1、专题2 微生物的培养与应用课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课堂巩固课后检测基础训练课 堂 巩 固一、选择题(每小题 4 分，共 20 分)1分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是()加尿素 不加尿素 加琼脂 不加琼脂 加葡萄糖 不加葡萄糖 加硝酸盐 不加硝酸盐A B C DB解析：要分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，正确、错误；分离土壤中分解尿素的细菌用固体培养基需加入琼脂，正确，错误；培养基中需要加碳源即葡萄糖，正确，错误；不需要氮源，故不加硝酸盐，错误，正确，因此 B 正确。2下列关于微生物计数的实验分析中，说法错误的是()A取样不同，会导致实验结果不同B微生物不同，需要稀
2、释的倍数一般不同C实验过程中需要对样品、培养基进行灭菌D实验需要空白对照，以确保培养基和操作过程未被污染C解析：在微生物的计数实验中，不同的样品中微生物的种类和数量一般不会相同，所以实验结果也会不同，甚至差异很大，A 项正确；不同的微生物在样品中的数量一般不同，所以进行稀释操作时，稀释的倍数也应不同，B 项正确；实验过程中需要对培养基灭菌，但不能对样品灭菌，如果对样品灭菌，则不会培养出任何微生物，C 项错误；为确保实验结果的准确性，还需要同时做空白对照实验，验证培养基和操作过程未被污染，D 项正确。3下列生物学实验操作，能够顺利达到实验目的的是()A在固体培养基上涂布稀释的大肠杆菌培养液获得单
3、菌落B在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通入无菌空气制作果酒C土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上筛选分解尿素的细菌D在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液A解析：在固体培养基上涂布稀释后的菌液能够得到单个菌落，A 正确；在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通入无菌空气，有利于酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，不利于制作果酒，B 错误；牛肉膏蛋白胨培养基不能筛选出分解尿素的细菌，应在以尿素为唯一氮源的培养基上筛选尿素分解菌，C 错误；在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，土样中的微生物全部被杀死，不能用于制取土壤稀释液，D 错误。4在以尿素作为唯一氮源的培养基
4、上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入 10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出()A乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌B分解尿素的细菌、大肠杆菌、放线菌C分解尿素的细菌、霉菌、放线菌D固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌C解析：乳酸菌属于异养厌氧微生物，不能在缺氮培养基上生存；金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，A 错误；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，大肠杆菌不能在添加青霉素的选择培养基上生存，B 错误；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，在添加青霉素的选择培养基上可
5、以筛选分离真菌(如霉菌)，加入 10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长可以筛选分离放线菌，C 正确；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，D 错误。5下列就“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的有关叙述，不正确的是()A经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置B同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数C在稀释度足够高时，所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同D在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染C解析：“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中，经高
6、压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置，以防止杂菌污染，A 正确；同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数，并求其平均数，B 正确；细菌进行二分裂增殖，不能保证遗传物质平均分配，在稀释度足够高时，所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息不一定相同，C 错误；在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染，D 正确。二、非选择题(共 30 分)6(12 分)在肉牛产业中，常在饲料中加入一定量的尿素，因其有瘤胃，在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物以尿素作为唯一氮源。某同学设计了如下实验，对能分解尿素的细菌进行分离和计数。(1)图中弧线箭头
7、上“？”的具体操作是。(2)进行培养基配制和灭菌时，灭菌与调节 pH 的先后顺序是；纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是。(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入。培养后，若出现色，说明其中含有能够分解尿素的细菌。挑出菌落先调节 pH，后灭菌平板划线法、稀释涂布平板法酚红指示剂红(4)在实验中，当菌落数目稳定时，应选取方法计数；研究者每隔 24 小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止。平板计数因培养时间不足导致遗漏细菌菌落数目解析：(1)图中弧线箭头上“？”的具体操作是挑出菌落。(2)进行培养基配制和灭菌时，为了防止灭菌后在调节 pH 时被杂菌污染的可能
8、，所以应采取先调节 pH，后灭菌。纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。(3)鉴定分离纯化的菌种为尿素分解菌，根据尿素分解菌产生的脲酶将尿素分解产生的氨使酚红指示剂显红色的原理，所以可在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养后，若出现红色就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。(4)在实验中，当菌落数目稳定时，应选取平板计数方法计数；在实验中，研究者每隔 24 小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足导致遗漏细菌数目。7(18 分)自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后
9、进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。实验步骤：制备稀释倍数为 101、102、103、104、105、106 的系列稀释液。用稀释涂布平板法接种样品。适宜温度下培养。结果分析：(1)测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为 106 的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是。A一个平板，统计的菌落数是 23B两个平板，统计的菌落数是 22 和 26，取平均值 24C三个平板，统计的菌落数分别是 21、5 和 52，取平均值 26D四个平板，统计的菌落数分别是 21、30、24 和 25，取平均值25D(2)一同学在稀释倍数为 106 的培养基中测得平板上菌落数的平均值为 23.4，那么，每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为 0.2 mL)。(3)用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量，因为。(4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？。1.17108多当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的是一个菌落不能。因为不能排除杂菌来自培养基或来自接种培养的过程解析：谢谢观赏！Thanks!
