1、2019届山东省青岛第二中学高三上学期期末考试此卷只装订不密封班级 姓名 准考证号 考场号 座位号 生物注意事项：1答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在试题卷和答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。2选择题的作答：每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。3非选择题的作答：用签字笔直接答在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。4考试结束后，请将本试题卷和答题卡一并上交。第I卷（选择题）一、单选题1下图所示为来自同一人体的4 种细胞,下列叙述正确的是（ ）A因为来自同一人体,
2、所以各细胞中的 DNA 含量相同B因为各细胞中携带的基因不同,所以形态、功能不同C虽然各细胞大小不同,但细胞中含量最多的化合物相同D虽然各细胞的生理功能不同,但吸收葡萄糖的方式相同2将红细胞移入低渗溶液后，很快吸水膨胀，而水生 动物非洲爪蟾的卵母细胞在低渗溶液不膨胀。将控制红细胞膜上 CHIP28(一种水通道蛋白)合成的 mRNA 注入非洲爪蟾的卵母细胞中，在低渗溶液中，卵母细胞迅速膨胀，并于 5分钟内破裂。判断以下说法错误的是ACHIP28 的加工、运输需要内质网和高尔基体的参与B红细胞在低渗溶液中胀破的原因是通过自由扩散吸收了过多的水C非洲爪蟾卵母细胞在低渗溶液不膨胀的原因是细胞膜上无类似
3、 CHIP28 蛋白D肾小管在抗利尿激素作用下重吸收水可能与 CHIP28 有关3图表示夏季玉米地里距地面高度不同处CO2浓度的变化，实线表示10时的测定结果，虚线表示22时的测定结果。下列分析正确的是A在富含有机肥的农田中，图中c点会左移B10时，植株不同高度处的光反应强度相同C22时，植株高处比低处固定CO2能力强Db点对应处是玉米植株叶光合面积较大处4若两条链都含32P的DNA分子的分子量是M，两条链都不含32P的DNA的分子量为N。现将含32P的DNA的细菌放在不含32P的培养基上让其分裂a次，则子代细菌的DNA的平均分子量是 ( )A BC D5不同基因型的褐鼠对灭鼠灵药物的抗性和对
4、维生素K的依赖性（即需要从外界环境中获取维生素K才能维持正常生命活动）见下表。在维生素K含量不足的环境中对褐鼠种群长期连续用灭鼠灵进行处理，则褐鼠种群基因型rrRrRR灭鼠灵敏感抗性抗性维生素K依赖性无中度高度Ar基因频率会接近50%BRr基因型频率不变C基因库会发生显著变化D抗性个体RRRr=116科学家对生活在某生态系统的一个蜘蛛种群的能量进行定量分析，得出了能量流经这种肉食动物的有关数据（能量以种群的质量表示）。如图所示。下列叙述错误的是（ ）A在食物链上，蜘蛛至少位于第三营养级B蜘蛛吃下的未被蜘蛛同化的能量属于上一营养级同化量中的一部分C图中X代表用于蜘蛛生长、发育和繁殖的能量D根据图
5、中的数据可以计算出猎物种群与蜘蛛间的能量传递效率第II卷（非选择题）二、非选择题7小球藻是一种单细胞藻类植物，下图是利用小球藻和酵母菌研究光合作用和呼吸作用的实验装置。K1（左）、K2（右）为阀门，实验开始前为关闭状态，请回答下列问题：（不考虑通气管内的气体影响）（1）试管中小球藻含丰富的叶绿素，叶绿素的吸收光谱中波峰处主要是_光。（2）打开K1，给予试管一定强度的光照，一段时间后发现注射器活塞移动一段距离后停止，停止移动的原因是_。（3）打开K2，推空注射器后关闭K1，发现红色液滴由a处移至b处，继续给予试管光照，观察红色液滴的移动情况：若液滴不移动，此时酵母菌的呼吸方式为_。若液滴右移，此
6、时酵母菌的呼吸方式中一定有_，右移的原因是_；如果要进一步确定此结论，可取培养瓶中培养液，加入_（试剂），观察到的颜色变化是_。8某生物科技小组对一玉米农田进行实地调查，发现基因A和B同时存在时,玉米其顶部开雄花，下部开雌花而成为正常株；基因A不存在，B存在时,玉米不能开出雌花而成为雄株；基因型中含有bb的玉米不能开出雄花而成为雌株。两对基因（分别用A、a和B、b表示）位于两对同源染色体上。请你运用所学知识回答下列问题。（1）育种工作者选用上述材料（不用雌雄同株）做亲本，杂交后得到下表中结果：类 型正常株雄株雌株数 目99810011999请问亲本的组合是_（2）玉米的纯合体雄株和雌株在育种中
7、有重要的应用价值，在杂交育种时可免除人工去雄的麻烦。为了确保纯合子雄株和雌株的杂交后代都是正常植株，那么培育出的符合生产要求的纯合体雄株和雌株基因型分别为_。（3）请根据单倍体育种的原理，利用该农田中的正常植株，写出培育符合生产要求的纯合体雄株和纯合体雌株的实验过程：_；_。利用杂交的方法，鉴定符合要求的纯合体雄株和雌株。请简要写出步骤及结论：_。9人体的稳态是机体进行正常生命活动的必要条件。下图1表示人体某器官由于感染出现炎症时神经体液免疫相互调节的关系模式图，图2是雌性激素调节细胞功能的示意图。请据图回答：(1)据图可知图1中的_(填名称)分泌_作用于肾上腺，使肾上腺分泌糖皮质激素(免疫抑
8、制剂)，并作用于发炎部位的淋巴细胞，使炎症_（填增强或减轻）。(2)图1中物质由产生并作用于免疫细胞上的，物质的名称是_，是_。和图2中的雌性激素一般都有对应的结构，但性激素起作用的过程与有何不同_。(3)免疫细胞产生的物质（白细胞介素、肿瘤坏死因子）作用于时，发生了_的信号转换过程。10在青藏高原高寒草甸生态系统中，髙原雪兔是一种常见动物，常栖息在低矮草地中，天敌有香鼬、艾虎、赤狐、狼等。冬季时，高原雪兔几乎成为这些动物唯一的食物来源。为了观察预警,高原雪兔会把巢穴周围较高的草从基部咬断。高原雪兔废弃的洞穴还能为褐背拟地鸦和多种雪雀提供繁殖场所。请回答下列相关问题：（1）研究人员通常采用_法
9、估算该地区高原雪兔的种群数量，然后根据调查统计的数据，绘制了高原雪兔种群数量Nt+1/Nt,比值与时间（t)的变化曲线，当t为ab时,种群的年龄组成为_；当t为ce时，髙原雪兔的出生率_(填“大于”“等于”或“小于”）死亡率。 （2）高原雪兔的存在_(填“增加”“减少”或“不影响”）高寒草甸生态系统的物种丰富度；其挖洞穴居的习性，增加了本地原生植物产量，改善了土壤条件，这体现了生物多样性的_价值。高原雪兔感受到赤狐粪、尿的气味,会有躲到洞穴中的行为，这体现了信息传递具有_的作用。（3）髙寒草甸生态系统与热带雨林相对比，祗抗力稳定性比较低，原因是_。11某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出高效降
10、解脂肪的菌株。请依据题意回答：（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。（2）为避免培养基污染，需将培养皿呈 状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行 处理。为了排除培养基被污染，需设置接种等量 的培养基作为空白对照。（3）为了筛选出菌株，可将适量的 试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围出现 ，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。（4）纯化菌种时，为了对活菌计数，常采用 法接种于新的培养基平板上。12科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图： （1）步骤中，在核移植
11、前应去除卵母细胞的_。（2）分离获取ES细胞可以是来自早期胚胎的哪些阶段的哪些细胞？_（3）步骤中，需要构建含有干扰素基因的_。构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取_作为引物。对干扰素基因片段和质粒进行酶切时，可选用限制酶的组合为_。（4）将步骤获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发_色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达，可以采用_的方法。（5）科学家正在通过蛋白质工程技术将干扰素分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可以在不影响其活性的前提下延长其保存周期。这项技术是以_为基础而进行的操作。2019届山东省青岛第二中学高三上学期期
12、末考试生物 答案1C【解析】卵细胞通过减数分裂形成，核DNA含量减半，神经细胞、白细胞、小肠上皮细胞是有丝分裂和细胞分化形成，核DNA不变，所以四种细胞的DNA含量不同，A错误；由于基因的选择性表达，各细胞的形态、功能不同，B错误；各细胞的大小不同，但细胞中含量最多的化合物相同，都是水，C正确；葡萄糖进入不同细胞的方式可能不同，协助扩散或主动运输，D错误。【考点定位】细胞的多样性2B【解析】【分析】据题意可知，水生动物非洲爪蟾的卵母细胞在低渗溶液不膨胀，而将控制红细胞膜上CHIP28（一种水通道蛋白）合成的mRNA注入非洲爪蟾的卵母细胞中，在低渗溶液中，卵母细胞迅速膨胀，说明水的吸收与水通道蛋
13、白有关。【详解】CHIP28为细胞膜上的通道蛋白，故它的加工、运输需要内质网和高尔基体的参与，A正确；据题意可知，水的过量吸收需通过通道蛋白，故属于协助扩散，B错误；非洲抓蟾卵母细胞在低渗溶液不膨胀的原因是细胞膜上无类似CHIP28蛋白，C正确；肾小管在抗利尿激素作用下重吸收水可能与CHIP28有关，D正确；故选B。【点睛】本题的知识点是水分子跨膜运输的方式，水通道蛋白在水分子运输中的作用，蛋白质的合成，结构与功能，明确实验的实验组与对照组，分析实验结果获取结论是解题的关键。3D【解析】【分析】本题主要考查影响光合作用的主要环境因素，二氧化碳是光合作用的原料，其他条件一致时，二氧化碳浓度不同，
14、光合速率也不同；从图中可以看出，上午10时，由于距离地面高度不同处CO2浓度不同，光合速率也不同，夜晚，无光照，不能进行光合作用，不固定二氧化碳。【详解】富含有机质的农田中，由于微生物分解作用，会释放出二氧化碳，故C点将会右移，A错误；图中实线可知，上午10时玉米植株不同高度CO2的吸收量不同，植株不同高度处接收到的光照强度不同，故植株不同高度处的光反应强度不同，B错误；夜晚，无光照，不能进行光合作用，不固定二氧化碳，C错误；右图可知，b点二氧化碳浓度最低，是玉米光合作用面积较大处的高度，D正确；故选D。【点睛】本题主要考查影响光合作用的因素，意在考查考生识图读图的能力，把握知识间内在联系的能
15、力。4B【解析】【分析】DNA的复制：1、时间：有丝分裂间期和减数分裂间期；2、条件：模板-DNA双链；原料-细胞中游离的四种脱氧核苷酸；能量-ATP；多种酶；3、过程：边解旋边复制，解旋与复制同步，多起点复制；4、特点：半保留复制，新形成的DNA分子有一条链是母链。由图可知，DNA分子复制的方式是半保留复制，且合成两条子链的方向是相反的；DNA解旋酶能使双链DNA解开，且需要消耗ATP；DNA在复制过程中，边解旋边进行半保留复制。【详解】根据半保留复制的原则，分裂a次后，两条链都含32P的DNA有0个，只有一条链含32P的DNA有2个，两条链都不含32P的DNA有(2a2)个，易得DNA的平
16、均分子量为B项所述。【点睛】本题考查DNA复制有关的计算，意在考查考生能用数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容，能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论。5A【解析】【分析】分析表格信息可知，由于基因型为RR、Rr的小鼠对灭鼠灵具有抗性，基因型为rr个体对灭鼠灵敏感，因此使用灭鼠灵后，基因型为rr个体生存并繁殖后代的机会降低，基因型为RR、Rr的个体生存并繁殖后代的机会增加，长期使用灭鼠灵后，小鼠种群中的个体的基因型为RR、Rr；又知，rr个体对维生素K无依赖性，Rr个体对维生素K具有中度依赖，RR个体对维生素K
17、高度依赖，因此在维生素K含量不足环境中，rr、Rr、RR生存并繁殖后代的机会依次降低；综上两方面原因，若对生活在维生素K含量不足环境中的褐家鼠种群长期连续使用灭鼠灵进行处理，该褐家鼠种群中绝大多数个体的基因型为Rr。【详解】据表格分析：对灭鼠灵药物的抗性越大的褐鼠对维生素K的依赖性越强，若对褐鼠种群长期连续使用灭鼠灵，根据进化理论观点，适者生存，不适者被淘汰，RR的个体数量应增加，rr个体数量应减少，但因环境中维生素K含量不足，致使RR的个体数量增长受到限制，只有中间类型Rr存活的机会较大，r的基因频率最终接近50%，A正确；若对生活在维生素K含量不足环境中的褐家鼠种群长期连续使用灭鼠灵进行处
18、理，该褐家鼠种群中绝大多数个体的基因型为Rr，故Rr基因型频率增大，BD错误；基因库不会发生显著变化，C错误；故选A。【点睛】本题考查基因型和基因频率相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论能力。6D【解析】依题意可知：蜘蛛为肉食动物，因此在食物链中，蜘蛛至少位于第三营养级，A正确；蜘蛛吃下的未被蜘蛛同化的能量属于上一营养级同化量中的一部分，B正确；蜘蛛同化的能量，除了一部分用于呼吸消耗外，余下的能量用于蜘蛛的生长、发育和繁殖，因此图中X代表用于蜘蛛生长、发育和繁殖的能量，C正确；根据图中的数据，不能确
19、定猎物种群的同化量，因此不能计算出猎物种群与蜘蛛间的能量传递效率，D错误。【点睛】本题的易错点在于：因没有正确理顺某营养级获取能量的过程及该能量的去向而导致误判。输入每营养级的能量去向分为两部分：一部分在该营养级生物的呼吸作用中以热能的形式散失了，一部分则用于该营养级生物的生长、发育和繁殖。而后一部分能量中，包括现存的生物体含有的能量（未被利用）、流向分解者的能量、流向下一营养级的能量（最高营养级生物除外）。能量传递效率下一营养级的同化量上一营养级的同化量100%。7（1）红光和蓝紫光 （2）NaHCO3供给的CO2有限，CO2不足以让小球藻继续进行光合作用（2分）（3）有氧呼吸 无氧呼吸 酵
20、母菌进行无氧呼吸产生的CO2被小球藻光合作用消耗，生成等量O2，使装置内气压上升，液滴右移（2分） 酸性重铬酸钾溶液 橙色灰绿色【解析】试题分析：（1）叶绿素主要吸收红光和蓝紫光，故叶绿素的吸收光谱中波峰处主要是红光和蓝紫光。（2）打开K1，给予试管一定强度的光照，小球藻进行光合作用释放氧气，试管气压上升，注射器活塞左移，碳酸氢钠溶液提供的二氧化碳量有限，一定时间后不再提供二氧化碳，光合作用停止，不再释放氧气，故注射器活塞停止移动。（3）液滴不移动，瓶内气压不变，说明酵母菌只进行有氧呼吸，消耗的氧气量和释放的二氧化碳量相等，而释放的二氧化碳被小球藻利用生成等量氧气。故瓶内气压不变。液滴右移，此
21、时酵母菌的呼吸方式可能为只进行无氧呼吸，不消耗氧气，释放二氧化碳被小球藻光合作用利用生成等量氧气，瓶内气压上升。可以用酸性橙色重铬酸钾溶液于酒精反应，变成灰绿色。考点：本题考查光合作用和细胞呼吸实验分析，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力；备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理能力。8aaBbXAabb aaBB、AAbb 选取正常植株的花粉，进行花药离体培养，得到单倍体幼苗 用适宜浓度的秋水仙素溶液处理单倍体玉米幼苗，得到纯合体二倍体玉米植株，表现型为正常株、雄株、雌株 选取多株雌株玉米与雄株玉米分别杂交，若杂交后代只
22、有正常株，则亲本为符合生产要求的纯合体雌株和雄株；若后代有雌株和雄株，则亲本不符合生产要求的纯合体雌株和雄株 【解析】【分析】根据题意分析可知：基因型为A_B_为雌雄同株；aaB_为雄株；而A_bb或aabb则为雌株，杂交后代中正常株（A_B_）：雄株（aaB_）：雌株（A_bb或aabb）=1：1：2，该比例为测交后代1：1：1：1比例的变式据此答题。【详解】（1）aaBbAabbAaBb：Aabb：aaBb：aabb=1：1：1：1，即正常株：雄株：雌株=1：1：2。（2）由于正常植株的基因型为A_B_，而雄株的基因型为aaB_，雌株的基因型为A_bb或aabb，所以选育出的雌株不能是aa
23、bb，且都是纯合体，因此，选育出的雄株和雌株的基因型分别为aaBB和AAbb。（3）由于正常植株AaBb经减数分裂能产生AB、Ab、aB、ab四种配子，所以选择正常植株的花粉，进行花药离体培养，得到单倍体幼苗。用适宜浓度的秋水仙素处理单倍体玉米幼苗，使其染色体加倍，得到纯合的二倍体植株AABB、AAbb、aaBB和aabb，其中雄株（aaBB）、雌株（AAbb）即为符合生产要求的类型。将选取多株雄株与雌株进行杂交，若杂交后代只有正常株，则亲本为符合生产要求的纯合体雌株和雄株；若后代有雌株和雄株，则亲本不符合生产要求的纯合体雌株和雄株，应淘汰。【点睛】本题考查了基因自由组合定律的应用，难度适中，
24、考生要能够根据题意确定雌雄同株、雄株、雌株的基因型；根据后代表现型比例确定1：1：2为测交后代1：1：1：1比例的变化。9垂体 促肾上腺激素 减轻 神经递质 特异性受体 图1(受体)位于细胞膜上,图2位于细胞内，性激素以自由扩散方式进入细胞，与其受体结合而进一步发挥调节作用 化学信号转换为电信号 【解析】【分析】分析图1：图1表示人体某器官由于感染出现炎症时神经-体液-免疫相互调节的关系模式图，其中糖皮质激素的分泌过程为：下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素垂体促肾上腺皮质激素肾上腺腺糖皮质激素。分析图2：图2是糖皮质激素调节细胞功能的示意图，糖皮质激素进入细胞后形成激素-受体蛋白复合物，并进一步启
25、动基因表达的转录过程。【详解】（1）据图可知图1中的下丘脑分泌促肾上腺皮质激素释放激素作用于垂体，垂体分泌促肾上腺激素作用于肾上腺，使肾上腺分泌糖皮质激素(免疫抑制剂的一种类固醇激素)，并作用于发炎部位的淋巴细胞，使炎症减轻。（2）图1中是神经细胞产生的神经递质，能与免疫细胞上的特异性受体结合。由图可知，图1中的（受体）位于细胞膜上，图2中的受体蛋白位于细胞内，性激素以自由扩散方式进入细胞，与其受体结合而进一步发挥调节作用。 （3）免疫细胞产生的物质（白细胞介素、肿瘤坏死因子）作用于神经细胞，此过程化学信号转换为电信号。【点睛】本题结合图解，考查神经、体液和免疫调节在维持稳态中的作用，要求考生
26、识记甲状腺激素的分级调节过程，并能进行迁移应用；识记神经冲动的产生过程，掌握神经冲动在神经元之间的传递过程；识记遗传信息的转录和翻译过程，能认真分析题图，提取有效信息答题。10标志重捕 衰退型 大于 增加 间接 调节生物的种间关系，以维持生态系统的稳定 该生态系统的生物种类少，营养结构（食物网）简单，自我调节能力弱 【解析】【分析】据图分析，ab时，Nt+1/Nt小于1，种群数量减少；be时，Nt+1/Nt大于1，种群数量增加；e点后，Nt+1/Nt小于1，种群数量减少。【详解】（1）雪兔活动能力强，活动范围广，采用标志重捕法估算该地区种群数量，当t为ab时，Nt+1/Nt小于1，种群数量减少
27、，年龄组成为衰退型；当t为ce时，髙原雪兔的出生率大于死亡率，使得种群数量增加。（2）高原雪兔的存在增加高寒草甸生态系统的物种丰富度；其挖洞穴居的习性，增加了本地原生植物产量，改善了土壤条件，这体现了生物多样性的间接价值高。原雪兔感受到赤狐粪、尿的气味，会有躲到洞穴中的行为，体现了信息传递具有调节生物的种间关系，以维持生态系统的稳定的作用。赤狐粪、尿的气味对于高原雪兔来说，属于生态系统信息传递中的化学信息。（3）髙寒草甸生态系统的生物种类少，营养结构（食物网）简单，自我调节能力弱，抵抗力稳定性低。【点睛】本题考查调查种群密度的方法、年龄结构、生物多样性的价值、信息传递的功能、生态系统的稳定性，
28、意在提升学生分析标记重捕法适用的范围，了解年龄结构的三种类型，理解生物多样性的三个价值，分析信息传递的三个功能，掌握生态系统稳定性的原因。11豆油(或脂肪) 选择 倒置 梯度稀释(或系列稀释) 无菌水 苏丹(或苏丹) 透明圈 稀释涂布平板 【解析】试题分析：熟记并理解微生物的实验室培养、微生物的分离与鉴定等相关基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上从题图中提取信息并结合题意作答。(1)依题意，欲从被豆油污染的土壤中筛选出高效降解脂肪的菌株，应将土壤样品稀释液接种于以豆油(或脂肪) 为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲,该培养基属于选择培养基。(2)为避免培养基被污染,需将培养皿呈倒置状态放置
29、。为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行梯度稀释(或系列稀释) 处理。为了排除培养基被污染,需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。(3)脂肪被苏丹染液（或苏丹）染成橘黄色（或红色)；能高效降解脂肪的菌株所分泌的脂肪酶能够催化脂肪水解，在培养基中的该菌落周围会出现透明圈。可见，为了筛选出能高效降解脂肪的菌株,可将适量的苏丹(或苏丹)试剂滴加在平板中的菌落周围；洗去浮色后，如果菌落周围出现透明圈，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。(4) 纯化菌种时,为了对活菌计数,常采用稀释涂布平板法接种于新的培养基平板上。【点睛】本题的易错点在于对 (4)的解答。解答的关键是明确纯化微生物时的两种接种方法（平
30、板划线法和涂布平板法）的异同：两种接种方法作用不完全相同：平板划线法和涂布平板法都能使细菌纯化，但平板划线法不易分离出单个菌落，不能计数；涂布平板法能使单菌落分离，便于计数。涂布平板法的缺点：涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。12细胞核 桑椹胚期前的阶段的每一个细胞以及囊胚期内细胞团的细胞 基因表达载体 B和C Hind和Pst或EcoR和Pst 绿 抗原抗体杂交 蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系 【解析】【分析】分析图1：表示核移植过程；表示早期胚胎培养过程；表示将目的基因导入ES细胞。分析图2：该DNA片
31、段含有四种限制酶识别序列和切割位点，其中Sam酶的识别序列和切割位点位于目的基因上。分析图3：图3为质粒结构示意图，该质粒含有2个标记基因（红色荧光标记基因和绿色荧光标记基因）。【详解】（1）核移植是将体细胞核移植到去核的卵母细胞中，所以实验前要去除卵母细胞的细胞核。（2）分离获取ES细胞可以是来自早期胚胎的桑椹胚期前的阶段的每一个细胞以及囊胚期内细胞团的细胞。（3）步骤是将目的基因导入ES细胞，该过程之前需要构建基因表达载体；DNA复制只能从5到3，因此构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从图2中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取B和C作为引物。由图可知，Sam酶的识别序列和切割位
32、点位于目的基因上，用该酶切割会破坏目的基因，因此对干扰素基因片段和质粒进行酶切时，可选用限制酶Hind和Pst或EcoR和Pst。（4）用限制酶Hind和Pst或EcoR和Pst切割时会破坏红色荧光蛋白基因，但不会破坏绿色荧光蛋白基因，因此将步骤获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发绿色荧光的细胞进行体外诱导，为检测干扰素基因是否表达，可以采用抗原-抗体杂交法。（5）科学家正在通过蛋白质工程技术将干扰素分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可以在不影响其活性的前提下延长其保存周期。这项技术是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系为基础而进行的操作。【点睛】本题以基因治疗的流程图为载体，考查了基因工程、蛋白质工程、细胞工程以及胚胎工程等方面的知识，难度适中。考生要能够识记细胞核移植的过程；识记囊胚包括内细胞团和滋养层两部分；明确基因工程中质粒和目的基因需要利用同种限制酶进行切割；掌握目的基因检测和鉴定的一般方法等。
