1、第6章 从杂交育种到基因工程 第2节 基因工程及其应用 人教版必修2 怎样让奶牛产出人奶呢？人的细胞人乳铁蛋白基因奶牛的细胞目的基因供体细胞受体细胞剪刀运载体针线一、基因工程的基本步骤（一）提取目的基因（二）目的基因与运载体结合（三）将目的基因导入受体细胞（四）目的基因的检测和表达 1、要想获得目的基因必须用限制酶切几个切口？思考与讨论:目的基因 目的基因 黏性末端黏性末端GCTATAGTATA 2、会产生几个黏性末端？思考与讨论:目的基因 基因的运载体 G C T T A AA A T T CGG C T T A AA A T T CGG C T T A AA A T T CG用同种限制酶切
2、割G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GDNA连接酶 作为运载体必须具备哪些条件？1.能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。2.具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。3.对宿主细胞无毒害作用。4.具有某些标记基因，便于进行筛选。1、常用的受体细胞：大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞等2、常用微生物作受体细胞的原因：微生物增殖快、代谢快、目的产物多。3、若运载体是质粒，受体细胞为细菌应作何处理：应用CaCl2处理目的是：增大细胞壁的通透性操作过程中用到哪些工具？（一）基因的“剪刀”、分布：主要在微生物中 专一性 3,5-磷酸二酯键 一般产生黏性末
3、端（或产生平末端）限制性核酸内切酶 二、基因工程的工具、结果：3、切割具体部位：、作用特点：（二）基因的针线DNA连接酶 GCTATAGTATA 作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。连接的是什么部位?3,5-磷酸二酯键 DNA聚合酶和DNA连接酶的比较 不同点相同点DNA聚合酶DNA连接酶连接DNA片段不需要模板连接的是游离的脱氧核苷酸需要模板连接不同脱氧核苷酸之间的磷酸和脱氧核糖，形成磷酸二酯键（三）基因的运输工具运载体 1、功能：2、常用的运载体：3、必须具备的条件 1.原理：基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。三、基
4、因工程的概念体外 4.结果：3.操作环境：2.操作水平：、基因工程与作物育种四、基因工程的应用生长快、肉质好的转基因鱼(中国)转基因的紫番茄 2、基因工程与药物研制 3、环境保护 超级细菌讨论：转基因食品安全吗？练习 1.基因工程的正确操作步骤是（）使目的基因与运载体结合将目的基因导入受体细胞检测目的基因的表达是否符合特定性状要求提取目的基因A.B.C.D.C2.要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是()限制酶 连接酶 解旋酶 还原酶 A3.基因工程技术中的目的基因主要来源于 ()A.自然界现存在生物体内的基因 B.自然突变产生的新基因 C.人工诱变产生的新基因 D.科学家在实验室中人工合成的基因 A4.下列关于基因工程的叙述中,正确的是()A.限制酶只用于提取目的基因 B.细菌体内的环状DNA均可作运载体 C.DNA连接酶可用于目的基因和运载体的连接 D.重组DNA分子一旦进入受体细胞,基因工程则完成.5.以下说法正确的是()A.目的基因是指重组DNA B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C.DNA重组所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 D.只要受体细胞中含有目的基因，目的基因就一定能够成功表达 CB
