1、专题1 基因工程12 基因工程的基本操作程序专题1 基因工程阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测和鉴定等步骤。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四知识点一 目的基因的获取1.目的基因：主要是指_的基因，也可以是一些具有调控作用的因子。编码蛋白质栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四2.目的基因的获取方法(1)从基因文库中获取基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片段，导入_中储存，各个受体菌分别含有这种
2、生物的不同的基因，称为基因文库。种类基因组文库：包含一种生物_基因部分基因文库：包含一种生物的_基因提取依据：基因的核苷酸序列、基因的功能、_、基因的转录产物 mRNA，以及基因的表达产物蛋白质等特性。受体菌的群体所有的一部分基因在染色体上的位置栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四(2)利用 PCR 技术扩增目的基因PCR 的含义：是一项在生物体外复制_的核酸合成技术。目的：短时间内大量扩增目的基因。原理：_。特定DNA片段DNA双链复制栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四过程第一步：加热至
3、 9095，_；第二步：冷却至 5560，_结合到互补 DNA链；第三步：加热至 7075，_(Taq 酶)从引物起始进行互补链的合成。如此重复循环多次。特点：指数形式扩增。DNA解链引物热稳定DNA聚合酶栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四(3)人工合成如果目的基因较小，核苷酸序列又已知，可通过 DNA 合成仪用_人工合成。化学方法栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四1cDNA 文库与基因组文库的区别 文库类型cDNA 文库基因组文库 文库大小小大基因中启动子无有基因中内含子无有 基因多少
4、某种生物的部分基因某种生物的全部基因物种间的基因交流可以部分基因可以栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四2.PCR 技术与 DNA 复制的区别项目DNA 复制PCR 技术 解旋方式解旋酶催化DNA 在高温作用下变性解旋场所细胞内(主要在细胞核内)细胞外(主要在扩增仪内)酶解旋酶、普通的DNA 聚合酶等耐热的 DNA 聚合酶(Taq 酶)温度条件细胞内温和条件需控制温度，在较高温度下进行合成的对象DNA 分子DNA 片段或基因栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四3.获取目的基因的方法项目基因组
5、文库部分基因文库(如cDNA文库)PCR 技术扩增 人工合成过程 栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四项目基因组文库部分基因文库(如 cDNA 文库)PCR 技术扩增 人工合成优点操作简单专一性强可在短时间内大量扩增目的基因专一性强，可产生自然界中不存在的新基因缺点工作量大、盲目性大、专一性差操作过程较麻烦，技术要求过高需要严格控制温度、技术要求高适用范围小栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四1下列有关获取目的基因的方法的叙述，错误的是()A直接分离目的基因的方法的优点是操作简便，缺点是工作
6、量大，具有一定的盲目性B由于真核细胞的基因含有不表达的 DNA 片段，一般使用人工合成的方法C目前人工合成基因的方法主要有两种，分别是反转录法和化学合成法DPCR 技术的原理是 DNA 复制，需要 RNA 聚合酶催化 DNA合成栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四解析：选 D。PCR 技术的原理是 DNA 分子的复制，需要耐高温的 DNA 聚合酶催化 DNA 合成，并以脱氧核苷酸等为原料。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四2(2019湖北黄冈高二期中)下图表示基因工程中获取水稻某目的基因的
7、不同方法。下列相关叙述中正确的是()A三种方法都需要酶并均在体外进行B碱基对的排列顺序均相同C三种方法均属于人工合成法D方法 a 不遵循中心法则栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四解析：选 A。这三种方法都是在体外进行的，且都用到酶(方法a 需要逆转录酶和 DNA 聚合酶；方法 b 需要限制酶；方法 c需要 DNA 聚合酶)，A 正确；通过方法 a 得到的目的基因不含有内含子，通过方法 c 得到的目的基因的碱基序列可能有多种，因此碱基对的排列顺序不都相同，B 错误；图示 a 和 c属于人工合成法，而 b 是从供体细胞的 DNA 中直接分离目的
8、基因的方法，C 错误；方法 a 遵循中心法则，D 错误。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四3(2019苏州高二检测)以下为形成 cDNA(图中的单链 DNA)过程和 PCR 扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是(多选)()栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四A催化过程的酶是逆转录酶B过程发生的变化是引物与单链 DNA 结合C催化过程的酶都是 DNA 聚合酶，都能耐高温D如果 RNA 单链中 A 与 U 之和占该链碱基含量的 40%，则一个双链 DNA 中，A 与 U 之和也占该 DN
9、A 碱基含量的 40%栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四解析：选 AB。由题意可知，分别表示逆转录、DNA的复制、DNA 解链、引物结合到互补 DNA 链及互补链的合成，B 正确；过程由逆转录酶催化完成，A 正确；催化过程的酶都是 DNA 聚合酶，过程是在 7075 的高温条件下进行的，只有该过程中的酶需耐高温，C 错误；在 DNA 分子中有 T 无 U，D 错误。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四知识点二 基因表达载体的构建1构建基因表达载体的目的(1)使 目 的 基 因 在 _ 中
10、稳 定 存 在，并 且 可 以_给下一代。(2)使目的基因能够_和发挥作用。受体细胞遗传表达栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四2基因表达载体的组成启动子终止子标记基因栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四3基因表达载体的功能：通过基因表达载体将_导入受体细胞。目的基因基因表达载体的组成两子启动和终止；目的基因在中间；标记基因来筛选。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四1真核细胞的基因结构(1)结构：编码区：内含子、外显子；非编码区：启动子、
11、终止子。基因结构如下图所示：栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四(2)表达：只有编码区能转录生成 RNA，且内含子转录生成的部分要剪切掉，即转录生成的 mRNA 只有外显子的对应部分。因此，以 mRNA 为模板，反转录产生的目的基因中没有内含子、启动子和终止子。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四2.基因表达载体的组成目的基因：主要是指编码蛋白质的基因启动子本质：一段有特殊结构的DNA片段位置：基因的首端功能：是RNA聚合酶识别和结合的 部位，驱动目的基因转录出mRNA终止子本质：一段有特殊
12、结构的DNA短片段位置：基因的尾端功能：使转录在所需要的地方停止下来复制原点：使目的基因复制和传递标记基因：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四基因表达载体易错点剖析(1)基因工程中的基因表达载体载体：基因表达载体与载体相比增加了目的基因。(2)目的基因插入位点不是随意的：基因表达载体需要启动子与终止子的调控，所以目的基因应插入启动子和终止子之间的部位，若目的基因插入启动子部位，启动子将失去原功能。(3)切割目的基因和载体并非只能用同一种限制酶。如果两种不同限制酶切割后形成的黏性
13、末端相同，在 DNA 连接酶的作用下目的基因与载体也可以连接起来。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四交汇点 1 启动子、终止子和起始密码子、终止密码子(1)启动子、终止子是基因表达载体上的具有特殊结构的_片段。(2)起始密码子、终止密码子是_上的三个相邻碱基。交汇点 2 复制原点和启动子(1)复制原点位于载体的开始端，驱动载体的_，若复制原点被破坏，则重组载体将无法复制。(2)启动子则位于某基因的首端，负责驱动该基因的_。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四答案：交汇点 1(1)DNA(2
14、)mRNA交汇点 2(1)自我复制(2)转录 栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四1(2019江苏无锡高二期末)环境雌激素(EEs)会影响动物和人类的性腺发育。斑马鱼在 EEs 的诱导下，会表达出卵黄蛋白原(vtg)。已知绿色荧光蛋白(GFP)基因能使斑马鱼发光，欲获得能检测水中是否含有 EEs 的转基因斑马鱼，下列操作合理的是()A将 EEs 基因的启动子与 GFP 基因重组B将 vtg 基因的启动子与 GFP 基因重组C将 GFP 基因的启动子与 GFP 基因重组D将 GFP 基因的启动子与 vtg 基因重组栏目导引专题1 基因工程知识点
15、二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四解析：选 B。由题意可知，环境中的 EEs 可诱导斑马鱼体内 vtg基因的表达，在不含 EEs 的环境中，斑马鱼体内 vtg 基因不能表达。因此，只要将 vtg 基因的启动子与 GFP 基因重组并导入斑马鱼体内，便能通过斑马鱼是否发光来检测水中是否含 EEs。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四2(2019江苏扬州期末)下图所示是利用基因工程生产可食用疫苗的部分过程，其中 Pst、Sma、EcoR、Apa 为四种限制性核酸内切酶。下列有关说法正确的是()栏目导引专题1 基因工程知识点二
16、知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四A一种限制性核酸内切酶不止识别一种特定的脱氧核苷酸序列B表达载体构建时需要用到 Sma、Pst 限制性核酸内切酶C抗卡那霉素基因的主要作用是促进抗原基因在受体细胞中表达D除图示标注的结构外表达载体中还应有启动子和终止子等栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四解析：选 D。限制性核酸内切酶具有特异性，即一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列并在特定的位点切割，A 错误；用 Sma 限制酶切割会破坏目的基因，因此表达载体构建时需要用 EcoR、Pst 限制性核酸内切酶，B 错误；
17、抗卡那霉素基因的主要作用是筛选含有目的基因的受体细胞，C 错误；基因表达载体的组成包括启动子、标记基因、目的基因和终止子等，因此除图示标注的结构外表达载体中还应有启动子和终止子等，D 正确。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四知识点三 将目的基因导入受体细胞1.转化的概念：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内_的过程。2.将目的基因导入植物细胞(1)_法：将目的基因导入双子叶植物和裸子植物。(2)基因枪法：将目的基因导入单子叶植物常用的方法。(3)_法：我国科学家独创的一种方法。维持稳定和表达农杆菌转化花粉管通道栏目导引专题1 基因工程知
18、识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四3.将目的基因导入动物细胞(1)方法：_。(2)常用受体细胞：_。显微注射法受精卵栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四4将目的基因导入微生物细胞(1)方法用_处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中 DNA 分子的生理状态(这种细胞称为_)。感受态细胞吸收_。(2)受体细胞：原核细胞(使用最广泛的是大肠杆菌细胞)。(3)原核生物的特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。Ca2感受态细胞重组表达载体DNA分子栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练
19、强化提升 知识点四1农杆菌转化法中的两次拼接和两次导入栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四第一次拼接是将目的基因拼接到 Ti 质粒的 T-DNA 上；第二次拼接(非人工操作)是指插入目的基因的 TDNA 被拼接到受体细胞的染色体 DNA 上。第一次导入是将含目的基因的 Ti 质粒导入农杆菌；第二次导入(非人工操作)是指含目的基因的T-DNA 导入受体细胞。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四2不同受体细胞的常用导入方法种类项目 植物细胞动物细胞微生物细胞 常用方法农杆菌转化法显微注射法Ca2
20、处理法受体细胞体细胞受精卵原核细胞 转化过程目的基因插入Ti 质粒的 TDNA 上导入植物细胞整合到受体细胞的 DNA 中表达目的基因表达载体提纯取卵(受精卵)显微注射受精卵发育获得具有新性状的动物Ca2处理细胞感受态细胞表达载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收 DNA 分子栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四1(2019江西南昌第十中学期中)受体细胞不同，将目的基因导入受体细胞的方法也不相同，下列受体细胞与导入方法匹配错误的是()选项受体细胞导入方法 A棉花细胞花粉管通道法B大肠杆菌农杆菌转化法C羊受精卵显微注射技术D小麦细胞基因枪法栏目导引
21、专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四解析：选 B。花粉管通道法是一种十分简便、经济的方法，我国的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的，A 正确；将目的基因导入微生物细胞，常采用感受态细胞法(Ca2处理法)，这种方法能使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中 DNA 分子的生理状态，B 错误；显微注射技术是将目的基因导入动物细胞(如羊受精卵)的最常用、最有效的方法，C 正确。双子叶植物和裸子植物常用农杆菌转化法导入目的基因，单子叶植物(如小麦)可用基因枪法将目的基因导入细胞，D 正确。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化
22、提升 知识点四2(2019镇江高二检测)下图表示培育转基因抗植物病毒番茄的过程示意图。下列叙述正确的是(多选)()栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四A过程 A 需要限制酶和 DNA 连接酶的参与B过程 B 需要用 CaCl2 处理，以提高番茄细胞壁的通透性C抗植物病毒基因一旦整合到番茄细胞的染色体上，就能正常表达D转基因抗植物病毒番茄是否培育成功可通过抗病毒接种实验进行鉴定栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四解析：选 AD。题图中过程 A 为构建基因表达载体，需要用到限制酶和 DNA 连接
23、酶，A 正确；CaCl2 处理只是提高农杆菌细胞细胞壁的通透性，B 错误；抗植物病毒基因整合到番茄细胞的染色体上，不一定能表达，C 错误；转基因抗植物病毒番茄是否培育成功可通过接种特定病毒，观察番茄是否被感染来进行鉴定，D 正确。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四知识点四 目的基因的检测与鉴定1.分子水平检测(1)检测转基因生物的 DNA 上是否插入了目的基因。方法：_技术。(2)检测目的基因是否转录出 mRNA。方法：_技术。(3)检测目的基因是否翻译成蛋白质。方法：_杂交技术。DNA分子杂交分子杂交抗原抗体2.个体生物学水平鉴定：抗虫、
24、抗病、抗逆性状的有无及程度。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四1目的基因的检测与鉴定方法栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四2关于不同分子检测的原理、场所、探针的异同(1)原理：转录水平的检测原理与复制水平的检测原理是相似的，只是被检测的物质不再是转基因生物的基因组 DNA，而是mRNA；翻译水平的检测，则是利用抗原与抗体特异性结合的原理。(2)场所：不论是复制水平、转录水平还是翻译水平的检测，都是在体外进行的。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升
25、 知识点四(3)探针：在 DNA 分子、mRNA 分子水平上检测目的基因是否插入、目的基因是否转录时，用的探针都是放射性同位素等标记的含有目的基因的 DNA 片段。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四3常见不同转基因生物在个体水平上鉴定、检测的方法个体水平的鉴定实际上是检测目的基因是否表达出所控制的性状，不同的转基因生物检测方法不同。转基因生物检测方法观察目标 抗虫植物害虫吞食害虫死亡抗病毒(菌)植物病毒(菌)感染未出现病斑抗盐植物盐水浇灌正常生长抗除草剂植物喷洒除草剂正常生长 获取目的基因产物的转基因生物提取细胞产物与天然产品进行功能活性比
26、较细胞产物功能活性正常栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四1(2019长沙高二检测)DNA 探针是利用放射性同位素等标记的特定DNA 片段。当 DNA 探针与待测的非标记单链 DNA(或 RNA)按碱基顺序互补结合时，形成标记 DNADNA(或标记 DNARNA)的双链杂交分子，可检测杂交反应结果。用某人的胰岛素基因制成 DNA 探针，能与之形成杂交分子的是()该人胰岛 A 细胞中的 DNA该人胰岛 B 细胞中的 mRNA该人胰岛 A 细胞中的 mRNA该人肝细胞中的 DNAA BCD栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标
27、检测 演练 强化提升 知识点四解析：选 C。DNA 单链能与其互补链及其转录产生的 mRNA分子互补配对而形成杂交分子；人体细胞中都含有胰岛素基因，但此基因只有在胰岛 B 细胞中才能进行转录。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四2下列判断抗虫基因是否成功转入棉花基因组的方法中，不属于分子检测的是()A通过观察害虫吃棉叶是否死亡B检测目的基因片段与 DNA 探针能否形成杂交带C检测目的基因转录形成的 mRNA 与 DNA 探针能否形成杂交带D检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂
28、达标检测 演练 强化提升 知识点四解析：选 A。A 项属于个体生物学水平的鉴定，不是分子检测。B、C 两项为分子检测，利用分子杂交技术，观察目的基因及目的基因转录形成的 mRNA 能否与 DNA 探针进行杂交形成杂交带；D 项也为分子检测内容，利用抗原抗体杂交的原理，检测基因表达产物能否与特定抗体形成杂交带。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四核心知识小结 要点回眸栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四核心知识小结 答题必备获取目的基因的常用方法：从基因文库中获取目的基因和利用PCR 技术扩增
29、目的基因。基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。培育转基因动物时，受体细胞一般是受精卵，目的基因的导入方法常用显微注射技术。检测目的基因是否导入和转录，常用分子杂交技术；检测是否翻译，常用抗原抗体杂交技术。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四拓宽教材1(选修 3 P11 图 110 改编)下图为某质粒限制酶酶切图谱。某基因不含图中限制酶识别序列。为使 PCR 扩增的该基因重组
30、进该质粒，则扩增的该基因两端需分别引入哪两种限制酶的识别序列()栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四ANde和 BamH BNde和 XbaCXba和 BamHDEcoR和 Kpn栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四解析：选 A。构建重组质粒时，要将目的基因插入到启动子和终止子之间，而且不能破坏启动子、终止子、复制原点、抗生素抗性基因等部位，故只能选用 Nde 和 BamH 切割质粒和含目的基因的 DNA 片段，因此在 PCR 扩增的该基因的两端需分别引入 Nde 和 BamH 两种限制酶的
31、识别序列。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四2(选修 3 P14 图 114 改编)下图为目的基因的检测示意图，结合图示回答以下问题：栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四(1)由上图 DNA 分子杂交可知：M 为_片段；N 为_片段。(2)检测转基因生物的染色体 DNA 上是否插入了目的基因：采用_技术。主要做法是用_作为探针，检测受体细胞的 DNA 中有无_。显示出杂交带，说明目的基因已经插入_中。(3)检测目的基因是否转录出了 mRNA：采用_技术。具体做法是用_作探针，与_杂交，如果
32、显示出杂交带，则表明目的基因转录出了 mRNA。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四答案：(1)目的基因 非目的基因(2)DNA 分子杂交 标记了放射性同位素的目的基因片段 目的基因 染色体 DNA(3)分子杂交 标记的目的基因 mRNA栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四精练好题3(2019河南郑州一中高二期中)下列关于基因文库的说法，错误的是()A基因文库可分为基因组文库和部分基因文库BcDNA 文库属于部分基因文库CcDNA 文库中的基因不含内含子，含有启动子D同种生物的 cDNA 文
33、库中基因数量较基因组文库少解析：选 C。cDNA 文库中的基因均不含内含子和启动子。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四4下列有关 PCR 技术的说法，不正确的是()APCR 是一项在生物体外复制特定的 DNA 片段的核酸合成技术BPCR 技术的原理是 DNA 双链复制C利用 PCR 技术获取目的基因的前提是要有一段已知的目的基因的核苷酸序列DPCR 扩增中需要解旋酶解开双链 DNA栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四解析：选 D。PCR 是一项在生物体外复制特定的 DNA 片段的核酸合成技
34、术，其原理是 DNA 双链复制，A、B 正确；利用PCR 技术获取目的基因的前提是要有一段已知的目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，C 正确；PCR 扩增中目的基因受热变性后解体为单链，不需要解旋酶解开双链DNA，D 错误。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四5(2019江苏南京三中期中)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，错误的是(多选)()A表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞中的 mRNA 反转录获得B表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原点C借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来D启动子和终止密码子均
35、在胰岛素基因的转录中起作用栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四解析：选 ABD。由于人肝细胞中胰岛素基因不能表达，所以无法利用肝细胞中的 mRNA 反转录获得胰岛素基因，A 错误；表达载体的复制启动于复制原点，胰岛素基因的转录启动于启动子，B 错误；抗生素抗性基因是标记基因，作用是检测受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有胰岛素基因的受体细胞筛选出来，C 正确；启动子是 RNA 聚合酶识别和结合的部位，是转录的起点，而终止密码子位于 mRNA 上，在翻译中起作用，D 错误。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练
36、强化提升 知识点四6(高考全国卷)图(a)中的三个 DNA 片段上依次表示出了EcoR、BamH 和 Sau3A 三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的 EcoR、Sau3A 的切点是唯一的)。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四根据基因工程的有关知识，回答下列问题：(1)经 BamH 酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被_酶切后的产物连接，理由是_。(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图(c)所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有_
37、，不能表达的原因是_。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四(3)DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来的酶，常见的有_和_，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是_。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四解析：(1)由图(a)可知，尽管 BamH 和 Sau3A 两种限制酶的识别位点不相同，但两种酶切割后产生的 DNA 片段具有相同的黏性末端，故被 BamH 酶切后得到的目的基因可以与图(b)中表达载体被 Sau3A 酶切后的产物连接。(2)运载体上的启动子和终止子具有调控目的基因表达的
38、作用，由于甲和丙的目的基因分别插入在启动子的上游和终止子的下游，故这两个运载体上的目的基因都不能被转录和翻译。(3)常见的 DNA 连接酶是 Ecoli DNA 连接酶和 T4DNA 连接酶，但作用有所差别，T4DNA 连接酶既能连接黏性末端，又能连接平末端，而Ecoli DNA 连接酶只能连接黏性末端。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四答案(1)Sau3A 两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端(2)甲和丙 甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的下游，二者的目的基因均不能被转录(3)Ecoli DNA 连接酶 T4D
39、NA 连接酶 T4DNA 连接酶栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四7(2019广东中山模拟)非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒感染家猪和各种野猪引起的一种急性、出血性、烈性传染病。科学家研究发现，非洲猪瘟的病毒是一种双链 DNA 病毒，病毒表面的 A 蛋白为主要抗原。研制预防非洲猪瘟病毒疫苗简要的操作流程如下：A基因 扩增 A基因 A基因表达载体受体细胞 A蛋白栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四(1)科学家研制疫苗的理论依据是_。(2)要获得大量的 A 基因，通常采用 PCR 技术进行扩增，前提是
40、 要 有 一 段 已 知 的A基 因 核 苷 酸 序 列，原 因 是_。在操作步骤中需要加热至 9095 的目的是_。(3)步骤所构建的基因表达载体中必需有标记基因，其作用是_。为检测受体细胞是否合成 A 蛋白，可以采用_的方法。栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四(4)若要高效地获得 A 蛋白，通常选用大肠杆菌作为受体细胞。因为大肠杆菌具有_(答出两点即可)等优点。在导入基因表达载体时常用_处理大肠杆菌。答案：(1)不同生物基因的基本单位和双螺旋结构相同，一切生物共用一套遗传密码(2)PCR 需要特定的引物，根据已知核苷酸序列来设计并合成引物 使 DNA 双链解聚为单链(3)鉴别和筛选含有目的基因的细胞 抗原抗体杂交(4)繁殖速度快；易培养；生成成本低 CaCl2 溶液栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四栏目导引专题1 基因工程知识点二知识点三知识点一随堂 达标检测 演练 强化提升 知识点四本部分内容讲解结束 按ESC键退出全屏播放
