1、山东省泰安第十九中学2020-2021学年高二生物下学期期中试题一、选择题：本题共15小题，每题2分，共30分，每小题只有一个选项符合要求。1.现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下表，假设用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离（ ）成分KH2PO4MgSO47H2ONaClCaSO42H2OCaCO3葡萄糖纯淀粉甲培养基002%002%002%001%05%05%2%乙培养基002%002%002%001%05%A. 甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌B. 甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌
2、C. 甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌D. 甲培养基适于分离自养型共生固氮菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌2. 下列有关无菌技术的说法，其中正确的有几项（ ）无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物煮沸消毒法中100煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温长期保存将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌A. 2项B. 3项C. 4项D. 5项3生物兴趣小组成员以西瓜5天龄幼苗子叶（子叶尚未完全展开且颜色为淡绿色）为外植体进行相关研究，得到如图所
3、示实验结果。相关叙述错误的是（ ）A实验开始前应对幼苗子叶和MS培养基进行灭菌处理B与愈伤组织细胞相比，胚状体细胞已经分化C暗处理时间长短对细胞脱分化率影响不大，但影响再分化率D结果表明西瓜子叶诱导形成胚状体的最适暗处理时间是12周4滁菊为菊科多年生草本植物，长期营养繁殖易造成病毒积累，导致滁菊花色劣变。某科研小组比较了3种脱毒方法对滁菊体内菊花B病毒（CVB）和菊花矮化类病毒（CSVd）脱除的效果，结果见下表；下图是对不同试管苗进行RT-PCR（逆转录PCR）后的电泳示意图（引物根据CVB的基因序列设计），下列叙述错误的是（ ）不同脱毒方法对“滁菊”茎尖脱毒率的影响脱毒方法样本数脱除CSVd
4、率脱除CVB率脱除（CSVd+ CVB）率茎尖分生组织培养77207844161688热处理结合茎尖培养71366263383521病毒唑结合茎尖培养71464849303662ART-PCR技术中用到的酶有逆转录酶、热稳定DNA聚合酶B试管苗2、5尚未脱毒成功，3、4已成功脱去CVB病毒C只脱除CSVd病毒时，可选择病毒唑结合茎尖分生组织培养D热处理、病毒唑处理对试管苗脱毒率和存活率都有显著作用5甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中。相关叙述错误的是（ ）A照光处理的甲青花菜下胚轴细胞中存叶绿休，利于筛选
5、杂种细胞B流程中A处理可使用纤维素酶和果胶酶，B处理可使用聚乙二醇C杂种细胞经过外源生长素和赤霉素的诱导，直接分化成为杂种植株D杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，并能通过父本进行传递6下图所示为帕金森病和少年糖尿病的胚胎干细胞移植治疗方案。下列相关叙述错误的是（ ）A图中为体细胞核移植技术B胚胎干细胞是从早期胚胎中分离出来的C指找到免疫匹配的患者进行移植D经过发育为神经细胞和胰岛B细胞，从根本上说是转录水平的差异导致的7图为利用小鼠制备单克隆P抗体的过程示意图，图中HAT培养基为选择性培养基只有杂种瘤细胞能在该培养基中生活。据图分析，下列说法错误的是（ ）A获取B淋巴细胞前需要给小鼠注射
6、P抗原B加入的聚乙二醇可促进B细胞和瘤细胞融合C细胞集落为单个鼠瘤细胞的克隆D细胞集落能无限增殖且产生P抗体8新冠病毒表面的刺突蛋白可特异性结合宿主细胞上的受体CD147，从而介导新冠病毒入侵宿主细胞。研究人员制备了针对刺突蛋白的单克隆抗体，该抗体可结合刺突蛋白，从而阻断新冠病毒刺突蛋白与CD147的结合，阻止病毒继续感染新的细胞。下列说法正确的是（ ）A新冠病毒入侵人体后可刺激浆细胞增殖，促进其分泌抗体BB淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，至少要经过1次选择才能够得到专门分泌抗刺突蛋白抗体的杂交瘤细胞C需将杂交瘤细胞置于含95%氧气加5%二氧化碳混合气体的培养箱中培养D可借助单克隆抗体的导向作用，
7、在单克隆抗体上连接抗新冠病毒的药物制成 生物导弹9科学家利用营养缺陷型菌株A、B，在缺乏A、B所需营养物质的培养基上培养，结果如下图所示。下列叙述不正确的是（ ）A各组实验所用的培养基均需灭菌处理B菌株A、B混合后能在上述培养基上生长CU型管实验证明菌株A、B释放的代谢产物形成了互补D推测菌株A、B通过接触发生了遗传物质重新组合10猕猴桃是原产我国的野生藤本果树，营养价值较高，我国现有54个种，几十个变种，丰富的种质资源为猕猴桃遗传育种提供了方便。毛花猕猴桃为二倍体，果实大，维生素C含量高；软枣猕猴桃为四倍体，极耐寒，在-40下可安全越冬。某农科所利用这两种猕猴桃体细胞，通过细胞工程的方法培育
8、出了猕猴桃新品种，培育过程如下图所示。下列说法错误的是（ ） A过程需将体细胞用含纤维素酶和果胶酶的等渗溶液处理B灭活的仙台病毒不能用于过程中a和b的诱导融合C愈伤组织形成试管苗须经脱分化和再分化两个过程D处于有丝分裂后期的杂种植株体细胞中有12个染色体组11新冠病毒是一种RNA病毒，极易产生变异，其通过表面刺突蛋白（S蛋白）的受体结合域（RBD）与人体细胞表面的ACE2受体相互作用而感染细胞。科学家设计了一种自然界中不存在的蛋白质LCB1，可与S蛋白RBD紧密结合，以干扰新冠病毒的感染。下列有关说法，错误的是（ ）ALCB1的作用效应与抗S蛋白抗体类似B可用蛋白质工程进行LCB1的设计和生产
9、C新冠病毒侵入人体后可在内环境中大量增殖D易感人群即使注射疫苗也仍然具有被感染的可能12. 大肠杆菌PUC19质粒如下图所示。LacZ基因是PUC19质粒上重要的标记基因，其表达产物能水解x-gal，进而使大肠杆菌菌落呈蓝色。用EcoRI构建重组质粒，导入受体菌（不含LacZ基因和氨苄青霉素抗性基因）并进行检测。下列叙述错误的是A. 检测前用稀释涂布平板法接种受体菌B. 培养基中应含有氨苄青霉素和X-galC. 挑取菌落的接种环在操作前后都应该灼烧灭菌D. 应挑取培养基表面的蓝色菌落进行扩大培养13. 下图表示科学家通过基因工程培育抗虫棉时，从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因“放入”棉花细胞中与棉
10、花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意图。以下说法正确的是A. 该技术的核心内容是过程，过程都涉及碱基互补配对原则B. 过程若将导入棉花细胞的叶绿体DNA中可有效减少“基因污染”C. 抗虫棉可以稳定遗传，自交子代都可以抗害虫D. 删除培育成功的抗虫棉体内的四环素抗性基因会影响抗虫基因的表达14. 下面是畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，说法正确的是A. 方法、均用到的生物技术只有胚胎移植B. 方法、处理B牛和G牛所用的激素均为雌激素C. E和F的产生过程不同，前者经历了体外受精过程，后者经历了核移植过程D. 生产上要求A、B、C、D都是遗传性能和生产性能优良的个体15新冠疫情的快速控
11、制，离不开政府的科学决策和我国对新冠病毒（RNA病毒）的快速检测能力。荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量，其原理是：在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成（如右图）。Ct值（循环阈值）的含义为：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。下列说法不正确的是（ ）A检测新冠病毒时，需加入逆转录酶将新冠病毒RNA转化为cDNABPCR每个循环包括变性、复性（引物和模板结合）、延伸3个阶段CCt值就越大表示被检测样本中病毒数目越多，患者危险性更高D若
12、样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解，检测结果可能为阴性二 不定项：本题共5小题，每小题3分，共15分，每小题有一个或多个选项符合要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，选错得0分。16某同学欲利用转基因技术将绿色荧光蛋白基因（G）整合到某行道树中，让行道树含有G基因而在夜晚发出绿色荧光，这样既可照明，又可美化环境。图中（1）和（2）分别为实验所用的质粒上相关酶切位点、含绿色荧光蛋白基因（G）的外源DNA片段。下列相关叙述正确的是（ ）A图中选择Ti质粒作为运载体的原因是Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞染色体的DNA上B图中（1）（2）形成含G基因的重组Ti质粒的过程，
13、需要限制酶EcoR I和DNA连接酶C图中含有Ti质粒的细菌甲是农杆菌，由甲到某行道树的韧皮部细胞的过程，利用的是甲的感染能力D图中由某行道树的韧皮部细胞组织乙发出绿色荧光的植株，利用的原理是植物细胞的全能性17 2019年1月24日，我国科学家宣布世界首批疾病克隆猴5只生物节律紊乱体细胞克隆猴在中国诞生，开启了克隆猴模型应用于生命科学研究的“春天”。科学家采集了一只一岁半的、睡眠紊乱最明显的BMAL1（生物节律基因）敲除猴A6的体细胞，通过体细胞核移植技术，获得了5只克隆猴这是国际上首次成功构建的一批遗传背景一致的生物节律紊乱猕猴模型。下列相关叙述正确的是（ ）A体细胞核移植技术的原理是动物
14、细胞核具有全能性B5只克隆猕猴细胞核基因型与核供体细胞完全一致C体细胞核移植需用取自新鲜卵巢的卵母细胞直接做受体细胞D该研究可弥补实验猕猴繁殖周期长、单胎数量少的不足18下图为单克隆抗体的制备过程（图中的抗原表位指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团），下列相关叙述错误的是（ ）A小鼠经抗原多次免疫后取其脾脏获取 B 淋巴细胞，1 号试管内可能含有多种 B 细胞B骨髓瘤细胞培养时会出现细胞贴壁和接触抑制，因此细胞融合前需用胰蛋白酶处理C3 号试管的杂交瘤细胞既能迅速大量增殖又能合成和分泌特异性抗体D杂交瘤细胞经筛选并克隆化培养获得的 4 种抗体都能与抗原特异性结合19研究发现，新冠病毒外壳中
15、的S蛋白具有很强的抗原性，可利用其制备单克隆抗体，制备流程设计如下图，其中序号表示过程。下列相关叙述正确的是（）A过程需要逆转录酶催化B过程需要限制酶和DNA聚合酶C细胞Y既能无限增殖，又能产生抗S蛋白的抗体D该流程涉及转基因技术、动物细胞融合技术等20下图表示运用影印培养法(使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)，检测重组质粒是否导入大肠杆菌。下列相关叙述正确的是（ ）A导入大肠杆菌的重组质粒中有特殊的标记基因B影印培养法使用的是固体培养基进行微生物培养C培养基A和培养基B的化学成分不完全相同D培养基A和B中的1菌落的类型并不相同三、非选择题：本题包括5小题，共55分
16、21. （9分）材料一：瘤胃是反刍动物的第一胃，不同品种的反刍动物瘤胃内微生物的种类和数量不同；含细菌多的氮利用率高，含真菌多的碳利用率高。材料二：经研究发现，A品种牛瘤胃内容物每毫升细菌数为7301010个、真菌数为136105个；B品种牛瘤胃内容物每毫升细菌数为3781010个、真菌数为16105个。根据材料回答：（1）华北地区每年6月份都会产生大量的小麦秸秆，要得到能分解秸秆的目的菌，最好选择_（填“A品种牛”、“B品种牛”）的瘤胃内容物，获得该类目的菌还需要选择培养，原因是_（2分）。（2）将得到的目的菌涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上，该培养基加入的刚果红能与_形成红色复合物。研究人
17、员分离得到了下表中的4个菌株，其中最适合作为目的菌的是_号，判断依据是_（2分）最大。菌株透明圈直径R菌株直径rR/r1号0403132号120623号2207314号210923（3）现利用稀释涂布平板法测定该目的菌的数量，在同一稀释倍数下4个平板上均接种01ml样品溶液，菌落数分别为156、178、486、191，通过计算得知原样品溶液中每毫升含有目的菌175108个，则稀释倍数是_（2分）。22（11分）某科技工作者对引进的蓝莓新品种利用某种技术进行快速繁殖时，用打孔器取直径为06cm的叶圆片进行消毒和培养，培养基中激素含量及培养1个月后的结果如下表。外植体消毒方法培养基中激素含量观察结
18、果IAA（mg/L）TDZ（mg/L）外植体污染率（%）外植体成活率（%）外植体分化状况70%酒精浸泡40秒2005008死亡2015011变黄或死亡70%酒精浸泡10秒2005113755形成愈伤并分化出不定根2015109762形成愈伤组织并分化出许多小芽（1）该蓝莓新品种利快速繁殖的技术为_；表中的外植体是指_，本实验中，TDZ的作用与_（填激素名称）相似。（2）若该蓝莓新品种感染了某种植物病毒，想获得无病毒的子代，则应取_部位进行培养，原因是_（2分）。（3）由外植体到愈伤组织这一过程称为_，第一、二组外植体死亡的原因是_（2分）；实验可证明TDZ的作用是_（2分）。23（10分）研究
19、表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。请分析回答：（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中_（填“低表达”或“高表达”）。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如下图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建_区基因，转入原核细胞表达并提纯。（2）将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的脾脏中B细胞与_细胞进行融合，使用的化学诱导剂是_。（3）将融合细胞在选择培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔
20、培养板上培养，吸取有克隆生长的细胞培养孔中的_（填“上清液”或“沉淀细胞”），应用_（2分）技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。（4）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过_或小鼠腹腔内培养，获取大量的单克隆抗体。（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药中物结合构建”生物导弹”，杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体_（2分）的特点。24（13分）大米铁含量极低，科研人员通过基因工程、植物组织培养等现代生物技术，培育出了铁含量比普通大米高60的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，其中为过程，ECOR、Hind
21、、BamH为限制酶。（1）该转基因水稻培育过程中选取的目的基因是_。PCR是获取大量目的基因的一种方法，PCR反应体系的成分中有两种引物，在复性时引物会结合到互补DNA链，对两种引物的设计要求之一是：两种引物之间不能碱基互补配对，试分析原因_（2分）；PCR反应体系的成分中能够决定复制特定DNA片段的是_（填“模板”、“引物”或“taq酶”）；从引物设计的角度考虑，如果目的基因两侧没有酶切位点，用PCR技术_（“可以”或“不可以”）为目的基因设置酶切位点。（2）完成图中过程需选用_（2分）限制酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA。为了筛检成功导入重组质粒的农杆菌，1号培养基需要加入_。诱导组织细
22、胞失去分化的是_号培养基。（3）图中过程，属于_（2分）技术，该技术依据的基本原理（理论基础）是_（2分）。25. （每空2分，共12分）已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗的生产和抗体的制备流程如图1所示。请回答下列问题：（1）过程代表的是_，过程构建A基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，它们应该能被受体细胞的_所识别，以便于其催化转录过程。（2）在给小鼠皮下注射A蛋白时，要重复注射几次的目的是通过二次免疫，增加小鼠体内的_数目。（3）在将X进行扩大培养前，至少需要经过2次筛选，第一次是将_筛选出来。第二次是将_筛选出来。（4）对健康人进行该传染病
23、免疫预防时，可选用图中基因工程生产的_来制备疫苗。泰安第十九中学高二级部期中考试生物试题答案一、 选择题：1.【答案】B【分析】据表分析：甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，可以作为碳源和能源，适用于异养微生物生长；乙培养基中不含有机碳源，适用于自养微生物的生长。两种培养基之间的共同点是都不含氮源，说明这两种培养基只能培养具有固氮能力的细菌。【详解】AD、固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌，甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌，AD错误；BC、乙培养基中不含有机碳源，不能用来分离异养型真菌，但可用来分离培养自养型的自生固氮菌，B正确，C错误。2. 【
24、答案】A【分析】1、无菌技术的主要内容对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。2、消毒和灭菌比较项目理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分生活状态的微生物不能灭菌强烈全部微生 物能【详解】无菌技术关键是防止杂菌的污染及操作者自身感染，错误；煮沸消毒法100煮沸5-6分钟只能杀死部分生活状态的微生物细胞，不能杀死芽孢、孢子，错误；经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不
25、能在常温长期保存，正确；将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，正确；无菌技术中，若处理对象为液体，可以用高压蒸汽灭菌法灭菌，错误。3【答案】A【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。【详解】A、该实验的外植体(幼苗子叶)需要消毒处理，而不是灭菌，灭菌会使得外植体死亡而无法培养出愈伤组织和胚状体，A错误；B、愈伤组织是由已分化的细胞变为未分化的细胞，胚状体是由愈伤组织分化而来，因此愈伤组织属于未分化细胞组织，胚状体属于已分化细胞组织，B正确；C、愈伤组织的变化
26、属于脱分化，胚状体的变化属于再分化，从图中可以看出，随着时间的变化愈伤组织的诱导率虽然有一个突变，但随着时间的增加，后期变化较小，而胚状体的诱导率随着时间的增加，呈现先增加后逐渐减少且明显的趋势，C正确；D、由胚状体诱导率的变化趋势来看，在1-2周，诱导率数据较大，因此西瓜子叶诱导形成胚状体的最适暗处理时间为1-2周说法正确，D正确。4【答案】D【分析】本实验研究的是不同的脱毒方法对滁菊体内菊花B病毒（CVB）和菊花矮化类病毒（CSVd）脱除的效果，由表格数据可知，热处理结合茎尖培养和病毒唑结合茎尖培养的效果在脱毒率方面均优于单独的茎尖分生组织培养，据此答题。【详解】A、逆转录过程需要用到逆转
27、录酶，PCR过程需要用到热稳定DNA聚合酶，A正确；B、2、5电泳结果显示标准片段之外的阳性结果，3，4则没有，说明3、4成功脱毒，2、5未能脱毒，B正确；C、观察表格发现，病毒唑结合基尖培养时，CSVd病毒脱除率最高，适用于只脱除CSVd病毒，C正确；D、病毒唑处理后，相比于对照组，成活样本数减少，成活率下降，D错误。5【答案】C【分析】分析题图：该图为体细胞杂交过程，其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的可育基因，甲品种的控制多种优良性状的核基因。【详解】A、照光处理的甲青花菜下胚轴细胞中有叶绿体，利于
28、筛选杂种细胞，A正确；B、根据试题分析：流程中A处理可使用纤维素酶和果胶酶，B处理可使用聚乙二醇，B正确；C、杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导，先经过脱分化形成愈伤组织，再分化成为杂种植株，C错误；D、甲品种控制多种优良性状的基因，为核基因，杂种植株细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，精子中具备一半核基因，能通过父本（精子）进行传递，D正确。6【答案】C【分析】分析题图：图示表示帕金森综合症和少年糖尿病的胚胎干细胞移植治疗方案，其中表示核移植过程，即将病人的体细胞核移植到去核卵母细胞中，形成重组细胞；都表示细胞分化过程，即诱导胚胎干细胞分化形成神经细胞治疗帕金森综合症，或诱导胚胎干
29、细胞分化形成胰岛B细胞治疗青少年型糖尿病。【详解】A、图中为体细胞核移植技术，形成重组细胞，A正确；B、胚胎干细胞来自早期胚胎或原始性腺，B正确；C、指进行自体移植，优点是没有免疫排斥反应，C错误；D、经过发育为神经细胞和胰岛B细胞，从根本上说是基因的选择性表达，即转录水平的差异导致的，D正确。7【答案】C【分析】单克隆抗体制备的过程：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。【详解】A、获取B淋巴细胞前需要用P抗原注射小鼠，用于产生相应的效应B细胞，A正确；
30、B、聚乙二醇能促进细胞融合，故加入的聚乙二醇可促进B细胞和瘤细胞融合，B正确；C、在HAT培养基中，只有杂种细胞能生活，因此细胞集落为单个杂交瘤细胞的克隆，C错误；D、用P抗原进行检测，细胞集落抗原-抗体反应呈阳性，说明细胞细胞集落既能无限增殖，又能产生P抗体，D正确。8【答案】D【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针
31、对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。【详解】A、浆细胞是高度分化细胞，能合成并分泌抗体，不能增殖，A错误；B、B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，至少要经过2次选择才能够得到专门分泌抗刺突蛋白抗体的杂交瘤细胞，第1次需要筛选出杂交瘤细胞，第2次筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，B错误；C、需将杂交瘤细胞置于含95%空气加5%二氧化碳混合气体的培养箱中培养，C错误；D、根据抗原与抗体特异性结合的特性，可借助单克隆抗体的导向作用，在单克隆抗体上连接抗新冠病毒的药物制成 生物导弹，D正确。9【答案】C【分析】菌株A、B单独培养都不能生长，用U型管也不能生长，说明菌株A、B释放的代谢产物没有形成互补；但混合
32、培养长成了菌落，可能是菌株A、B通过接触发生了遗传物质重新组合。【详解】A、微生物培养需要给培养基灭菌，A正确；B、如图：菌株A、B混合后能在上述培养基上长成菌落，B正确；C、在U型管不能生长，但代谢产物可以通过滤板，说明菌株A、B释放的代谢产物没有形成互补，C错误；D、混合培养长成了菌落，但在U型管不能生长，说明可能是菌株A、B通过接触发生了遗传物质重新组合，D正确。10【答案】C【分析】植物体细胞杂交过程中的注意事项：1、去细胞壁的方法：酶解法，即在温和的条件下用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。2、诱导植物细胞融合的方法：物理法：离心、振动、电激，化学法：聚乙二醇（PEG）。3、原生质体能融合
33、的原因：细胞膜具有一定的流动性。4、融合完成的标志：再生出新的细胞壁（与细胞内高尔基体有重要的关系）。5、植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。【详解】A、过程为利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体的过程，该过程需要在等渗溶液中进行，以维持原生质体的形态和功能，A正确；B、过程为植物原生质体的融合过程，其诱导方法有PEG处理、离心、振动、电激等，灭活的仙台病毒是诱导动物细胞融合的手段，不能用于植物原生质体的融合，B正确；C、愈
34、伤组织形成试管苗属于再分化过程，C错误；D、毛花猕猴桃为二倍体，软枣猕猴桃为四倍体，将二者进行植物体细胞杂交得到的杂种植株为六倍体，处于有丝分裂后期的该植株体细胞中有12个染色体组，D正确。11【答案】C【分析】根据题干分析，新冠病毒通过表面刺突蛋白（S蛋白）的受体结合域（RBD）与人体细胞表面的ACE2受体相互作用而感染细胞；而蛋白质LCB1可与S蛋白的RBD结合，阻断上述过程，从而干扰新冠病毒的感染。病原体表面的一些特定的蛋白质等物质，能够与免疫细胞表面的受体结合，从而引发免疫反应，这些能引发免疫反应的物质称为抗原。新冠病毒表面的S蛋白就是一种抗原。抗体是机体产生的专门应对抗原的蛋白质，能
35、与相应抗原发生特异性结合。抗体与病原体的结合可以抑制病原体的增殖或对人体细胞的黏附。蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。、蛋白质工程能够生产自然界中不存在的蛋白质。【详解】A、LCB1能S蛋白结合，干扰新冠病毒对人体细胞的感染，说明其作用与抗体类似，A正确；B、LCB1自然界中不存在的蛋白质，可能通过蛋白质工程进行设计和生产，B正确；C、新冠病毒无细胞结构，必需寄生在人体细胞中，C错误；D、新冠病毒是一种RNA病毒，极易产生变异；易感人群注射疫苗也具有被变异的新冠病毒感
36、染的可能，D正确。12. 【答案】D【解析】【分析】本题考查基因工程的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。【详解】筛选与分离工程菌需要用稀释涂布平板法将受体菌群接种在培养基表面，A正确；据题干可知，目的菌能够在含有氨苄青霉素和X-gal的培养基上生存，所以筛选与分离时的培养基应含有氨苄青霉素和X-gal，B正确；挑取菌落的接种环在操作前后都应该灼烧灭菌，C正确；据题干可知，受体菌不含LacZ基因和氨苄青霉素抗性基因，不能使大肠杆菌菌落呈蓝色，应挑取培养基表面的含氨苄青霉素抗性基因菌落进行扩大培养，D错误。13. 【答案】B【解析】【详解】A
37、、该技术属于基因工程，核心步骤是构建基因表达载体，即过程，过程是将基因表达载体导入受体细胞，不会涉及碱基互补配对原则，A错误；B、植株的花粉中不含叶绿体，则将基因表达载体导入叶绿体DNA中可有效减少“基因污染”，B正确；C、抗虫棉细胞的DNA分子中含有抗虫基因，由于减数分裂时等位基因分离，配子中可能不含抗虫基因，则自交后代不一定都抗害虫，C错误；D、四环素抗性基因是标记基因，抗虫基因是目的基因，则删除培育成功的抗虫棉体内的四环素抗性基因不会影响抗虫基因的表达，但会影响目的基因的检测，D错误。14. 【答案】C【解析】【详解】A、方法和方法分别是试管动物技术和核移植技术，二者均用到的主要生物技术
38、有动物细胞培养、早期胚胎培养和胚胎移植，A错误；B、方法、处理B牛和G牛所用的激素均为促性腺激素，B错误；C、E试管牛是有性生殖的产物，F克隆牛是无性生殖的产物，前者经历了体外受精过程，后者经历了核移植过程，C正确；D、A、B、C均提供细胞核，需是遗传性能和生产性能优良的个体，D受体母牛体内进行胚胎发育，具有健康体质和优良繁殖性能的特点，D错误。15【答案】C【分析】据题干分析可知，荧光积累的越快，样本中目标DNA序列越多，达到设定阈值所需的循环数越少，即Ct值越小。【详解】A、检测新冠病毒时，需加入逆转录酶将新冠病毒RNA转化为cDNA，才能被检测到，A正确；B、PCR每个循环包括变性（解开
39、双链）、退火（引物和模板结合）、延伸（Taq酶作用）3个阶段，B正确；C、Ct值就越大表示被检测样本中病毒数目越少，患者危险性更低，C错误；D、若样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解，则逆转录无法得到相应DNA，检测结果可能为阴性，D正确。二 不定项：16【答案】ACD【分析】基因操作一般要经历四个基本步骤：（1）提取目的基因（2）目的基因与运载体结合（3）将目的基因导入受体细胞（4）目的基因的检测和表达。【详解】AB、将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，将目的基因导入Ti质粒时需要导入质粒的T-DNA中，因为T-DNA能够转移到受体细胞染色体DNA上，由此可知选择的限制酶应是 B
40、amH I，A正确，B错误；C、利用农杆菌感染植物细胞，将目的基因插入植物细胞的染色体DNA上，C正确；D、题图中由某行道树的韧皮部细胞组织乙发出绿色荧光的植株，为植物组织培养的过程，利用的原理是植物细胞的全能性，D正确。17 【答案】ABD【分析】体细胞核移植过程：【详解】A、动物细胞核移植获得克隆动物所依据的原理是动物细胞核具有全能性，A正确；B、5只克隆猕猴是通过体细胞核移植技术获得的，其细胞核基因型与核供体细胞完全一致，B正确；C、取自卵巢的卵母细胞需要培养到M中期时，才可进行核移植，C错误；D、体细胞核移植时供核的供体可不受年龄影响，且体细胞数量多，所以该研究可弥补实验猕猴繁殖周期长
41、、単胎数量少的不足，D正确。18【答案】B【分析】单克隆抗体的制备（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。【详解】A、由于抗原上有多种抗原表位，不同的抗原表位可以结合不同的B淋巴细胞，导致增殖和分化，因此1 号试管内可能含有多种 B 细胞，A正确；B、普通的体细胞培
42、养会出现细胞贴壁和接触抑制现象，而骨髓瘤细胞能无限增殖，不会出现细胞贴壁和接触抑制现象，B错误；C、3 号试管的杂交瘤细胞是特定的抗原表位刺激产生的效应B细胞与骨髓瘤细胞融合形成的，既能迅速大量增殖又能合成和分泌特异性抗体，C正确；D、杂交瘤细胞经筛选并克隆化培养获得的 4 种抗体，在抗原上都存在相应的抗原表位，因此 4 种抗体都能与抗原特异性结合，D正确。19【答案】AC【分析】题图分析：表示获取新冠病毒的RNA，表示逆转录得到DNA，表示用大肠杆菌构建新冠病毒的基因组文库，表示翻译得到新冠病毒的S蛋白，表示构建含有无限增殖的调控基因的基因表达载体，表示把含有无限增殖的调控基因的基因表达载体
43、导入细胞X中。 【详解】A、过程是以RNA为模板，制备DNA的过程，该过程需要逆转录酶的催化，A正确；B、过程构建病毒的基因组文库时，需要限制酶和DNA连接酶，B错误；C、根据题图分析细胞X是从接受了新冠病毒的S蛋白刺激的小鼠体内提取的，同时又导入了无限增殖的调控基因，由此检测筛选的细胞Y既能无限增殖，又能产生抗S蛋白的抗体，C正确；D、该流程涉及转基因技术，但没有利用动物细胞融合技术，D错误。20【答案】ABC【分析】影印平板培养法在基因工程中运用往往是为了筛选出含有重组质粒的目的菌株。图中可以看出，培养基B中缺少了4、6两个菌落，说明培养基B中含有的特殊成分能抑制4、6两个菌落微生物生长。
44、【详解】A、运载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因，标记基因可以是抗生素抗性基因或荧光标记基因，以便于重组后进行筛选，A正确；B、为了使菌落的生长位置固定，影印培养法使用的是固体培养基进行微生物培养，B正确；C、培养基A和B的目的是为了筛选出含有目的基因的重组质粒的大肠杆菌，两种培养基的区别是有各自特殊的筛选物质，而培养基的营养、pH等都相同，所以二者的化学成分不完全相同，C正确；D、培养基A和B中都有1菌落，说明1菌落在两种培养基里都能存活下来，是相同的菌落，D错误。三、 非选择题：21. （9分）【答案】 (1). B品种牛 B品种牛虽然含有真菌较多，但是能分解纤维素的目的菌可能较少
45、（或增加目的菌数量） （2分） (2). 纤维素 3 透明圈直径R与菌株直径r的比值 （2分） (4). 105（2分）【分析】1、根据提供信息分析，含细菌多的氮利用率高，含真菌多的碳利用率高，因此A牛对氮的利用率较高，B牛真菌较多，对碳的利用率高。2、大多数微生物最适生长pH值为59大多数细菌的最适生长pH值为6.57.5；霉菌最适生长pH值为4.85.8；酵母菌最适生长pH值为3.56.0。【详解】（1）小麦秸秆细胞壁的主要成分是纤维素，是含碳有机物，而B牛对碳的利用率高，因此要得到能分解秸秆的目的菌，最好选择B品种牛的瘤胃内容物；由于真菌的数量虽然多，但分解纤维素的目的菌不一定多，因此获
46、得该类目的均还需要选择培养，以增加目的菌数量。（2）用涂布器将得到的目的菌涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上，该培养基中加入的刚果红，刚果红能与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，透明圈越大，对纤维素的分解能力越大。表格中3号的透明圈直径R与菌株直径r的比值最大，说明最适合作为目的菌的是3号。（3）用于计数细菌菌落的常用方法是稀释涂布平板法，统计的菌落数应介于30300之间，故选择细菌菌落数为156、178和191的平板计数，每克该土壤样品中的菌落数对应的应该是每毫升菌液中的细菌数目，所以每克该土壤样品中的菌落数为（156+17
47、8+191）30.1稀释倍数=1.75108，因此稀释倍数=105。22（11分）【答案】（1）组织培养 直径为0.6cm的叶圆片 细胞分裂素 （2） 分生区附近 植物分生区附近病毒极少甚至没有病毒（2分） （3）脱分化 酒精浸泡时间过长 （2分） 影响愈伤组织分化的方向 （2分） 23（10分）【答案】（1）低表达 胞外 （2）骨髓瘤 PEG（或聚乙二醇） （3）上清液 抗原抗体杂交（2分） （4）体外（培养） （5）特异性强（或“识别抗原部位专一”）（2分） 【分析】单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备将抗原注入小鼠体内获得效应B细胞效应B细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合用特定培养基筛选出杂交瘤细胞筛
48、选能够产生所需抗体细胞群再生培养液或小鼠腹腔中培养从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。【详解】（1）根据题意，H蛋白在多种恶性肿瘤细胞尤其是乳腺癌细胞中过量表达，因此在成年个体的正常组织中表达较少（低表达）；由于抗体存在于细胞外液中，与抗原结合时，会与抗原的胞外区结合，因此要构建胞外区基因作为目的基因。（2）制备单克隆抗体的过程中，应把小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行融合，使用的化学诱导剂为聚乙二醇，细胞融合时遵循的生物学原理是细胞膜的流动性。（3）融合后的细胞有多种，需要在选择培养基中进行筛选，只有杂交瘤细胞能够生长；在多孔培养板上，吸取克隆生长的细胞培养孔中的上清液进行检测，检测时采用的方法
49、是抗原-抗体杂交的方法。（4）杂交瘤细胞进行培养时可以采用体外培养或小鼠腹腔中进行培养的方法，可以获得大量的单克隆抗体。（5）由于生物导弹能定向杀死癌细胞，利用了单克隆抗体能与抗原特异性结合的特点。【点睛】本题涉及到基因工程、细胞融合技术、单克隆抗体的制备等知识点。主要考察的是单克隆抗体的制备过程，准确记忆是解决本题的关键。24（13分）【答案】（1）铁合蛋白基因 防止引物之间结合形成双链，降低引物与DNA模板链结合的效率 （2分） 引物 可以 （2） BamH和Hind（2分） 潮霉素 2 （3）植物组织培养（2分） 植物细胞的全能性（2分） 【分析】根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的
50、种类：1、应选择切点位于目的基因两端的限制酶。2、不能选择切点位于目的基因内部的限制酶。3、为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒。【详解】（1）据图分析，目的基因为铁合蛋白基因。两种引物之间若能碱基互补配对，会导致引物结合形成双链，降低引物与DNA模板链结合的效率。PCR过程中，根据一段已知目的基因的核苷酸序列来合成引物，所以决定复制特定DNA片段的是引物。获得目的基因后一般需要将目的基因连接到质粒载体上，在引物上加酶切位点可以使后续的连接过程简单、可控，因此如果目的基因两侧没有酶切位点，用PCR技术可以为目的基因设置酶切位点。（2）图中过程为基因表
51、达载体的构建。若选用ECOR，会破坏目的基因；由于目的基因两侧的酶切位点被Hind、BamH识别，且质粒中也存在同样的酶切位点，则所选用的限制酶为BamH和Hind。质粒中的标记基因是潮霉素抗性基因，所以成功导入重组质粒的农杆菌能够抗潮霉素，则1号培养基需要加入潮霉素。3号培养基中培养的为愈伤组织，其为脱分化的结果，则诱导组织细胞失去分化的是2号培养基。（3）据图分析，过程属于植物组织培养，依据的原理是植物细胞的全能性。【点睛】解答本题的关键是熟知基因工程和植物组织培养技术，尤其是对PCR技术过程的理解。25. （每空2分，共12分）【答案】 (1). 逆转录 . RNA聚合酶 (2). 浆细
52、胞 (3). 杂交瘤细胞 能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞 (4). A蛋白【解析】【分析】分析题图：图示为疫苗生产和抗体制备的流程之一，其中表示逆转录过程；是获取目的基因（A基因）的过程；是基因表达载体的构建过程；是将目的基因导入受体细胞的过程；是从小鼠皮下获取已经免疫的B细胞的过程；表示B细胞的增殖和分化过程；是细胞融合过程；X为杂交瘤细胞。【详解】（1）由以上分可知：代表的是逆转录。过程构建A基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，启动子能被受体细胞的RNA聚合酶所识别，以便于其催化转录过程。（2）在给小鼠皮下注射A蛋白时，要重复注射几次的目的是通过二次免疫，增加小鼠体内的浆细胞数目。（3）在将X进行扩大培养前，至少需要经过2次筛选，第一次筛选是筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选是筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞，以便大量培养获得单克隆抗体。（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的A蛋白来制备的疫苗。
