1、基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例第1讲 基因工程与蛋白质工程 基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例考纲展示考纲解读1.基因工程的诞生()2基因工程的原理及技术()3基因工程的应用()4蛋白质工程()1.了解基因工程诞生的历程。2了解基因工程的工具及其作用；说明基因工程的原理和操作步骤。3概述基因工程在农牧业、医药卫生等方面的应用实例。4简述蛋白质工程的基本原理及其与基因工程的区别。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例一、基因工程的操作工具1基因工程的概念按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过_等技术，赋予生物以新的_，从而
2、创造出更符合人们需要的新的_。由于基因工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做_。自我校对：一、1.体外 DNA 重组和转基因 遗传特性 生物类型和生物产品 DNA 重组技术基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例2DNA 重组技术的基本工具(1)限制酶全称：_。来源：主要从_中分离纯化出来。特点：识别双链 DNA 分子的某种_，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的_断开。结果：产生黏性末端或_。自我校对 2(1)限制性核酸内切酶 原核生物 特定核苷酸序列 磷酸二酯键 平末端基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例(2)DNA 连接酶类型：根据酶的来源不同，可分为
3、Ecoli DNA 连接酶和_。作用：连接_，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的_。自我校对(2)T4DNA 连接酶 双链 DNA 片段 磷酸二酯键 基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例(3)载体种类：通常利用_作为载体，另外还有_、_等。质粒：a化学本质：_。自我校对(3)质粒 噬菌体的衍生物 动植物病毒 a.小型环状DNA分子 b自我复制 限制酶切割位点标记基因基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例1以下关于基因工程的操作工具的说法正确的是()A所有的限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列B质粒是基因工程中唯一的载体C载体必须具备的条件之一是：具有多个限制性核酸内切酶切
4、点，以便与外源基因连接DDNA 连接酶使黏性末端的碱基之间形成氢键解析：一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列；质粒不是基因工程中唯一的载体；载体必须具备多个酶切位点；DNA连接酶连接的是磷酸二酯键。答案：C基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例二、基因工程的操作程序1目的基因的获取(1)目的基因：编码蛋白质的基因。(2)获取目的基因的方法自我校对二.1.(2)基因文库 PCR技术 DNA合成仪基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例2基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的_。(1)目的：使目的基因在受体细胞中_，并且可以遗传给下一代，使目的基因_。(2)
5、组成(如图所示)：_终止子标记基因(如抗生素基因)自我校对2核心(1)稳定存在 能够表达和发挥作用(2)目的基因 启动子 启动子基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例3将目的基因导入受体细胞(1)转化：目的基因进入_内，并且在受体细胞内维持_的过程。自我校对3(1)受体细胞 稳定和表达(2)农杆菌转化法 基因枪法花粉管通道法 显微注射法 感受态细胞法基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例4目的基因的检测与鉴定(1)利用_技术检测目的基因的有无。(2)利用_技术检测目的基因的转录。(3)利用_检测目的基因的翻译。(4)利用_的检测鉴定重组性状的表达。自我校对 4(1)DNA 分子杂交
6、(2)分子杂交(3)抗原抗体杂交(4)个体生物学水平基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例2(2011年浙江)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是()A用限制性核酸内切酶切割烟幕花叶病毒的核酸B用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C将重组DNA分子导入烟草原生质体D用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例解析：本题考查通过基因工程产生转基因植物的过程。用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，用同种限制性内切酶分别切割烟草的运载体和抗除草剂的基因，因限制性核酸内切酶切割的是DNA，而烟草花叶病毒的遗传物质为R
7、NA。构建基因的表达载体完成后将其导入烟草细胞内，最后还需要将其放入含除草剂的培养基中进行筛选，选出抗除草剂的细胞进行植物组织培养。故选A。答案：A基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例三、基因工程的应用应用类别应用实例转基因植物抗虫转基因植物杀虫的基因主要有_、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等抗病转基因植物_：病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因；_；几丁质酶基因和抗毒素合成基因自我校对三、Bt 毒蛋白基因 抗病毒基因 抗真菌基因 基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例抗逆转基因植物抗盐碱和抗干旱的_、抗冻蛋白基因、抗除草剂基因改良植物品质转基因玉米中_的含量比
8、对照组提高30%；_储存时间可延长12个月；转基因矮牵牛呈现出原本没有的_自我校对调节细胞渗透压基因 赖氨酸 转基因延熟番茄 颜色变异 基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例转基因动物提高动物生长速度如转_绵羊和转_鲤鱼生长速率快、体型大改善畜产品的品质如将_导入奶牛基因组，使所获得的转基因牛分泌的乳汁中，_大大降低，但其他营养成分不受影响自我校对外源生长激素基因 外源生长激素基因 肠乳糖酶基因乳糖的含量 基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例用转基因动物生产药物目前，已在牛和山羊等动物_中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和抗胰蛋白酶等重要药品用转基因动物作器官移植的供体科学
9、家正试图利用基因工程方法对猪的器官进行改造，抑制_的表达，或设法_，再结合克隆技术，培育出没有_的转基因克隆猪器官自我校对乳腺生物反应器 抗原决定基因 除去抗原决定基因 免疫排斥反应基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例基因工程药物第一种基因工程药物_；其他基因工程药物如淋巴因子、抗体、疫苗、激素等；我国第一个国内批准生产的基因工程药物_；其他药物如白细胞介素 2、干扰素、乙肝疫苗等基因治疗把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，这是治疗遗传病的_的手段，分为_和_自我校对重组人胰岛素 重组人干扰素a1b 最有效 体内基因治疗 体外基因治疗 基础自主梳
10、理核心考点突破课时训练考向图解典例3(2011 年安徽理综)家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可提取干扰素用于制药。(1)进行转基因操作前，需用_酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自 cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_和_之间。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例(3)采用 PCR 技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR 反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含 Mg2)、水、4 种脱氧核糖核苷酸、模板 DNA、_和_。(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的
11、细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例解析：(1)动物细胞间借胶原蛋白连在一起，故可用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理幼蚕组织，获得单个细胞；(2)来自 cDNA 文库的干扰素基因片段是通过逆转录得到的，其缺少非编码区上的启动子和终止子，为使其高效表达，必须把其插入表达载体的启动子和终止子之间；(3)利用 PCR 技术体外扩增目的基因时，必须加 2 种引物和耐高温的 DNA 聚合酶(Taq DNA 聚合酶)；(4)多孔的中空薄壁小玻璃珠可以扩大细胞贴壁生长的附着面积，从而增加培养的
12、细胞数量，也有利于空气交换。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例答案：(1)胰蛋白(或胶原蛋白)(2)启动子 终止子(3)对干扰素基因特异的 DNA 引物对 Taq DNA 聚合酶(4)扩大细胞贴壁生长的附着面积基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例四、蛋白质工程1崛起的缘由：生物在长期进化过程中形成的天然蛋白质，结构和功能符合特定物种生存的需要，却_人类生产和生活的需要。2目标：根据人们对蛋白质功能的特定需求，对_进行分子设计。自我校对 四、1.不一定完全符合 2.蛋白质的结构 基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例3操作手段：_。4操作过程：从预期的蛋白质功能出发设计预
13、期的蛋白质结构推测应有的_找到相对应的_(基因)。自我校对 3.基因修饰或基因合成 4.氨基酸序列 脱氧核苷酸序列基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例4(2011 年湖南师大附中高三一模)下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是()A实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质结构和功能的关系B基因工程是蛋白质工程的基础C蛋白质工程是对蛋白质分子的直接改造D蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例解析：本题考查蛋白质工程的概念和原理的相关知识。蛋白质工程的过程是：预期蛋白质功能设计预期蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列合
14、成 DNA表达出蛋白质，所以实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质结构和功能的关系，A 正确；蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出的第二代基因工程，蛋白质工程是在基因水平上改造蛋白质，所以 B、D 也正确；蛋白质工程的本质是改造基因，所以 C 错误。答案：C基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例考点 一 基因工程的工具1“分子手术刀”限制性核酸内切酶(1)识别的序列的特点：呈现碱基互补对称，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线，如图，中轴线两侧的双链 DNA 上的碱基是反向对称重复排列的。如：G C G C C G C G 以中心线为轴，两侧碱基互补对称；两侧碱基互补对称。
15、基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例(2)切割后末端的种类：DNA 分子经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式黏性末端和平末端(如图所示)。当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将 DNA 的两条链分别切开时，产生的是黏性末端，而当限制酶在它识别序列的中轴线处切开时，产生的则是平末端。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例2“分子缝合针”DNA 连接酶(1)几种酶的比较项目种类作用底物作用部位作用结果DNA连接酶DNA分子片段磷酸二酯键形成重组DNA分子限制酶DNA分子磷酸二酯键形成黏性末端或平末端DNA聚合酶脱氧核苷酸磷酸二酯键
16、形成新的DNA分子基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例(2)DNA连接酶与限制酶的关系基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例3“分子运输车”载体(1)载体具备的条件对受体细胞无害，不影响受体细胞正常的生命活动；具标记基因，能对重组 DNA 是否进入受体细胞进行鉴定；能自我复制，通过复制进行基因扩增；具有多个酶切位点，供外源基因插入其中，而且每种酶切位点最好只有一个，避免酶切后环状 DNA 打开，丢失某些片段。(2)最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核 DNA 之外，并具有自我复制能力的双链环状 DNA 分子。(3)其他载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
17、基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例【易误提醒】(1)DNA 连接酶起作用时不需要模板。(2)限制酶在使用时的注意事项：切割目的基因和载体时，最好用同一种限制酶，以产生相同的黏性末端。在切割含目的基因的 DNA 分子时，需用限制酶切割两次此DNA 分子，产生 4 个末端。只有这样，目的基因两端都有可连接的黏性末端或平末端。限制酶切割位点应位于标记基因之外，不能破坏标记基因，以便于进行检测。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例1(2011 年浙江理综)将 ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b 导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是()A.每个大肠杆菌细胞至
18、少含一个重组质粒B每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个 adaD每个插入的 ada 至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例解析：将 ada 通过质粒 pET28b 导入大肠杆菌并成功表达每个大肠杆菌细胞中至少含有一个重组质粒，且每个质粒(重组质粒)至少含有一个限制酶识别位点，但每个限制酶识别位点只能插入一个ada，插入的 ada 成功表达，说明每个插入的 ada 至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子。故 C 错误。答案：C基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例考点 二 基因工程的基本操作程序1目的基因的获取(1
19、)直接分离法：从自然界已有的物种中分离，如从基因组文库或cDNA 文库中获取。(2)人工合成目的基因如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。以RNA为模板，在逆转录酶的作用下人工合成。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例2基因表达载体的构建(1)基因表达载体各个组成的作用启动子：一段有特殊结构的 DNA 片段，位于基因的首端，是RNA 聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出 mRNA，最终获得所需的蛋白质。终止子：也是一段有特殊结构的 DNA 片段，位于基因的尾端，能使转录在所需要的地方停下来。标记基因：作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从
20、而将含有目的基因的细胞筛选出来，如抗生素抗性基因。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例(2)基因表达载体的构建步骤基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例3将目的基因导入受体细胞生物种类植物动物微生物常用方法农杆菌转化法显微注射技术感受态细胞法受体细胞体细胞受精卵原核细胞基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例转化过程将目的基因插入到Ti质粒的TDNA上 农杆菌导入植物细胞整合到受体细胞的DNA表达将含有目的基因的表达载体提纯取卵(受精卵)显微注射受精卵发育获得具有新性状的动物Ca2处理细胞感受态细胞重组表达载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收DNA分子基础自主梳理核心考点突破课
21、时训练考向图解典例4.目的基因的检测与鉴定(1)分子水平检测导入检测：DNA 分子杂交技术，用放射性同位素标记的含目的基因的 DNA 片段作探针。转录检测：分子杂交法，用标记的目的基因作探针与 mRNA 杂交。翻译检测：抗原抗体杂交法。(2)个体生物学水平鉴定：对转基因生物进行抗虫或抗病的接种实验，以确定是否具有抗性以及抗性的程度。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例【易误提醒】(1)原核生物作为受体细胞的优点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少。(2)基因工程四步曲中，只有第 3 步“将目的基因导入受体细胞”没有发生碱基互补配对，其他三步中都涉及碱基互补配对，具体过程如下：第 1
22、步中发生在反转录法合成目的基因过程中；第 2 步中发生在黏性末端相互连接配对过程中；第 4 步中目的基因的导入检测、转录检测发生碱基互补配对。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例2(2011 年海南单科)回答有关基因工程的问题：(1)构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割 DNA 后，可能产生黏性末端，也可能产生_末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_(相同、不同)黏性末端的限制酶。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例(2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是_。在用表达载体转
23、化大肠杆菌时，常用_处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了 mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与 mRNA 杂交，该杂交技术称为_。为了检测胰岛素基因转录的 mRNA 是否翻译成_，常用抗原抗体杂交技术。(3)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌 Ti 质粒的_中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过 DNA 重组将目的基因插入植物细胞的_上。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例解析：(1)DNA 分子经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。当限制酶在它识别序列的中心轴两侧将 DNA 切开时，
24、产生的是黏性末端，而当限制酶在它识别序列的中心轴线切开时，产生的是平末端。要使目的基因和质粒直接进行连接，应使用同种限制酶切割目的基因和质粒，使二者产生相同黏性末端。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例(2)一个基因表达载体的组成，除含有目的基因外，还必须有启动子、终止子和标记基因。启动子是一段有特殊结构的 DNA 片段，位于基因首端，是 RNA 聚合酶识别和结合部位，可以驱动目的基因转录出 mRNA。在用表达载体转化大肠杆菌时，为便于表达载体进入，常用 CaCl2 处理大肠杆菌。要检测目的基因是否转录出对应的mRNA，可采用分子杂交技术，即用目的基因片段作探针，与 mRNA杂交，如果
25、显示出杂交带，则表明目的基因转录出了 mRNA。(3)运用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时，要先将目的基因插入农杆菌 Ti 质粒的 TDNA 中，然后将该农杆菌感染植物细胞，通过DNA 重组将目的基因插入到植物细胞的染色体 DNA 上。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例答案：(1)平 相同(2)驱动胰岛素基因转录出 mRNA CaCl2溶液(或 Ca2)分子杂交技术 蛋白质(3)TDNA 染色体 DNA基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例考点 三 基因工程与蛋白质工程比较蛋白质工程基因工程区别过程从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱
26、氧核苷酸序列(基因)目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和鉴定基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例目的定向改造或生产人类所需的蛋白质定向改造生物的遗传特性，获得人类所需的生物类型或生物产品结果可生产自然界没有的蛋白质原则上只能生产自然界已存在的蛋白质基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例联系(1)蛋白质过程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程(2)基因工程能为蛋白质工程提供理论及技术支持，蛋白质工程可对基因工程中所需的某些酶进行修饰、改造，使之更符合需要基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例【易误提醒】(1)蛋白质工程中，改造蛋白质是通
27、过对基因的改造来实现的，这样的改造可遗传，能向后代细胞中传递这种改变。(2)改造基因时，要对基因进行修饰或合成基因，因此，需要用到基因工程中的有关酶，如限制酶、DNA 连接酶等。(3)改造后的基因需要表达出相应的蛋白质，可将改造或合成的基因导入受体细胞中让其表达，导入时，仍然需要构建基因表达载体。可见，基因工程技术是蛋白质工程技术的基础，因此，蛋白质工程也叫做第二代基因工程。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例3下列关于蛋白质工程的说法正确的是()A蛋白质工程以基因工程为基础B蛋白质工程就是提高蛋白质产量的工程C蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造D蛋白质工程只能生产天然的蛋白质解析
28、：蛋白质工程就是根据人们对蛋白质功能的特定需求，设计出特定蛋白质并通过基因工程生产出来的生物工程，能生产出自然界本来没有的蛋白质。其操作对象是基因，对基因进行改造，以生产出特定蛋白质。答案：A基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例考向一 基因工程的工具及操作程序基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例 肺细胞中的 let7 基因表达减弱，癌基因 RAS 表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将 let7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例请回
29、答：(1)进行过程时，需用_酶切开载体以插入 let7 基因。载体应有 RNA 聚合酶识别和结合的部位，以驱动 let7 基因转录，该部位称为_。(2)进行过程时，需用_酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。(3)研究发现，let7 基因能影响癌基因 RAS 的表达，其影响机理如图 2。据图分析，可从细胞中提取_进行分子杂交，以直接检测 let7 基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中_(RAS mRNA/RAS 蛋白)含量减少引起的。基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例【解析】(1)过程 为基因表达载体的构建，切开载体需用限制性核酸内切酶切割；构建基因表达载体时
30、目的基因前应有启动子以驱动 let7 基因转录。(2)过程分瓶传代培养时，需用胰蛋白酶处理贴附在培养皿壁上的细胞。(3)由图2 let7 基因转录的 miRNA 与 RAS 基因转录的mRNA 结合影响 RAS mRNA 翻译 RAS 蛋白。【答案】(1)限制性核酸内切(或限制)启动子(2)胰蛋白(3)RNA RAS 蛋白基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例1(2011 年山东聊城高三一模)限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割 DNA 分子上特定的核苷酸序列。如图为四种限制酶BamH、EcoR I、Hind 和 Bgl的识别序列和切割位点。切割出来的 DNA 黏性末端可以互补配对的是(
31、)Bam H Eco R Hind Bgl GGATCC GAATTC AAGCTT AGATCTCCTAGG CTTAAG TTCGAA TCTAGA 基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例ABamH 和 EcoR BBamH 和 Hind CBamH 和 Bgl DEcoR 和 Hind 解析：只有黏性末端相同才能互补，BamH 和 Bgl 切出的末端相同，故 C 符合题意。答案：C基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例考向二 基因工程的应用基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例(2010 年浙江理综)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是()A
32、用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B用 DNA 连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C将重组 DNA 分子导入烟草原生质体D用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例【解析】限制性核酸内切酶用于提取目的基因和切割载体，烟草花叶病毒的遗传物质是RNA，不能用限制性核酸内切酶切割，A项错误；DNA连接酶可以连接具有相同黏性末端的目的基因和载体，B项正确；受体细胞可以是受精卵和体细胞，也可以是去除细胞壁的原生质体，C项正确；目的基因为抗除草剂基因，所以未成功导入目的基因的细胞不具有抗除草剂的能力，筛选时应该用含除草剂的培养基筛选转基因细胞，D项正确。【答案
33、】A基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例2(2012年浙江卷)天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰。下列操作正确的是()A提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例解析：限制性核酸内切酶能特异性识别并切割DNA片断，不能用于提取目的基因B；DNA连接酶能将基因B与质粒连接；只有将基因B与载体结合才能导入受体细胞，故B、C、D是错误的。答案：A基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例基础自主梳理核心考点突破课时训练考向图解典例本部分内容讲解结束按ESC键退出全屏播放
