1、动物细胞融合与单克隆抗体 带者问题走进课堂？自主阅读，p52第2自然段，思考下列问题 1、什么叫动物细胞融合 cell fusion？（概念要点）两个或多个动物细胞 一个细胞（杂交单核细胞）2、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？两者的融合过程是否也一样？诱导细胞融合物质：诱导剂：灭活病毒、聚乙二醇PEG诱导细胞融合的病毒必须灭活。思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞
2、融合细胞融合原理细胞融合的方法诱导方法用途制备单克隆抗体获得杂种植株细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞的全能性去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）物理、化学方法（同左）灭活的病毒3、动物细胞融合技术的发展简史告诉我们：科学技术是不断发展的。那么，实现动物细胞融合有什么意义呢？打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能；广泛应用多个学科领域；重要用途：制备单克隆抗体。1、抗体 1.1 概念：抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。1.2 来源：B淋巴细胞。B淋巴细胞与抗体的关系：B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生
3、抗体。动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。自主阅读P52：传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？怎样解决这个问题？2、单克隆抗体McAb（概念）由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。特点：特异性强、灵敏度高、纯 度 高、产 量 大。单克隆抗体的概念 单:单个细胞 克隆:无性繁殖 抗体:化学性质单一、特异性强如何大量生产单克隆抗体？利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞
4、和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞如何筛选？融合方式？生产单克隆抗体需要那些物质和技术呢？3、单克隆抗体McAb制备过程专一抗体检验阳性单克隆抗体注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合杂交瘤细胞细胞培养筛选，继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔筛选创始人：米尔斯坦单克隆抗体制备过程思考问题：1、本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理 2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体 4、单克
5、隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。应用主要有：1、临床诊断、治疗疾病。2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤。课堂小结 动物细胞融合过程 单克隆抗体制备过程 两个过程 三个“一”一个诱导细胞融合的新方法灭活病毒 一个新细胞杂交瘤细胞 一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势 1、动物细胞融合的目的中最重要的是（）A.克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂种细胞2、动物细胞融合过程中所用的诱导剂灭活的病毒，抗原性和感染力的有无是（）A.失去抗原性，具有感染力B.具有抗原性，也具有感染力C.失去抗原性，也失去
6、感染力D.具有抗原性，失去感染力BD 3、单克隆抗体是指（）A.单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体B.单个B淋巴细胞增殖产生的抗体C.单个杂交瘤细胞增殖产生的高度单一的抗体D.单个抗体通过克隆化，产生大量抗体4、生产单克隆抗体时，在培养液中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞，因为该试剂（）A.能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的DNA复制B.能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活C.选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制D.能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成CC植物组织培养 VS 比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞的增殖培养基（半）固体、营养、植物激素液体、营养、动物血清结果培养成植株培育成细胞系（株）培养目的快速繁殖，培育无病毒植株。获得细胞的产物等思考：植物细胞工程中，除了植物组织培养技术外，还有什么技术？过程如何？动物细胞培养5、“生物导弹”是指（）A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体的B淋巴细胞 D.在单克隆抗体上连接抗癌药物 D6、科学家们用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的T淋巴细胞B.未经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的B淋巴细胞D.未经过免疫的B淋巴细胞C
