于有营养的物体上,它会繁殖并形成细胞群。以下是用来检验两种抗生素的杀菌效果的对照实验,最恰
18、当的分组设计是()答案C解析要检验某种抗生素的杀菌效果,必须将抗生素与细菌一起培养,观察细菌繁殖情况。实验的自变量是有无抗生素和抗生素种类,其他条件应相同。因此,应该设计一个有细菌无抗生素的对照组与两个有细菌和不同种类抗生素的实验组,C项合理。18.我国的酿酒技术历史悠久,古人在实际生产中积累了很多经验。据齐民要术记载,将蒸熟的米和酒曲混合前需“浸曲发,如鱼眼汤,净淘米八斗,炊作饭,舒令极冷”。意思是将酒曲浸到活化,冒出鱼眼大小的气泡,把八斗米淘净,蒸熟,摊开冷透。下列说法错误的是()A.“浸曲发”过程中,酒曲中的微生物代谢加快B.“鱼眼汤”现象是微生物细胞呼吸产生的CO2释放形成的C.“净淘
19、米”是为消除杂菌对酿酒过程的影响而采取的主要措施D.“舒令极冷”的目的是防止蒸熟的米温度过高导致酒曲中的微生物死亡答案C解析由题意可知,“浸曲发”是将酒曲浸泡活化,在活化的过程中微生物代谢加快,A项正确;“鱼眼汤”是指冒出鱼眼大小的气泡,气泡是微生物进行细胞呼吸产生的CO2释放形成的,B项正确;酿酒过程中酵母菌进行厌氧呼吸产生的乙醇会抑制其他微生物的生长,而“净淘米”是防止一些杂质影响酒的品质,C项错误;由题意可知,“舒令极冷”是将蒸熟的米摊开冷透,其目的是防止蒸熟的米温度过高使酒曲中的微生物死亡,D项正确。19.下图是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。下列相关叙述错
20、误的是()A.冲洗葡萄时不能次数过多,否则果酒的制作会失败B.利用葡萄制作果醋时,必须按照图1所示先进行乙醇发酵然后再进行果醋发酵C.图2中的装置中排气口弯曲可防止发酵液被空气中的杂菌污染D.制作果酒要关闭充气口、打开排气口,制作果醋时充气口和排气口都要打开答案B解析果酒制作过程中,应先冲洗葡萄,后除去葡萄枝梗,而且冲洗葡萄时不能反复冲洗,防止菌种流失,从而导致果酒制作的失败,A项正确;可以直接利用葡萄制作果醋,当氧气、糖源都充足时,醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸,B项错误;图2中的装置中排气口弯曲可防止发酵液被空气中的杂菌污染,C项正确;果酒制作是在无氧环境中进行的,而果醋制作是在有氧环境
21、中进行的,所以制作果酒要关闭充气口、打开排气口,排出CO2,制作果醋时充气口和排气口都要打开,D项正确。20.参与泡菜发酵的微生物主要是乳酸菌,而在发酵初期,水槽内经常有气泡产生,这些气泡产生的原因及成分分析最合理的是()A.乳酸菌初期进行需氧呼吸产生CO2;气体为CO2B.发酵初期活动强烈的是酵母菌,其利用氧产生CO2;气体为CO2C.因腌制过程中的盐进入蔬菜使蔬菜体积变小,气体被排出;气体为空气D.乳酸菌在发酵过程中产生了热量,使坛内温度升高,空气受热膨胀排出;气体为空气答案B解析乳酸菌是厌氧型微生物,只能进行厌氧呼吸产生乳酸,A项错误;泡菜发酵初期有气泡产生,是好氧菌如酵母菌进行需氧呼吸
22、产生了CO2,B项正确,D项错误;腌制过程中,蔬菜体积缩小的原因是植物细胞逐渐失水,C项错误。21.红酸汤是苗族人民的传统食品,它颜色鲜红、气味清香、味道酸爽。以番茄和辣椒为原料的红酸汤制作流程如下图所示。下列相关叙述正确的是()选择原料洗净擦干装坛密封发酵成品A.红酸汤制作过程中用到的微生物主要是酵母菌B.装坛时加入成品红酸汤是为了增加发酵菌种的数量C.装坛时不装满的原因是为了促进微生物繁殖D.红酸汤的制作中发酵时间越长,口味越纯正答案B解析红酸汤制作过程中用到的微生物主要是乳酸菌,A项错误;装坛时加入成品红酸汤是为了增加发酵菌种的数量,B项正确;装坛时坛口留有一点空间而不装满的目的是防止番
23、茄发酵后液体膨胀外溢,C项错误;如果发酵时间过长,会影响口感,D项错误。22.为获得优良的发酵食品,实验室在三支试管中培养了酵母菌、醋酸菌、乳酸菌。图中甲、乙、丙三支试管的菌种及其发酵食品对应正确的是()A.甲试管:酵母菌果酒;乙试管:醋酸菌果醋;丙试管:乳酸菌泡菜B.甲试管:醋酸菌泡菜;乙试管:酵母菌果酒;丙试管:乳酸菌果醋C.甲试管:乳酸菌果酒;乙试管:酵母菌泡菜;丙试管:醋酸菌果醋D.甲试管:醋酸菌果醋;乙试管:乳酸菌泡菜;丙试管:酵母菌果酒答案D解析醋酸菌是好氧菌,分布在试管上层,用于制作果醋,为甲试管中菌种;乳酸菌是厌氧菌,分布于试管下层,用于泡菜发酵,为乙试管中菌种;酵母菌是兼性厌
24、氧型微生物,有氧、无氧条件下都能生存,用于制作果酒,为丙试管中菌种。23.下图是苹果醋的制作流程简图。下列有关叙述正确的是()鲜苹果高纯度苹果酒苹果原醋+苹果汁苹果醋A.在苹果醋的制作过程中,图中的过程是必不可少的B.由过程到过程需要改变的环境因素只是通入无菌空气C.可以取少量发酵液滴加酸性重铬酸钾溶液检测是否有乙醇产生D.利用该技术生产果醋需在无氧条件下进行答案C解析当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将苹果汁中的糖分解为醋酸,因此过程可以不要,A项错误;过程能否顺利完成有严格的温度要求,因此由过程到过程需要改变的环境因素还有温度等,B项错误;由于重铬酸钾在酸性条件下为橙色,与乙醇发生反应变成灰绿色
25、,所以可用酸性重铬酸钾溶液检测是否产生了乙醇,C项正确;醋酸菌是严格的好氧菌,D项错误。24.发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。下列关于发酵工程的认识,不正确的是()A.发酵工程具有生产条件温和、原料丰富且价格低廉、废弃物对环境影响小且容易处理的特点B.发酵工程的产品包括微生物的代谢产物、酶和菌体本身C.通常所指的发酵条件包括温度、溶氧和pH的控制D.发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以用微生物进行发酵答案D解析发酵工程具有生产条件温和、原料丰富且价格低廉、废弃物对环境影响小且容易处理的特点,A项正确;发酵工程的产品包括微生
26、物的代谢产物、酶和菌体本身,B项正确;通常所指的发酵条件包括温度控制、溶氧控制、pH控制,C项正确;传统发酵技术和现代发酵工程都是利用各种微生物的代谢来实现相关产品的生产,D项错误。25.下列关于发酵工程的说法,不正确的是()A.在菌种选育过程中,可以利用人工诱变、自然界中筛选和基因工程等手段B.虽然青霉素是抗生素,但在青霉素生产过程中仍然需要严格灭菌C.在谷氨酸发酵过程中,通气充足时产生乳酸或琥珀酸,通气不足时产生谷氨酸D.发酵工程的产品可以采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥答案C解析在谷氨酸发酵过程中,通气不足时产生乳酸或琥珀酸,通气充足时产生谷氨酸。二、非选择题(本大题共5小题,共50
27、分)26.(10分)某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解,会对环境造成污染,只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基,甲的组分为无机盐、水和S,乙的组分为无机盐、水、S和Y。回答下列问题。(1)实验时,盛有水或培养基的摇瓶通常采用的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是。甲、乙培养基均属于培养基。(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2107个/mL,若要在每个平板上涂布100 L稀释后的菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个,则至少应将摇瓶M中的菌液稀释倍。(3)在步骤的筛选过程中,发现当培养基中
28、的S超过某一浓度时,某菌株对S的降解量反而下降,其原因可能是(答出一点即可)。(4)若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数,请写出主要实验步骤:。(5)上述实验中,甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同,但都能为细菌的生长提供4类营养物质,即。答案(1)高压蒸汽灭菌琼脂选择(2)104(3)S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长(4)取淤泥加入无菌水中,涂布(或稀释涂布)到乙培养基上,培养后计数(5)水、碳源、氮源和无机盐解析(1)实验过程中,对盛有水或培养基的摇瓶进行灭菌时,常采用高压蒸汽灭菌法。据题图分析可知,乙培养基为固体培养基,与甲培养基相比,其特有的组分Y物质应是凝固剂琼脂。甲、乙培养基均只
29、允许能利用物质S作为氮源和碳源的微生物生长,因此均为选择培养基。(2)若要在每个平板上涂布100L稀释后的菌液,且每个平板上长出的菌落数不超过200个,则摇瓶M中的菌液稀释的倍数至少为21071000100200=1104倍。(3)在筛选过程中,若培养基中S浓度过高,可能会导致细胞失水,进而抑制菌株的生长。(4)将含有能降解S的细菌的淤泥加入无菌水中,进行适当稀释后,利用稀释涂布平板法,取适量的菌液涂布到乙培养基上,在适宜条件下进行培养,一段时间后,统计菌落数,即可估算出淤泥中能降解S的细菌细胞数。(5)本实验中,甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同,但都能为细菌的生长提供的营养物质是水、碳源
30、、氮源和无机盐。27.(8分)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题。(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是;然后,将1 mL水样稀释100倍,在4个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,4个平板上的菌落数分别为29、39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数约为。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过灭菌。(3)图A和图B中,表示的是用平板划线法接种培养后得到的结果。能够得到单菌落的是图。(4)该小
31、组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养,结果发现振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。其原因是振荡培养能提高培养液中的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率。(5)得到图B所示结果所用的接种工具是。答案(1)检测培养基灭菌是否合格3.8107(2)灼烧(3)AA、B(4)溶解氧(5)涂布器解析(1)微生物培养过程中应该进行无菌操作,配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌,可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底、合格;由题意知,1mL水样中的活菌数约为(39+38+37)30.1100=3.8104,则每升水样中的活菌数约为
32、3.8104103=3.8107。(2)对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌。(3)分析题图可知,图A表示的是用平板划线法接种培养后得到的结果,图B表示用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果,二者都能得到单菌落。(4)由题意可知,振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快,其原因是振荡培养提高了培养液中溶解氧的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高了营养物质的利用率。(5)图B表示用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果,接种工具是涂布器。28.(9分)红酸汤是一种很有特色的火锅底料,制作流程如下图所示。请分析回答以下问题。选择西红柿洗净、擦干、白酒泡洗装坛:一层西红柿、一层盐,装至近坛口密封发酵排气继
33、续密封发酵成品(1)密封发酵时,常在坛中加入成品红酸汤,其目的是。乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行的过程。(2)装坛时坛口留有一点空间而不装满的目的是,红酸汤腌制过程的初期会有气泡冒出,但气泡的产生逐渐停止,试分析原因:。(3)红酸汤有利于人体肠道内多种益生菌的生长。消化道炎症往往与益生菌群减少、有害菌群增多有关。研究表明,治疗消化道慢性炎症时,不宜滥用抗生素,滥用抗生素的害处是。答案(1)增加乳酸菌含量(以缩短制作时间)厌氧呼吸(2)防止西红柿发酵后液体膨胀外溢刚入坛时,西红柿表面的杂菌(酵母菌)需氧呼吸产生CO2,随着乳酸积累抑制了杂菌的生长,且乳酸菌产生乳酸的过程不产生CO2(3)抗生素会杀
34、死肠道内多种益生菌,抗生素对有害菌产生选择作用解析(1)在坛中加入红酸汤的目的是增加乳酸菌含量。乳酸发酵是利用了乳酸菌的厌氧呼吸,该过程发生在乳酸菌的细胞质基质中。(2)装坛时坛口留有一点空间而不装满的目的是防止西红柿发酵后液体膨胀外溢,红酸汤腌制过程的初期会有气泡冒出,但气泡的产生逐渐停止,其原因是刚入坛时,西红柿表面的杂菌(酵母菌)需氧呼吸产生CO2,随着乳酸积累抑制了杂菌的生长,且乳酸菌产生乳酸的过程不产生CO2。(3)根据题意分析,人体肠道内有很多益生菌,若使用抗生素会杀死肠道内多种益生菌,因此不宜滥用抗生素。29.(12分)经人工诱变后,部分细菌由于某种酶被破坏,其细胞中某些化学反应
35、不能正常进行,就形成了营养缺陷型菌株,这在工业生产上有较广阔的应用前景。以下是实验人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程,请回答下列问题。(1)微生物生长需要的营养物质有水、碳源、等,除此之外,制备如图所示的培养基还需要加入。(2)培养基的灭菌方法一般为。过程的接种方法是。(3)根据用途分类,图中基本培养基属于(填“选择”或“鉴别”)培养基。(4)进行过程培养时,应先将丝绒布转印至(填“基本”或“完全”)培养基上,原因是。(5)利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同,为了完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定,实验人员应挑取(填“菌落A”或“菌落B”)进行接种培养,并进一步鉴
36、定。(6)科研人员用放射线处理目的菌获得两个突变株C和D,然后对突变株C和D进行实验,结果如下表所示。接种的菌种一般培养基实验处理及结果C不生长添加营养物质甲,能生长D不生长添加营养物质乙,能生长C+D能生长不添加营养物质甲、乙,都能生长突变株C不能在一般培养基上生长的原因最可能是。将突变株C和D混合在一起,接种于一般培养基上,都能生长的最可能的原因是。答案(1)氮源和无机盐凝固剂(或琼脂)(2)高压蒸汽灭菌稀释涂布平板法(3)选择(4)基本防止基本培养基中混入特定氨基酸(5)菌落A(6)突变株C缺乏合成营养物质甲所需要的酶突变株D可以提供突变株C生长需要的营养物质甲,突变株C可以提供突变株D
37、生长需要的营养物质乙解析(1)微生物生长需要的营养物质包括水、无机盐、碳源和氮源等,图示培养基上最后都长出了菌落,说明为固体培养基,因此制备培养基时还需要加入凝固剂,常见的凝固剂是琼脂。(2)培养基灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌。过程导致菌落均匀分布,因此该接种方法为稀释涂布平板法。(3)根据用途分类,图中基本培养基属于选择培养基。(4)进行过程培养时,为防止特定氨基酸混入基本培养基中,应先将丝绒布转印至基本培养基上。(5)比较基本培养基和完全培养基可知,菌落A为氨基酸缺陷型菌株,因此需要挑取菌落A进行接种培养,并进一步鉴定。(6)突变株C的生长依赖于营养物质甲,突变株D的生长依赖于营养物质乙。
38、不添加营养物质甲和乙,二者混合培养时都能生长,最可能的原因是突变株C为突变株D提供了营养物质乙,突变株D为突变株C提供了营养物质甲。30.(11分)咔唑(含N有机物)具有潜在致癌性,且结构稳定难以清除。为了获得高效降解咔唑的微生物,研究人员设计了如下图所示的实验方案(表示相应的标注操作过程)。请回答下列问题。(1)图示所用的“CNFM+咔唑”培养基,属于培养基。(2)操作的接种采用(实验器具)。(3)操作的接种采用法,其中平板培养的目的是。(4)在相同、适应环境中进行上述“多瓶培养”操作,可以初步确定的锥形瓶中含有高效降解咔唑的微生物。(5)为鉴定下图1平板中的微生物种类,可作为鉴定依据的有。
39、(6)为了将图1培养基中的真菌与细菌分离,新制了PDA培养基(含马铃薯、葡萄糖、琼脂、蒸馏水)并加入青霉素(抑制细菌细胞壁的合成)。接种时先用绒布轻按图1培养基表面,使绒布面沾上菌落,再将绒布轻按在新制培养基表面,培养结果如图2所示。比较图1、2可知,图1中菌落(填编号)为细菌,判断理由是。图2中出现菌落5的原因可能是(写出三种)。答案(1)选择(2)移液器(3)稀释涂布平板筛选出高效降解咔唑的微生物(4)含咔唑浓度最低(5)菌落的大小、形状、颜色和表面情况等(6)3、4细菌无法在含青霉素的培养基中生长绒布未灭菌、被抗青霉素细菌污染、培养基灭菌不彻底解析(1)图示所用的“CNFM+咔唑”培养基
40、,只允许分解咔唑的微生物生长,具有选择性,属于选择培养基。(2)从三角锥形瓶中准确移取一定体积的液体所用的仪器为移液器。(3)从锥形瓶中取菌液接种,用稀释涂布平板法可使接种细菌逐渐稀释,经适宜条件培养,可能形成单个、独立的菌落;再利用含咔唑的固体培养基进行二次筛选,可以获得高效降解咔唑的微生物。(4)在相同、适应环境中进行“多瓶培养”操作,瓶中咔唑的剩余量可以初步反应筛选的微生物对咔唑的降解能力,剩余咔唑量最低的锥形瓶中,筛选的微生物的降解能力最高。(5)菌落特征是细菌分类的依据之一,所以可以通过观察菌落特征鉴定或区分不同的菌种,如颜色、大小、干湿、气味、表面情况等。(6)由于细菌无法在含青霉素的培养基中生长,所以图1中的菌落3、4为细菌。图2中出现新菌落5的原因可能是绒布未灭菌、被抗青霉素细菌污染、培养基灭菌不彻底等。
